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新型纳米脂质体p27~(kipl)基因传递系统的研究

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新型纳米脂质体p27~(kipl)基因传递系统的研究
论文目录
 
中文摘要第1-10 页
英文摘要第10-14 页
前言第14-21 页
第一部分 质粒DNA的扩增、提取和纯化第21-34 页
  1 仪器与试药第22-25 页
    · 商品试剂盒与主要试剂第22 页
    · 细菌培养基第22 页
    · 主要溶液的配制第22-24 页
    · 菌株和质粒第24 页
    · 实验仪器第24-25 页
  2 实验方法与结果第25-29 页
    · 质粒DNA的扩增第25-26 页
    · 质粒DNA的提取和纯化第26-27 页
    · 质粒DNA的产量第27-28 页
    · 质粒DNA的纯度分析第28-29 页
  3 小结和讨论第29-34 页
    · 基因治疗对质粒载体的要求第29-30 页
    · 大规模分离纯化质粒DNA的关键操作第30-31 页
    · 质粒DNA的分光光度法测定第31 页
    · 基因治疗用质粒DNA的质量评价指标第31-34 页
第二部分 载基因纳米脂质体制备工艺的研究第34-58 页
  1 仪器和试剂第35 页
    · 主要试剂第35 页
    · 实验仪器第35 页
  2 实验方法与结果第35-53 页
    · 质粒DNA含量测定方法的建立第35-38 页
    · 载基因纳米脂质体的制备第38-53 页
  3 小结和讨论第53-58 页
    · 脂质体基因传递系统第53 页
    · 荧光分光光度法测定DNA的含量第53-54 页
    · 载基因纳米脂质体的制备方法第54-58 页
第三部分 载基因纳米脂质体体外细胞学试验研究第58-85 页
  1 仪器与试剂第58-61 页
    · 试剂盒与主要试剂第58-59 页
    · 细胞株第59 页
    · 细胞培养基及主要溶液的配制第59-60 页
    · 实验仪器第60-61 页
  2 实验方法第61-67 页
    · 细胞复苏第61 页
    · 细胞传代第61 页
    · 细胞转染第61-62 页
    · X-gal染色观察pORF-LacZ的转染效果第62 页
    · pORF-LacZ的转染率测定第62-64 页
    · pEYFP-C1-P27转染效果的观察第64-65 页
    · pEYFP-C1-p27转染率的测定第65 页
    · 空白纳米脂质体的细胞毒性研究第65 页
    · p27-DNLs对肿瘤细胞的生长抑制试验第65-66 页
    · p27-DNLs对肿瘤细胞细胞周期的影响第66 页
    · p27-DNLs对肿瘤细胞凋亡的影响第66 页
    · 统计学分析第66-67 页
  3 实验结果第67-78 页
    · β-半乳糖苷酶在肿瘤细胞中的表达第67-70 页
    · EYFP在肿瘤细胞中的表达第70-72 页
    · 空白脂质体的细胞毒性评价第72-73 页
    · p27-DNLs对肿瘤细胞的生长抑制作用第73-74 页
    · p27-DNLs对肿瘤细胞细胞周期的影响第74 页
    · p27-DNLs对肿瘤细胞凋亡的影响第74-78 页
  4 小结和讨论第78-85 页
    · 报告基因第78-79 页
    · DNLs能够介导报告基因在肿瘤细胞中表达第79-81 页
    · BCA法测定蛋白的原理第81 页
    · 四唑盐(MTT)比色法第81-82 页
    · 空白脂质体对细胞无明显毒性第82 页
    · p27-DNLs可以明显抑制肿瘤细胞的生长第82-85 页
第四部分 载基因纳米脂质体冻干粉针剂的研究第85-98 页
  1 仪器和试剂第85-86 页
    · 主要仪器第85-86 页
    · 主要试剂第86 页
  2 方法与结果第86-95 页
    · DNLS冻干针剂的处方及制备工艺研究第87-90 页
    · DNLs冻干粉针剂质量评价第90-95 页
  3 小结与讨论第95-98 页
    · 冷冻干燥后的DNLs第95 页
    · 冷冻干燥技术第95-96 页
    · 冻干保护剂的作用第96 页
    · DNLs冻干粉针剂中DNA的生物活性第96-98 页
第五部分 p27-DNLs冻干粉针剂及p27-LPDs冻干粉针剂对肺转移肿瘤小鼠的治疗实验研究第98-127 页
  1 仪器与试药第99-101 页
    · 实验设备第99-100 页
    · 主要试剂第100 页
    · 实验动物第100-101 页
    · 细胞株第101 页
  2 实验方法与结果第101-109 页
    · pEYFP-C1-p27-DNLs冻干粉针剂在小鼠体内的表达分布研究第101 页
    · p27-LPDs冻干粉针剂的制备第101-102 页
    · 小鼠肺转移肿瘤模型的建立第102 页
    · 预试第102-103 页
    · 给药第103-106 页
    · 荷瘤小鼠的治疗效果观察第106 页
    · 抗结肠癌肺转移作用观察第106 页
    · 组织学及病理学观察第106-107 页
    · p27-DNLs冻干粉针剂及p27-LPDs冻干粉针剂体内抗肿瘤作用的初步机理探讨第107-108 页
    · 统计学分析第108-109 页
  3 实验结果第109-119 页
    · EYFP在小鼠体内的表达分布第109-111 页
    · p27-DNLs冻干粉针剂及p27-LPDs冻干粉针剂可以抑制结肠癌肺转移及肿瘤的生长第111-116 页
    · p27-DNLs冻干粉针剂及p27-LPDs冻干粉针剂可以延长荷瘤小鼠的生存周期第116-117 页
    · 免疫组化检测肺组织中p27~(kip1)的表达第117 页
    · p27-DNLs冻干粉针剂及p27-LPDs冻干粉针剂联合小剂量顺铂副作用的观察第117-119 页
  4 小结和讨论第119-127 页
    · DNLs可以介导外源基因经静脉注射在小鼠体内表达第119-120 页
    · 小鼠肺转移肿瘤模型的建立第120 页
    · p27~(kip1)体内基因治疗第120-121 页
    · p27-DNLs冻干粉针剂及p27-LPDs冻干粉针剂联合小剂量顺铂治疗小鼠肺转移肿瘤第121-123 页
    · 免疫组织化学检测目的蛋白在小鼠体内的表达第123-127 页
结论第127-129 页
综述第129-147 页
致谢第147-148 页
作者简介第148-150 页

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