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不同补料工艺对蓝灰色链霉菌代谢及尼莫克汀合成影响研究

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不同补料工艺对蓝灰色链霉菌代谢及尼莫克汀合成影响研究
论文目录
 
摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第1章 前言第12-22页
  1.1 生物农药概述第12页
  1.2 尼莫克汀概述第12-16页
    1.2.1 尼莫克汀理化性质第12-13页
    1.2.2 尼莫克汀的生物合成及其研究现状第13-16页
  1.3 高通量筛选全合成培养基第16-18页
    1.3.1 高通量技术概述第16-17页
    1.3.2 全合成培养基概述第17页
    1.3.3 高通量筛选全合成培养基第17-18页
  1.4 发酵过程优化第18-19页
    1.4.1 溶氧与剪切优化第18-19页
    1.4.2 基于在线参数的补料策略优化第19页
  1.5 代谢物组学研究第19-20页
  1.6 课题研究的背景、意义和内容第20-22页
    1.6.1 课题研究的背景和意义第20-21页
    1.6.2 研究内容第21-22页
第2章 材料与方法第22-30页
  2.1 实验材料第22-25页
    2.1.1 菌种第22页
    2.1.2 实验仪器第22-23页
    2.1.3 常用试剂第23-24页
    2.1.4 培养基配方第24-25页
  2.2 培养方法第25-26页
    2.2.1 斜面培养第25页
    2.2.2 一级种子培养第25页
    2.2.3 二级种子培养第25页
    2.2.4 孔板发酵培养第25页
    2.2.5 摇瓶发酵培养第25-26页
    2.2.6 5L发酵罐发酵培养第26页
  2.3 分析与测定方法第26-30页
    2.3.1 pH测定第26页
    2.3.2 菌体干重测定第26页
    2.3.3 葡萄糖试剂盒测定葡萄糖含量第26-27页
      2.3.3.1 葡萄糖标准曲线的制作第26-27页
      2.3.3.2 发酵液中葡糖糖浓度测定第27页
    2.3.4 铵离子浓度测定第27-28页
      2.3.4.1 实验主要测试试剂第27-28页
      2.3.4.2 铵离子标准曲线制作第28页
      2.3.4.3 发酵液中铵离子浓度测定第28页
    2.3.5 OUR和CER测定第28-29页
    2.3.6 尼莫克汀含量测定第29页
    2.3.7 菌体形态分析第29-30页
第3章 尼莫克汀发酵全合成培养基的建立与优化第30-43页
  3.1 引言第30页
  3.2 材料与方法第30-33页
    3.2.1 单因素优化发酵培养基第30-31页
      3.2.1.1 碳源作用第30页
      3.2.1.2 氮源作用第30页
      3.2.1.3 磷源作用第30-31页
    3.2.2 显著因子的确定第31-32页
    3.2.3 最佳培养基配方确定第32-33页
    3.2.4 5L发酵罐验证第33页
    3.2.5 高通量检测平台建立第33页
  3.3 结果与讨论第33-41页
    3.3.1 孔板装液量确定第33页
    3.3.2 高通量检测平台建立第33-35页
    3.3.3 葡萄糖浓度对尼莫克汀发酵的影响第35页
    3.3.4 麦芽糖浓度对尼莫克汀发酵的影响第35-36页
    3.3.5 氮源对尼莫克汀发酵的影响第36-37页
    3.3.6 磷酸氢二钾对尼莫克汀发酵影响第37-38页
    3.3.7 显著因素的确定第38页
    3.3.8 最佳培养基配方确定第38-40页
    3.3.9 5L发酵罐验证第40-41页
  3.4 本章小结第41-43页
第4章 基于在线参数调控的尼莫克汀发酵过程优化第43-57页
  4.1 引言第43页
  4.2 材料与方法第43-44页
    4.2.1 菌种和培养基第43-44页
      4.2.1.1 菌种第43页
      4.2.1.2 斜面培养基以及种子培养基第43页
      4.2.1.3 5L发酵培养基第43-44页
    4.2.2 培养方法第44页
      4.2.2.1 5L发酵罐发酵培养第44页
      4.2.2.2 葡萄糖和硫酸铵的补料策略第44页
    4.2.3 分析与测定方法第44页
  4.3 结果与讨论第44-56页
    4.3.1 摇瓶装液量和玻璃珠数量对蓝灰色链霉菌发酵生产尼莫克汀的影响第44-46页
    4.3.2 5L发酵罐中转速和供氧水平对尼莫克汀生物合成的影响第46-51页
    4.3.3 在不同补糖策略下尼莫克汀发酵情况第51-52页
    4.3.4 在不同补铵策略下尼莫克汀发酵情况第52-56页
  4.4 本章小结第56-57页
第5章 不同补铵策略对蓝灰色链霉菌发酵合成尼莫克汀影响机制的探索第57-79页
  5.1 引言第57页
  5.2 材料与方法第57-66页
    5.2.1 快速取样装置第57-58页
    5.2.2 提取方法第58-60页
    5.2.3 样品衍生第60页
    5.2.4 精确分析检测方法建立第60-66页
      5.2.4.1 GC-MS检测方法第60-64页
      5.2.4.2 LC-MS/MS检测方法第64-66页
    5.2.5 ~(13)C同位素标记品的制作第66页
    5.2.6 数据处理及分析第66页
  5.3 结果与讨论第66-78页
    5.3.1 各类代谢物的最适提取方法第66-67页
    5.3.2 5L发酵罐中在不同补铵策略下菌体生长以及尼莫克汀合成情况第67-68页
    5.3.3 与尼莫克汀生物合成相关的关键代谢物和代谢途径第68-70页
    5.3.4 中心碳代谢途径与尼莫克汀生物合成的关系第70-75页
    5.3.5 氨基酸代谢尼莫克汀生物合成的关系第75-76页
    5.3.6 辅酶A类物质与尼莫克汀生物合成的关系第76-78页
  5.4 本章小结第78-79页
第6章 全文结论与展望第79-80页
  6.1 全文总结第79页
  6.2 展望第79-80页
参考文献第80-89页
致谢第89-90页
攻读硕士期间撰写的论文及专利第90-91页
附录Ⅰ第91-92页

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