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壳寡糖修饰猪圆环病毒疫苗的免疫原性及作用机制研究

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壳寡糖修饰猪圆环病毒疫苗的免疫原性及作用机制研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第1章 引言第13-47页
  1.1 猪圆环病毒疫苗第13-19页
    1.1.1 传统疫苗第14-15页
      1.1.1.1 灭活疫苗第14-15页
      1.1.1.2 亚单位疫苗第15页
    1.1.2 实验室疫苗第15-19页
      1.1.2.1 减毒活疫苗第15-16页
      1.1.2.2 RNA疫苗第16-17页
      1.1.2.3 DNA疫苗第17-18页
      1.1.2.4 新载体疫苗第18页
      1.1.2.5 标记疫苗第18-19页
    1.1.3 小结第19页
  1.2 疫苗佐剂及作用机制研究进展第19-29页
    1.2.1 铝佐剂作用机制第20-25页
      1.2.1.1 储库效应第20-21页
      1.2.1.2 细胞募集第21页
      1.2.1.3 抗原摄取和呈递第21-22页
      1.2.1.4 活化APC细胞第22-23页
      1.2.1.5 淋巴管迁移第23页
      1.2.1.6 诱发炎症第23-25页
    1.2.2 油乳佐剂MF59作用机制第25-27页
    1.2.3 壳聚糖作用机制第27-28页
    1.2.4 模式识别受体激动剂作用机制第28-29页
  1.3 糖类化合物在佐剂中应用第29-37页
    1.3.1 物理混合第30页
    1.3.2 递送系统第30-32页
    1.3.3 化学偶联第32-37页
      1.3.3.1 糖类第33-36页
      1.3.3.2 偶联技术第36页
      1.3.3.3 糖蛋白比值第36-37页
  1.4 壳寡糖研究进展第37-45页
    1.4.1 制备方法第38-39页
      1.4.1.1 酸水解第38页
      1.4.1.2 酶降解第38-39页
      1.4.1.3 分离纯化第39页
    1.4.2 药动学性质第39-40页
      1.4.2.1 吸收第39-40页
      1.4.2.2 分布第40页
      1.4.2.3 代谢第40页
      1.4.2.4 排泄第40页
    1.4.3 生物活性第40-45页
      1.4.3.1 抗炎第40-42页
      1.4.3.2 免疫调节第42-43页
      1.4.3.3 抗肿瘤活性第43-44页
      1.4.3.4 抑菌作用第44-45页
  1.5 壳寡糖疫苗佐剂活性第45页
  1.6 立题依据第45-47页
第2章 壳寡糖修饰疫苗制备及其免疫原性评价第47-71页
  2.1 引言第47页
  2.2 实验材料第47-49页
  2.3 实验方法第49-57页
  2.4 实验结果第57-69页
    2.4.1 壳寡糖平均分子量和组分分布第57-58页
    2.4.2 SDS-PAGE和凝胶色谱分析第58-59页
    2.4.3 理化性质研究第59-62页
      2.4.3.1 糖蛋白比第59页
      2.4.3.2 圆二色光谱第59-60页
      2.4.3.3 内源性荧光第60-61页
      2.4.3.4 动态光散射第61-62页
      2.4.3.5 核磁共振氢谱第62页
    2.4.4 特异性抗体滴度第62-63页
    2.4.5 特异性抗体亚型第63-65页
    2.4.6 淋巴细胞增殖第65-66页
    2.4.7 细胞因子检测第66-67页
    2.4.8 注射部位病理切片分析第67-68页
    2.4.9 代谢器官病理切片分析第68-69页
  2.5 小结与讨论第69-71页
第3章 脱乙酰度对壳寡糖修饰疫苗免疫原性影响第71-97页
  3.1 引言第71页
  3.2 实验材料第71-72页
  3.3 实验方法第72-78页
  3.4 实验结果第78-94页
    3.4.1 不同聚合度壳寡糖结构表征第78-81页
    3.4.2 SDS-PAGE和凝胶色谱分析第81-82页
    3.4.3 理化性质研究第82-84页
    3.4.4 特异性抗体及抗体亚型第84-87页
    3.4.5 淋巴细胞增殖第87-88页
    3.4.6 细胞亚群分析第88-92页
    3.4.7 细胞因子检测第92-93页
    3.4.8 注射部位病理切片第93-94页
    3.4.9 免疫小鼠脏器指数第94页
  3.5 小结和讨论第94-97页
第4章 载体蛋白对壳寡糖修饰疫苗免疫原性影响第97-121页
  4.1 引言第97页
  4.2 实验材料第97-98页
  4.3 实验方法第98-105页
  4.4 实验结果第105-119页
    4.4.1 凝胶色谱和SDS-PAGE分析第105-106页
    4.4.2 理化性质研究第106-108页
    4.4.3 BMDC细胞成熟作用第108-112页
    4.4.4 腹腔巨噬细胞和脾细胞增殖活性第112页
    4.4.5 体重及脏器指数分析第112-114页
    4.4.6 特异性抗体及抗体亚型第114-117页
    4.4.7 淋巴细胞增殖第117页
    4.4.8 细胞因子检测第117-119页
  4.5 小结与讨论第119-121页
第5章 壳寡糖修饰提高疫苗免疫原性作用机制研究第121-149页
  5.1 引言第121-122页
  5.2 实验材料第122-123页
  5.3 实验方法第123-131页
  5.4 实验结果第131-145页
    5.4.1 对RAW264.7细胞生长作用第131-134页
    5.4.2 促进NO分泌第134-135页
    5.4.3 分泌NO信号通路第135-137页
    5.4.4 转录水平分析第137-139页
    5.4.5 FITC标记抗原鉴定第139-140页
    5.4.6 荧光显微镜观察RAW264.7细胞吞噬作用第140-142页
    5.4.7 流式细胞仪检测RAW264.7细胞吞噬作用第142-143页
    5.4.8 TLRs蛋白表达水平第143-144页
    5.4.9 NF-κB蛋白表达水平第144-145页
  5.5 小结与讨论第145-149页
第6章 结论和展望第149-153页
  6.1 研究结论第149-150页
  6.2 本论文创新点第150-151页
  6.3 工作展望第151-153页
参考文献第153-171页
附录 缩略词表第171-173页
致谢第173-175页
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第175页

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