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葡萄霜霉病程中白藜芦醇及其衍生物的积累及抗病机制

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葡萄霜霉病程中白藜芦醇及其衍生物的积累及抗病机制
论文目录
 
摘要第5-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略语及中英文对照第8-13页
第一章 文献综述第13-31页
  1.1 葡萄与霜霉病介绍第13页
  1.2 葡萄霜霉病抗性机理的研究第13-16页
    1.2.1 葡萄霜霉菌及入侵致病过程第13-15页
    1.2.2 葡萄霜霉病抗性机理研究现状第15-16页
  1.3 葡萄白藜芦醇及其衍生物的研究进展第16-19页
    1.3.1 白藜芦醇的化学性质第16-17页
    1.3.2 白藜芦醇合成酶的研究第17-18页
    1.3.3 葡萄白藜芦醇衍生物的合成第18页
    1.3.4 葡萄白藜芦醇及其衍生物的生物活性第18-19页
  1.4 葡萄白藜芦醇及其衍生物对葡萄的抗病作用第19-21页
  1.5 葡萄白藜芦醇及其衍生物合成酶基因的研究进展第21-26页
    1.5.1 植物中白藜芦醇合成酶(Stilbene synthase,STS)第21-22页
    1.5.2 葡萄白藜芦醇合成酶基因的研究第22-24页
    1.5.3 葡萄白藜芦醇-O-甲基转移酶基因(ReveratrolO-methyltransferase,ROMT)第24-26页
  1.6 葡萄白藜芦醇及其衍生物合成酶基因启动子结构与功能研究第26-28页
    1.6.1 葡萄白藜芦醇及其衍生物合成酶基因启动子的扩增第26-27页
    1.6.2 葡萄STS、ROMT和ROGT基因表达的影响因素第27-28页
  1.7 葡萄转基因研究进展第28-29页
    1.7.1 葡萄瞬时转化研究进展第28-29页
    1.7.2 葡萄白藜芦醇及其衍生物相关基因转化研究进展第29页
  1.8 本论文的目的意义和研究内容第29-31页
    1.8.1 目的意义第29页
    1.8.2 研究内容第29-31页
第二章 不同抗性葡萄品种的白藜芦醇及其衍生物的积累模式第31-43页
  2.1 材料与方法第31-36页
    2.1.1 实验材料第31-32页
    2.1.2 实验仪器与设备第32页
    2.1.3 实验试剂第32页
    2.1.4 扫描电镜观察材料处理第32-33页
    2.1.5 CTAB法提取葡萄总RNA及消化DNA第33-34页
    2.1.6 反转录合成cDNA第34页
    2.1.7 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第34-35页
    2.1.8 白藜芦醇及其衍生物的提取第35页
    2.1.9 白藜芦醇及其衍生物的UPLC-ESI-MS/MS检测第35-36页
    2.1.10 统计分析第36页
  2.2 结果第36-40页
    2.2.1 活体接种霜霉菌的叶片观察结果第36-37页
    2.2.2 UPLC-ESI-MS/MS检测白藜芦醇及其衍生物含量第37-38页
    2.2.3 qRT-PCR检测白藜芦醇及其衍生物相关合成酶基因表达量第38-40页
  2.3 讨论第40-43页
第三章 不同抗性葡萄品种STS、ROMT和GT基因启动子克隆及表达活性分析第43-63页
  3.1 材料与方法第43-53页
    3.1.1 实验材料第43页
    3.1.2 实验仪器与设备第43-44页
    3.1.3 实验试剂第44-45页
    3.1.4 葡萄叶片DNA提取与纯化第45页
    3.1.5 葡萄STS、ROMT和GT基因启动子序列的克隆第45-47页
    3.1.6 扩增产物的电泳检测、回收纯化第47页
    3.1.7 回收片段的连接克隆测序第47-48页
    3.1.8 瞬时表达载体构建第48-50页
    3.1.9 葡萄离体叶片瞬时转化第50-51页
    3.1.10 葡萄瞬时转化叶片GUS活性检测第51-52页
    3.1.11 葡萄瞬时转化叶片GFP蛋白相对荧光强度检测第52页
    3.1.12 统计分析第52-53页
  3.2 实验结果第53-61页
    3.2.1 葡萄STS、ROMT和GT基因启动子序列克隆与分析第53页
    3.2.2 葡萄STS、ROMT和GT基因启动子顺式作用元件分析第53-55页
    3.2.3 葡萄STS基因启动子分析第55-57页
    3.2.4 圆叶葡萄品种MrSTS基因启动子的功能分析第57-59页
    3.2.5 葡萄STS、ROMT和GT基因启动子启动GUS活性分析第59-61页
  3.4 讨论第61-63页
第四章 激素对白藜芦醇及其衍生物的积累和相关基因表达的影响第63-75页
  4.1 材料与方法第64-65页
    4.1.1 实验材料第64页
    4.1.2 实验仪器与设备第64页
    4.1.3 实验试剂第64页
    4.1.4 激素喷施实验第64页
    4.1.5 激素喷施后接种霜霉实验第64页
    4.1.6 CTAB法提取葡萄叶片总RNA及纯化第64-65页
    4.1.7 反转录cDNA合成第65页
    4.1.8 荧光实时定量PCR第65页
    4.1.9 白藜芦醇及其衍生物和植物激素提取和UPLC-ESI-MS/MS检测第65页
    4.1.10 统计分析第65页
  4.2 结果第65-73页
    4.2.1 活体接种霜霉菌对植物激素含量的影响第65-66页
    4.2.2 活体喷施ABA对白藜芦醇及其衍生物含量及相关基因表达的影响第66-68页
    4.2.3 活体喷施MeJA对白藜芦醇及其衍生物含量及相关基因表达的影响第68-69页
    4.2.4 活体喷施SA对白藜芦醇及其衍生物含量及相关基因表达的影响第69-70页
    4.2.5 喷施不同浓度激素ABA对白藜芦醇及其衍生物含量及相关基因表达的影响第70-72页
    4.2.6 活体喷施激素后接种霜霉对白藜芦醇及其衍生物相关基因表达的影响第72-73页
  4.3 讨论第73-75页
第五章 圆叶葡萄品种'NOBLE'MRSTS和MRROMT共转化载体的构建及验证第75-95页
  5.1 材料与方法第75-86页
    5.1.1 实验材料第75页
    5.1.2 实验仪器与设备第75-76页
    5.1.3 实验试剂第76页
    5.1.4 圆叶葡萄品种'Noble'MrSTS和MrROMT基因克隆第76-77页
    5.1.5 扩增产物的电泳检测、回收纯化第77页
    5.1.6 回收片段的连接克隆测序第77页
    5.1.7 MrSTS和MrROMT共转化双元表达载体的构建第77-85页
    5.1.8 MrSTS和MrROMT共转化双元表达载体的验证第85-86页
    5.1.9 统计分析第86页
  5.2 结果第86-94页
    5.2.1 圆叶葡萄品种'Noble'的MrSTS和MrROMT基因的克隆第86-88页
    5.2.2 P35S调控MrSTS和MrROMT共转化双元表达载体的构建第88-89页
    5.2.3 自身启动子调控MrSTS和MrROMT共转化双元表达载体的构建第89-91页
    5.2.4 烟草瞬时侵染GFP的荧光显微观察第91-92页
    5.2.5 烟草瞬时侵染后MrSTS和MrROMT基因表达第92-93页
    5.2.6 烟草瞬时侵染后白藜芦醇和紫檀芪含量第93-94页
  5.3 讨论第94-95页
第六章 结论与展望第95-97页
  6.1 结论第95-96页
  6.2 展望第96-97页
参考文献第97-110页
致谢第110-111页
附录第111-126页
作者简介第126页

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