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玉米C型细胞质雄性不育的分子生物学研究

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玉米C型细胞质雄性不育的分子生物学研究
论文目录
 
中文摘要第1-10 页
英文摘要第10-12 页
第一部分 文献综述第12-36 页
  1 雄性不育概述第12-13 页
    · 雄性不育的概念和意义第12 页
    · 雄性不育的分类第12-13 页
  · 细胞质雄性不育第13-15 页
  · 细胞质雄性不育的研究概况第15-20 页
    · 高等植物线粒体基因组的结构与功能第15-17 页
    · 植物细胞质雄性不育分子机理研究的一般策略第17 页
    · 细胞质雄性不育的分子生物学研究第17-20 页
  2 AFLP技术第20-22 页
    · AFLP技术的发展第20 页
    · AFLP技术的基本原理第20-21 页
    · AFLP技术优越性第21-22 页
    · AFLP技术在植物细胞质雄性不育上的应用第22 页
  3 蛋白质组学第22-34 页
    · 双向电泳技术第23-25 页
    · 质谱技术第25-27 页
    · 蛋白质组生物信息学第27 页
    · 蛋白质组学发展趋势第27-28 页
    · 亚细胞蛋白质组学研究进展第28-30 页
    · 亚细胞组分的分离第30-31 页
    · 线粒体蛋白质组学研究第31-33 页
    · 蛋白质组学在细胞质雄性不育研究方面的应用第33-34 页
  4 立题依据、研究目的及总体设计第34-36 页
    · 立题依据第34 页
    · 研究目的第34-35 页
    · 总体设计第35-36 页
第二部分 玉米C型细胞质雄性不育特异片段的分离与验证第36-59 页
  1 材料与方法第36-49 页
    · 试验材料第36 页
    · 主要生化试剂及酶类第36 页
    · 线粒体的分离和纯化第36-37 页
    · AFLP反应第37-40 页
      · DNA酶切第37-38 页
      · 预扩增PCR第38-39 页
      · 选择性扩增PCR第39-40 页
    · 聚丙烯酰胺凝胶成像第40-42 页
    · 差异片段回收和扩增第42 页
    · 差异片段的克隆第42-44 页
      · PCR产物与载体连接第43 页
      · 感受态细胞制备第43 页
      · 重组子热击转化入E.coli DH5α第43-44 页
      · PCR法鉴定第44 页
    · Southern杂交第44-46 页
      · 酶切第44-45 页
      · 电泳第45 页
      · 转膜第45-46 页
      · 严格洗脱第46 页
      · 曝光显影第46 页
    · Northern杂交第46-49 页
      · 总RNA提取第46-47 页
      · 总RNA的电泳和转膜第47-48 页
      · 探针标记第48-49 页
      · 预杂交和杂交第49 页
      · 严格洗脱和曝光显影第49 页
  2 结果与分析第49-55 页
    · 玉米线粒体的纯度检测第49-50 页
    · 玉米线粒体DNA的检测结果第50 页
    · 预扩增结果第50 页
    · 选择扩增结果第50-52 页
    · C48-2特异片段的分离及验证第52 页
    · Southern杂交结果第52-53 页
    · Northern杂交结果第53-54 页
    · C黄早四特异片段的鉴定第54-55 页
  3 讨论第55-59 页
    · AFLP技术第55 页
    · C48-2特异片段C48-223第55-56 页
    · C黄早四特异片段C黄早四-1第56-57 页
    · 特异片段C48-223和C黄早四-1第57 页
    · 不同核背景的不育系AFLP差异条带分析第57-59 页
第三部分 玉米同核异质不育系及其保持系线粒体差异蛋白组学第59-86 页
  1 材料与方法第59-64 页
    · 材料第59 页
    · 实验方法第59-64 页
      · 线粒体的提取第59 页
      · 线粒体蛋白的提取第59 页
      · 样品的浓度测定第59-60 页
      · 第一向等电聚焦第60-61 页
      · 第二向SDS-PAGE电泳第61-63 页
      · 电泳凝胶的考马斯亮蓝染色第63 页
      · 图像扫描与分析第63 页
      · 胶内酶切第63-64 页
      · 差异蛋白点的MALDI-TOF检测第64 页
      · 数据库查询第64 页
      · 数据库查询第64 页
  2 结果与分析第64-76 页
    · 蛋白质定量标准曲线第64-65 页
    · 双向电泳实验体系的优化第65-69 页
      · 分离胶浓度的选择第65-66 页
      · 不同裂解液提取的蛋白质样品的双向电泳比较第66 页
      · 聚焦时间对双向电泳的影响第66-67 页
      · 上样量的比较第67-68 页
      · 线性胶条和非线性胶条的比较第68-69 页
    · 双向电泳图谱差异比较结果第69-76 页
      · 苗期、单核期和双核期花药线粒体蛋白质双向电泳图谱结果第69-74 页
      · 差异蛋白质点的鉴定结果第74-76 页
  3 讨论第76-86 页
    · 基于双向电泳的蛋白质分离技术第76-78 页
    · Bradford法蛋白质定量的注意事项第78-79 页
    · 不育系及其保持系差异线粒体蛋白质的分析第79-86 页
      · 不同核背景的苗期线粒体蛋白质的差异分析第79-80 页
      · N48-2和C48-2花药线粒体蛋白质的差异点分析第80-83 页
      · 玉米C型细胞质雄性不育分子机制的初步探讨第83-86 页
参考文献第86-95 页
致谢第95-96 页
博士在读期间论文发表情况第96 页

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