论文目录 | |
摘要 | 第3-5页 |
Summary | 第5-7页 |
缩略词英汉对照表 | 第7-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-23页 |
1 沙冬青研究概述 | 第12-13页 |
1.1 沙冬青及其种子化学成分研究 | 第12-13页 |
1.2 沙冬青的药理活性概况 | 第13页 |
2 黄酮类化合物研究进展 | 第13-20页 |
2.1 黄酮类化合物简介 | 第13页 |
2.2 黄酮类化合物理化性质 | 第13-14页 |
2.3 黄酮类化合物基本结构及其分类 | 第14页 |
2.4 黄酮类化合物的定性检测 | 第14-15页 |
2.5 黄酮类化合物定量检测分析 | 第15-16页 |
2.5.1 分光光度法 | 第15页 |
2.5.2 气相色谱法 | 第15-16页 |
2.5.3 平面薄层色谱法 | 第16页 |
2.5.4 高效液相色谱法 | 第16页 |
2.5.5 毛细管电泳法 | 第16页 |
2.5.6 其他测定方法 | 第16页 |
2.6 黄酮类化合物的分离纯化 | 第16-18页 |
2.6.1 硅胶柱层折法 | 第17页 |
2.6.2 梯度p H萃取法 | 第17页 |
2.6.3 聚酰胺柱层析法 | 第17页 |
2.6.4 葡聚糖凝胶柱法 | 第17-18页 |
2.6.5 大孔吸附树脂法 | 第18页 |
2.6.6 高效液相色谱(HPLC)分离法 | 第18页 |
2.7 黄酮类化合物的生物活性 | 第18-20页 |
2.7.1 抗氧化及清除自由基作用 | 第18-19页 |
2.7.2 免疫调节作用 | 第19页 |
2.7.3 心脑血管保护 | 第19-20页 |
2.7.4 抗菌抗病毒作用 | 第20页 |
3 本试验研究概况 | 第20-23页 |
3.1 研究目的与意义 | 第20-22页 |
3.2 研究内容 | 第22-23页 |
第二部分 试验研究 | 第23-67页 |
第一章 沙冬青种子总黄酮测定方法的建立 | 第23-31页 |
1 引言 | 第23页 |
2 材料和仪器 | 第23-24页 |
2.1 试验材料和试剂 | 第23页 |
2.2 试验仪器 | 第23-24页 |
3 试验方法 | 第24-25页 |
3.1 标准品溶液的制备 | 第24页 |
3.2 供试溶液的制备 | 第24页 |
3.2.1 沙冬青种子中总黄酮粗品制备 | 第24页 |
3.2.2 待测沙冬青总黄酮样品溶液制备 | 第24页 |
3.3 显色方法 | 第24-25页 |
3.4 最佳检测方法的建立 | 第25页 |
3.4.1 不同显色方法最大吸收波长测定 | 第25页 |
3.4.2 标准曲线的建立 | 第25页 |
3.4.3 不同显色方法精密度测定 | 第25页 |
3.4.4 各显色方法重复性测定 | 第25页 |
3.4.5 各显色方法加样回收率测定 | 第25页 |
3.5 沙冬青总黄酮纯度测定 | 第25页 |
4 结果与分析 | 第25-29页 |
4.1 不同显色方法下波长扫描结果 | 第25-26页 |
4.2 槲皮素在不同检测条件下的标准曲线 | 第26-27页 |
4.3 沙冬青种子总黄酮在不同检测条件下的方法学验证结果 | 第27-28页 |
4.4 标准曲线的绘制 | 第28-29页 |
4.5 沙冬青种子总黄酮粗提物含量测定结果 | 第29页 |
5 讨论 | 第29-30页 |
6 本章小结 | 第30-31页 |
第二章 沙冬青种子总黄酮的纯化工艺研究 | 第31-44页 |
1 引言 | 第31页 |
2 材料与仪器 | 第31页 |
2.1 试验材料 | 第31页 |
2.2 试验仪器 | 第31页 |
3 检测方法与样品配置 | 第31-32页 |
3.1 紫外分光光度法 | 第31页 |
3.2 样品溶液的制备 | 第31-32页 |
4 试验方法 | 第32-35页 |
4.1 大孔树脂预处理与装柱 | 第32页 |
4.1.1 大孔树脂试验前处理 | 第32页 |
4.1.2 大孔树脂装柱 | 第32页 |
4.2 大孔吸附树脂筛选 | 第32-33页 |
4.3 AB-8 大孔树脂吸附性能的试验 | 第33-34页 |
4.3.1 大孔吸附树脂对沙冬青种子总黄酮静态吸附动力学试验 | 第33页 |
4.3.2 样品液浓度对其吸附性能的影响 | 第33页 |
4.3.3 上样液p H值对其吸附的影响 | 第33-34页 |
4.3.4 上样液流速对其吸附效果的影响 | 第34页 |
4.3.5 AB-8 型大孔树脂动态吸附条件正交试验 | 第34页 |
4.3.6 动态吸附透过试验 | 第34页 |
4.4 AB-8 大孔树脂动态解析性能的试验 | 第34-35页 |
4.4.1 洗脱液浓度对洗脱效果的影响 | 第34页 |
4.4.2 洗脱液流速对洗脱效果的影响 | 第34-35页 |
4.4.3 洗脱液用量对洗脱效果的影响 | 第35页 |
4.5 乙酸乙酯对沙冬青种子中总黄酮萃取 | 第35页 |
5 结果与分析 | 第35-43页 |
5.1 不同型号大孔树脂对沙冬青种子总黄酮吸附率及解析率 | 第35-36页 |
5.2 AB-8 大孔树脂最佳吸附条件 | 第36-40页 |
5.2.1 AB-8 大孔树脂静态吸附平衡 | 第36-37页 |
5.2.2 最佳上样液浓度 | 第37-38页 |
5.2.3 最佳上样液p H | 第38页 |
5.2.4 最佳上样液流速 | 第38-39页 |
5.2.5 AB-8 大孔树脂动态吸附条件正交试验结果 | 第39-40页 |
5.2.6 AB-8 大孔树脂最大吸附上样液体积 | 第40页 |
5.3 AB-8 型大孔树脂最佳洗脱条件 | 第40-43页 |
5.3.1 最佳洗脱液浓度 | 第40-41页 |
5.3.2 最佳洗脱流速 | 第41-42页 |
5.3.3 最佳洗脱液用量 | 第42页 |
5.3.4 纯化前后沙冬青种子总黄酮紫外扫描图谱 | 第42-43页 |
6 讨论 | 第43页 |
7 本章小结 | 第43-44页 |
第三章 沙冬青种子总黄酮免疫活性研究 | 第44-67页 |
1 引言 | 第44页 |
2 材料和仪器 | 第44-45页 |
2.1 试验材料 | 第44页 |
2.2 试验仪器 | 第44-45页 |
3 试验方法 | 第45-49页 |
3.1 沙冬青总黄酮对小鼠体内免疫活性调节试验 | 第45-47页 |
3.1.1 试验药物配置 | 第45页 |
3.1.2 试验小鼠造模及给药 | 第45页 |
3.1.3 免疫脏器指数的测定 | 第45-46页 |
3.1.4 细胞因子IL-2、IL-4 的测定 | 第46页 |
3.1.5 碳粒廓清率的测定 | 第46-47页 |
3.1.6 小鼠器官组织形态学结构观察 | 第47页 |
3.2 沙冬青总黄酮对小鼠脾淋巴细胞体外增殖试验 | 第47-49页 |
3.2.1 试验药物及试剂配置 | 第47-48页 |
3.2.2 脾淋巴细胞悬液的制备 | 第48页 |
3.2.3 不同浓度沙冬青种子总黄酮对脾淋巴细胞增殖试验 | 第48页 |
3.2.4 脾淋巴细胞培养及测定 | 第48-49页 |
4 结果与分析 | 第49-63页 |
4.1 小鼠免疫抑制(CTX)模型的成功复制 | 第49-51页 |
4.2 沙冬青种子总黄酮对免疫抑制小鼠体内免疫系统的激活 | 第51-62页 |
4.2.1 小鼠免疫器官指数测定结果 | 第51-53页 |
4.2.2 IL-2、IL-4 细胞因子测定结果 | 第53-54页 |
4.2.3 碳粒廓清率的测定 | 第54-55页 |
4.2.4 沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫器官结构的影响 | 第55-58页 |
4.2.5 沙冬青种子总黄酮对小鼠器官组织的毒性 | 第58-62页 |
4.3 沙冬青总黄酮体外对小鼠脾淋巴细胞的增殖 | 第62-63页 |
5 讨论 | 第63-65页 |
6 本章小结 | 第65-67页 |
结论 | 第67-69页 |
附录 1:ELSA诊断试剂盒操作过程 | 第69-70页 |
附录 2 :石蜡制作及HE染色方法 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
作者简介 | 第79-80页 |
导师简介 | 第80-82页 |