论文目录 | |
英文缩略语和常用单词 | 第1-7
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中文摘要 | 第7-8
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英文摘要 | 第8-9
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文献综述 | 第9-42
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1.人β防御素2(HBD-2)研究进展 | 第9-19
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2.转基因技术的研究现状 | 第19-35
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3.逆转录病毒在基因治疗中的应用 | 第35-42
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第一部分:pBabeNeo-HBD-2质粒的构建与哺乳动物细胞的转染 | 第42-57
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实验材料与步骤 | 第42-52
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1.实验材料 | 第42-43
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1.1实验设备 | 第42
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1.2实验试剂 | 第42-43
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2.试验步骤 | 第43-52
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· pBabeNeo载体的准备 | 第43-44
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· HBD-2的cDNA的制备 | 第44-46
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2.3连接反应制备pBabeNeo-HRn-2 | 第46
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2.4感受态大肠杆菌的制备和保存 | 第46-47
页 |
2.5感受态大肠杆菌的转化 | 第47-48
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· Mini-Prep筛选成功转化的细菌菌落 | 第48
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· Large-Prep扩增筛选到pBabeNeo-HBn-2质粒 | 第48-49
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· 两种质粒转染OE包装细肥 | 第49-50
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· 收集逆转录病毒感染目标细胞 | 第50-52
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实验结果 | 第52-54
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讨论 | 第54-57
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第二部分:转染细胞分子、细胞、蛋白质、生物学活性和免疫学功能的检测 | 第57-70
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实验材料和步骤 | 第57-65
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1.实验材料 | 第57-58
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1.1实验试剂 | 第57
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1.2实验器材 | 第57-58
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2.实验步骤 | 第58-65
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· ELISA法检测HDB-2和合成 | 第58
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· HBD-2的提纯与生物学活性检测 | 第58-60
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· Western Blot检测HBD一2的免疫学特性 | 第60-61
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2.4转染细胞的mRNA的Northern Blot检测 | 第61-65
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实验结果 | 第65-68
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1.转染细胞HBO-2分泌能力的检测 | 第65-66
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2.Geloverlay技术检测转基因合成的HBD一抗菌活性 | 第66
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3·WesternBlot试验的结果 | 第66-67
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4.Northern Blot检测细胞HBD一ZmRNA表达的实验结果 | 第67-68
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讨论 | 第68-70
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第三部分:转基因抗感染离体组织工程模型和在体SCID小鼠试验模型的建立 | 第70-81
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实验材料与试验步骤 | 第70-77
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1.实验材料和方法 | 第70-71
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1.1实验试剂 | 第70
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1.2实验器材 | 第70-71
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1.3实验动物 | 第71
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2.实验步骤 | 第71-77
页 |
2.1离体组织工程检测模型的建立 | 第71
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2.2离体模型抗菌性试验 | 第71-72
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· 转基因抗感染在体SCID小鼠动物模型的建立 | 第72-73
页 |
2.4.RT-PCR技术检铡肿瘤组织HBD-2的mRNA表这 | 第73-75
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2.5转化培养肿瘤组织细胞的HBD一2分泌能力检测 | 第75-77
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实验结果 | 第77-79
页 |
讨论 | 第79-81
页 |
结论 | 第81-82
页 |
致谢 | 第82-83
页 |
参考文献 | 第83-86
页 |
个人简历 | 第86-89
页 |
附图 | 第89-93
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