论文目录 | |
中文摘要 | 第1-11
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英文摘要 | 第11-14
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第一章 蝗虫病原菌分离鉴定及其杀虫蛋白的分离纯化 | 第14-39
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摘要 | 第14-16
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1 引言 | 第16-17
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2 材料与方法 | 第17-23
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· 实验材料 | 第17-18
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· 实验方法 | 第18-23
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3 结果与分析 | 第23-34
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· 菌种鉴定结果 | 第23-25
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· 杀虫活性物质的确定 | 第25-26
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· 杀虫蛋白的纯化 | 第26-28
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· 杀虫蛋白的初步性质 | 第28-30
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· 杀虫蛋白的酶活实验结果 | 第30-32
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· 杀虫蛋白N-末端氨基酸序列分析 | 第32-34
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· 杀虫蛋白的毒性实验 | 第34
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4 讨论 | 第34-36
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· 杀虫蛋白的纯化方法 | 第34-35
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· 杀虫蛋白N-末端氨基酸序列与金属蛋白酶的同源性研究 | 第35
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· 杀虫蛋白在生物防治领域中的应用潜力和存在的问题 | 第35-36
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5 小结 | 第36
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6 参考文献 | 第36-39
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第二章 粘质沙雷氏菌HR-3发酵条件优化、诱变及其杀虫蛋白的酶学性质研究 | 第39-68
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摘要 | 第39-41
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1 引言 | 第41-42
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2 材料与方法 | 第42-47
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· 实验材料 | 第42-43
页 |
· 实验方法 | 第43-47
页 |
3 结果与分析 | 第47-63
页 |
· 发酵上清液蛋白酶活力检测 | 第47-48
页 |
· 发酵工艺试验 | 第48-53
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· CO_2激光辐照选育 | 第53-56
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· 杀虫蛋白的酶学性质研究 | 第56-63
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4 讨论 | 第63-65
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· 金属蛋白酶酶活力测定与筛选模型的建立 | 第63
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· 诱变方法的选择 | 第63
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· 蛋白质(酶)酶学性质与化学修饰的必要性 | 第63-65
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5 小结 | 第65
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6 参考文献 | 第65-68
页 |
第三章 粘质沙雷氏菌杀虫蛋白基因的克隆和序列分析 | 第68-91
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摘要 | 第68-69
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1 引言 | 第69-70
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2 材料与方法 | 第70-75
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· 实验材料 | 第70-72
页 |
· 实验方法 | 第72-75
页 |
3 结果与分析 | 第75-85
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· 杀虫蛋白基因PCR引物的设计 | 第75-76
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· 杀虫蛋白成熟肽编码区的PCR扩增和克隆鉴定 | 第76-77
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· 杀虫蛋白成熟肽编码区的序列分析 | 第77-80
页 |
· 杀虫蛋白成熟肽编码区的同源性分析 | 第80-81
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· 杀虫蛋白成熟肽氨基酸序列同源性分析 | 第81-82
页 |
· 杀虫蛋白成熟肽的C-末端氨基酸序列的同源性分析 | 第82
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· 沙虫蛋白成熟肽的Zn配体和活性位点的同源性分析 | 第82-85
页 |
4 讨论 | 第85-87
页 |
· PCR法克隆杀虫蛋白成熟肽编码区的策略 | 第85
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· 杀虫蛋白成熟肽编码区的序列分析 | 第85-86
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· 杀虫蛋白成熟肽的分析 | 第86-87
页 |
5 小结 | 第87
页 |
6 参考文献 | 第87-91
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第四章 粘质沙雷氏菌杀虫蛋白酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第91-110
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摘要 | 第91-92
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1 引言 | 第92-93
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2 材料与方法 | 第93-97
页 |
· 实验材料 | 第93-96
页 |
· 实验方法 | 第96-97
页 |
3 结果与分析 | 第97-105
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· 杀虫蛋白成熟肽编码序列在E.coli中的融合表达 | 第97-101
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· 杀虫蛋白成熟肽编码序列在E.coli中的非融合表达 | 第101-105
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4 讨论 | 第105-106
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· 诱导杀虫蛋白表达的优化 | 第105
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· 杀虫蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第105-106
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· 包涵体的变性和折叠复性实验 | 第106
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5 小结 | 第106-107
页 |
6 参考文献 | 第107-110
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文献综述 微生物金属蛋白酶研究进展 | 第110-127
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引言 | 第110-111
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1 金属蛋白酶特点和分类 | 第111-112
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2 微生物金属蛋白酶的来源与分布 | 第112-113
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· 微生物金属蛋白酶的来源 | 第112
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· 微生物金属蛋白酶的分布 | 第112-113
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3 微生物来源金属蛋白酶的生化性质 | 第113-115
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· 耐热金属蛋白酶 | 第114
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· 嗜冷金属蛋白酶 | 第114-115
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· 碱性条件的金属蛋白酶 | 第115
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· 溶葡球菌酶 | 第115
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4 微生物金属蛋白酶的结构 | 第115-117
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5 金属蛋白酶的基因克隆 | 第117-119
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· 典型金属蛋白酶比较 | 第117
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· 溶葡球菌酶克隆 | 第117-118
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· 肉毒毒素的克隆 | 第118-119
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6 作为细胞毒蛋白的微生物金属蛋白酶 | 第119-120
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· 鳗弧菌金属蛋白酶 | 第119
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· 脆弱类杆菌金属蛋白酶 | 第119
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· 嗜水气单胞菌金属蛋白酶 | 第119-120
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7 微生物金属蛋白酶的应用 | 第120-122
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· 微生物金属蛋白酶在食品业的应用 | 第120
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· 微生物金属蛋白酶在日用化工领域的应用 | 第120-121
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· 微生物金属蛋白酶在医药领域的应用 | 第121-122
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8 微生物金属蛋白酶的发展前景 | 第122
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参考文献 | 第122-127
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附: | 第127-129
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致谢 | 第128-129
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论文发表及奖励 | 第129
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