论文目录 | |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-41页 |
引言 | 第14-15页 |
1.1 肥胖 | 第15-22页 |
1.1.1 肥胖的分类 | 第15页 |
1.1.2 肥胖的标准 | 第15-16页 |
1.1.3 肥胖人群的分布 | 第16-19页 |
1.1.4 肥胖的诱发因素 | 第19-21页 |
1.1.5 肥胖的危害 | 第21-22页 |
1.2 糖尿病 | 第22-28页 |
1.2.1 糖尿病的分类 | 第22页 |
1.2.2 糖尿病的检测和症状 | 第22-23页 |
1.2.3 糖尿病病人的分布 | 第23-26页 |
1.2.4 糖尿病的诱因 | 第26-27页 |
1.2.5 糖尿病的危害 | 第27-28页 |
1.3 MSTN | 第28-37页 |
1.3.1 MSTN的发现 | 第28页 |
1.3.2 MSTN的结构 | 第28-29页 |
1.3.3 MSTN的表达 | 第29-30页 |
1.3.4 MSTN的信号通路 | 第30-32页 |
1.3.5 MSTN的功能 | 第32-37页 |
1.4 FNDC5/Irisin | 第37-41页 |
1.4.1 FNDC5/Irisin的发现 | 第37-38页 |
1.4.2 FNDC5/Irisin的结构 | 第38-39页 |
1.4.3 FNDC5的表达 | 第39页 |
1.4.4 FNDC5/Irisin的功能 | 第39-41页 |
第二章 材料与方法 | 第41-63页 |
2.1 实验材料 | 第41-45页 |
2.1.1 实验动物 | 第41页 |
2.1.2 细胞 | 第41页 |
2.1.3 菌株,质粒和慢病毒 | 第41页 |
2.1.4 实验仪器 | 第41-42页 |
2.1.5 耗材 | 第42页 |
2.1.6 试剂和抗体 | 第42-44页 |
2.1.7 实验试剂的配制 | 第44-45页 |
2.1.8 实验分析软件 | 第45页 |
2.2 实验方法 | 第45-63页 |
2.2.1 细胞和组织基因组提取 | 第45-46页 |
2.2.2 感受态细胞的转化 | 第46页 |
2.2.3 质粒DNA提取 | 第46页 |
2.2.4 PCR反应条件及其体系 | 第46-48页 |
2.2.5 PCR产物的回收 | 第48页 |
2.2.6 PCR产物连接T载体 | 第48-49页 |
2.2.7 RNA的提取 | 第49-50页 |
2.2.8 反转录和qPCR | 第50-51页 |
2.2.9 细胞和组织总蛋白的提取 | 第51页 |
2.2.10 蛋白浓度的测定 | 第51页 |
2.2.11 蛋白电泳和Western blot | 第51-53页 |
2.2.12 酶联免疫实验 | 第53-54页 |
2.2.13 cDNA5'末端快速扩增(5'RACE) | 第54-56页 |
2.2.14 cDNA 3'末端快速扩增(3'RACE) | 第56-59页 |
2.2.15 HE染色和免疫组织化学 | 第59-60页 |
2.2.16 原代成肌细胞分离 | 第60页 |
2.2.17 原代前脂肪细胞分离 | 第60-61页 |
2.2.18 前脂肪细胞诱导成脂分化及其油红O染色 | 第61页 |
2.2.19 SiRNA载体构建和慢病毒载体的包被及其转染 | 第61-63页 |
第三章 实验结果与分析 | 第63-92页 |
3.1 MSTN基因编辑梅山猪的配种与基因型鉴定 | 第63-64页 |
3.1.1 MSTN基因编辑猪配种 | 第63页 |
3.1.2 梅山猪MSTN基因型的鉴定 | 第63-64页 |
3.2 MSTN~(-/-)梅山猪骨骼肌的变化 | 第64-70页 |
3.2.1 MSTN~(-/-)基因型梅山猪体重的变化 | 第64-65页 |
3.2.2 MSTN~(-/-)基因型梅山猪不同部位骨骼肌含量的变化 | 第65-66页 |
3.2.3 MSTN~(-/-)基因型梅山猪瘦肉率的变化 | 第66-67页 |
3.2.4 MSTN~(-/-)基因型梅山猪眼肌面积的变化 | 第67-68页 |
3.2.5 MSTN~(-/-)基因型梅山猪骨骼肌中肌纤维面积的变化 | 第68-69页 |
3.2.6 MSTN~(-/-)基因型梅山猪骨骼肌中肌纤维数目的变化 | 第69-70页 |
3.3 MSTN~(-/-)基因型梅山猪脂肪的变化 | 第70-76页 |
3.3.1 MSTN~(-/-)基因型梅山猪皮下脂肪含量的变化 | 第70页 |
3.3.2 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背膘厚度的变化 | 第70-71页 |
3.3.3 MSTN~(-/-)基因型梅山猪板油含量的变化 | 第71页 |
3.3.4 MSTN~(-/-)基因型梅山猪脂肪相关因子的变化 | 第71-72页 |
3.3.5 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背部皮下脂肪细胞的大小 | 第72-73页 |
3.3.6 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背部皮下脂肪中UCP家族蛋白的变化 | 第73-74页 |
3.3.7 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背部皮下脂肪中棕色脂肪标记基因的变化 | 第74-75页 |
3.3.8 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背部皮下脂肪中米色脂肪标记基因的变化 | 第75-76页 |
3.4 MSTN~(-/-)基因型梅山猪的胰岛素的变化 | 第76-79页 |
3.4.1 MSTN~(-/-)基因型梅山猪血糖含量的变化 | 第76页 |
3.4.2 MSTN~(-/-)基因型梅山猪血清中胰岛素的含量 | 第76-77页 |
3.4.3 MSTN~(-/-)基因型梅山猪胰岛素敏感性的变化 | 第77-78页 |
3.4.4 MSTN~(-/-)基因型梅山猪的葡萄糖耐受性的变化 | 第78页 |
3.4.5 MSTN~(-/-)基因型梅山猪IRS1和InsR的变化 | 第78-79页 |
3.4.6 MSTN~(-/-)基因型梅山猪胰岛素信号通路的变化 | 第79页 |
3.5 MSTN~(-/-)基因型梅山猪背最长肌中FNDC5含量的变化 | 第79-80页 |
3.6 梅山猪FNDC5表达模式 | 第80-84页 |
3.6.1 NCBI中猪FNDC5的序列 | 第80-81页 |
3.6.2 猪FNDC5的转录本 | 第81-82页 |
3.6.3 梅山猪FNDC5的表达谱 | 第82-84页 |
3.7 FNDC5促进梅山猪原代前脂肪细胞成脂分化 | 第84-85页 |
3.8 MSTN与FNDC5调控原代前脂肪细胞成脂分化的关系 | 第85-86页 |
3.8.1 MSTN~(-/-)梅山猪原代前脂肪细胞成脂分化能量增强 | 第85-86页 |
3.8.2 促进FNDC5的表达并不是MSTN调控前脂肪细胞成脂分化的唯一途径 | 第86页 |
3.9 FNDC5增强了梅山猪原代成肌细胞的胰岛素信号通路 | 第86-88页 |
3.10 MSTN与FNDC5调控原代成肌细胞胰岛素信号通路的关系 | 第88-89页 |
3.10.1 MSTN~(-/-)梅山猪原代成肌细胞的胰岛素信号通路明显增强 | 第88页 |
3.10.2 促进FNDC5的表达并不是MSTN调控原代成肌细胞胰岛素信号通路的唯一途径 | 第88-89页 |
3.11 讨论与分析 | 第89-92页 |
第四章 结论 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
附录 | 第105-106页 |
作者简历 | 第106页 |