论文目录 | |
| 引言 | 第10-11
页 |
| 第一章 坪草腐霉病菌毒素产生除草活性物质的条件优化 | 第11-30
页 |
| 1 材料与方法 | 第12-18
页 |
| · 材料 | 第12-13
页 |
| · 供试菌种 | 第12
页 |
| · 供试培养基 | 第12-13
页 |
| · 供试植物 | 第13
页 |
| · 供试试剂 | 第13
页 |
| · 方法 | 第13-18
页 |
| · 菌种的分离 | 第13-14
页 |
| · 菌饼的制备 | 第14
页 |
| · 菌种的鉴定 | 第14
页 |
| · 病菌粗毒素的制备 | 第14-15
页 |
| · 毒素产生条件的优化 | 第15
页 |
| · 病原菌培养过程中糖的利用率测定 | 第15-16
页 |
| · 菌株的紫外诱变 | 第16-17
页 |
| · 高除草活性诱变菌株的发酵试验 | 第17
页 |
| · 除草活性测定 | 第17-18
页 |
| 2 结果与分析 | 第18-27
页 |
| · 菌种的分离纯化 | 第18
页 |
| · PA1和PA5菌株的鉴定及生物学特性 | 第18-20
页 |
| · PA1和PA5菌株的鉴定结果 | 第18-19
页 |
| · PA1、PA5菌株在不同温度下的生长速率测定结果 | 第19-20
页 |
| · 菌种的保存条件 | 第20
页 |
| · 不同培养基对坪草腐霉菌产生除草活性物质的影响 | 第20-21
页 |
| · 坪草腐霉粗毒素对作物的安全性和杀草谱 | 第21
页 |
| · 影响坪草腐霉产生除草活性物质的条件 | 第21-23
页 |
| · 培养时间的影响 | 第21-23
页 |
| · 不同pH值的影响 | 第23
页 |
| · 振荡和静止培养的影响 | 第23
页 |
| · 孢子囊和卵孢子产生毒素对杂草的抑制作用 | 第23
页 |
| · 不同培养时间PD培养基中葡萄糖和PS培养基中蔗糖含量的变化 | 第23-24
页 |
| · 紫外线诱变菌株的生长量和对杂草的抑制作用 | 第24-26
页 |
| · 不同诱变菌株生长量 | 第24-25
页 |
| · 不同诱变菌株的毒素对杂草的抑制作用 | 第25-26
页 |
| · 诱变菌株发酵滤液pH值的变化及粗毒素除草生物活性测定 | 第26-27
页 |
| 3 讨论 | 第27-30
页 |
| 第二章 坪草腐霉病菌具有除草活性组分分离纯化与结构鉴定 | 第30-52
页 |
| 1 材料与方法 | 第30-36
页 |
| · 材料 | 第30-31
页 |
| · 供试菌种 | 第30
页 |
| · 供试培养基 | 第30-31
页 |
| · 供试植物 | 第31
页 |
| · 供试试剂 | 第31
页 |
| · 供试仪器 | 第31
页 |
| · 方法 | 第31-36
页 |
| · 粗毒素的制备 | 第31
页 |
| · 培养滤液中蛋白质的分离 | 第31-32
页 |
| · 影响除草活性物质分离的条件 | 第32
页 |
| · 菌丝中除草活性物质的提取 | 第32
页 |
| · 粗毒素中除草活性物质的初分离——萃取法 | 第32-34
页 |
| · 除草活性初分离物的性质鉴定 | 第34
页 |
| · 活性物质的分离——薄层层析法 | 第34-35
页 |
| · 除草活性组分的制备——高效液相色谱法 | 第35
页 |
| · 粗毒素和菌丝中白色油状物的分离和溶解度测定 | 第35
页 |
| · 除草活性组分的结构鉴定 | 第35-36
页 |
| 2 结果与分析 | 第36-49
页 |
| · 不同有机溶剂萃取所得粗毒素对杂草种子萌发及生长抑制作用 | 第36
页 |
| · 分离蛋白质及蛋白质分离后的培养滤液粗毒素的除草活性测定 | 第36
页 |
| · 培养滤液不同pH值对除草活性的影响 | 第36-37
页 |
| · 培养滤液温度对除草活性的影响 | 第37-38
页 |
| · 培养滤液的盐浓度对除草活性物质萃取的影响 | 第38
页 |
| · 活性炭对培养滤液中的除草活性组分的吸附作用 | 第38
页 |
| · 菌丝提取物对杂草的生物活性 | 第38
页 |
| · 粗毒素中除草活性物质的初步分离 | 第38-39
页 |
| · 除草活性物质的官能团鉴定 | 第39
页 |
| · 除草活性物质的分离——薄层层析法 | 第39-41
页 |
| · 不同展开剂对除草活性物质的分离效果 | 第39-40
页 |
| · 不同Rf值物质的除草活性 | 第40-41
页 |
| · 除草活性组分的分离和制备——高效液相色谱法 | 第41-44
页 |
| · Rf值为·的分离物除草活性组分的制备 | 第41-42
页 |
| · Rf值为·的分离物除草活性组分的制备 | 第42-43
页 |
| · Rf值为·的分离物除草活性组分的制备 | 第43-44
页 |
| · 除草活性组分的结构鉴定 | 第44-46
页 |
| · 组分Ⅰ的结构鉴定 | 第44-46
页 |
| · 邻苯二甲酸二甲酯的除草活性 | 第46
页 |
| · 粗毒素和菌丝提取物中白色油状物的分离及生物活性 | 第46-49
页 |
| · 粗毒素和菌丝提取物中白色油状物的分离 | 第46-47
页 |
| · 组分Ⅴ的结构鉴定 | 第47-49
页 |
| · 组分Ⅴ的生物活性测定 | 第49
页 |
| 3 讨论 | 第49-52
页 |
| 第三章 坪草腐霉病菌毒素产生基因表达的差异 | 第52-71
页 |
| 1 材料与方法 | 第52-58
页 |
| · 材料 | 第52-53
页 |
| · 供试菌种 | 第52
页 |
| · 供试培养基 | 第52-53
页 |
| · 试剂和引物 | 第53
页 |
| · 主要仪器和设备 | 第53
页 |
| · 方法 | 第53-58
页 |
| · 供试菌种培养不同时间菌丝的取样 | 第53
页 |
| · 供试菌株总RNA的提取 | 第53-54
页 |
| · 除去RNA中的DNA | 第54
页 |
| · cDNA第一链的合成 | 第54
页 |
| · DDRT-PCR扩增 | 第54-55
页 |
| · 6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第55-56
页 |
| · 差异表达片段回收和二次PCR扩增 | 第56
页 |
| · 二次扩增产物的检测 | 第56
页 |
| · 感受态大肠杆菌细胞的制备 | 第56
页 |
| · PCR产物与质粒载体的连接 | 第56
页 |
| · 转化大肠杆菌 | 第56-57
页 |
| · 质粒DNA提取 | 第57
页 |
| · 插入片段酶切检测 | 第57
页 |
| · 基因片段测序与序列分析 | 第57-58
页 |
| 2 结果与分析 | 第58-70
页 |
| · RNA提取结果 | 第58
页 |
| · 引物的选择 | 第58-59
页 |
| · PCR扩增产物的分离 | 第59
页 |
| · PA1菌株和PAM1菌株培养不同时间基因表达的差异 | 第59-60
页 |
| · 二次扩增结果 | 第60-61
页 |
| · 阳性克隆的筛选结果 | 第61
页 |
| · 插入片段的酶切检测结果 | 第61-62
页 |
| · 测序结果与分析 | 第62-70
页 |
| 3 讨论 | 第70-71
页 |
| 结论 | 第71-72
页 |
| 参考文献 | 第72-79
页 |
| 附：图版1-12 | 第79-86
页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第86
页 |
| 个人简历 | 第86-87
页 |
| 致谢 | 第87-143页 |
