论文目录 | |
摘要 | 第4-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
缩略词表 | 第12-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-28页 |
1. 益生菌对肠粘膜先天防御系统调节的研究进展 | 第16-24页 |
1.1 益生菌的定义以及在动物生产中常用的益生菌种类 | 第16-17页 |
1.2 哺乳动物肠黏膜先天防御系统及其对微生物的先天免疫反应 | 第17-21页 |
1.2.1 肠粘膜先天防御系统及其发育的影响因素 | 第17-19页 |
1.2.2 肠黏膜先天防御系统对微生物的先天免疫反应 | 第19-21页 |
1.3 益生菌对肠黏膜上皮层屏障功能和细胞因子产生的影响 | 第21-24页 |
1.3.1 增强上皮层屏障功能 | 第21-22页 |
1.3.2 调节细胞因子产生 | 第22-24页 |
2. 屎肠球菌对仔猪肠道健康影响的研究进展 | 第24-27页 |
2.1 益生屎肠球菌概述 | 第24-25页 |
2.2 屎肠球菌调节仔猪的肠道菌群 | 第25页 |
2.3 屎肠球菌调节仔猪的免疫功能和抗病力 | 第25-26页 |
2.4 屎肠球菌影响仔猪的养分吸收机制 | 第26-27页 |
3. 本研究目的和意义 | 第27-28页 |
第二章 试验研究 | 第28-58页 |
1. 材料与方法 | 第28-42页 |
1.1 实验材料 | 第28页 |
1.2 实验动物与细胞 | 第28页 |
1.3 主要仪器和设备 | 第28页 |
1.4 主要实验试剂 | 第28-30页 |
1.5 动物试验方案 | 第30-32页 |
1.5.1 饲养管理 | 第32页 |
1.5.2 样品采集 | 第32页 |
1.6 细胞试验方案 | 第32-33页 |
1.6.1 屎肠球菌活菌对IPEC-J2细胞影响的试验 | 第32-33页 |
1.6.2 屎肠球菌死菌对IPEC-J2细胞影响的试验 | 第33页 |
1.6.3 屎肠球菌细胞壁对IPEC-J2细胞影响的试验 | 第33页 |
1.7 屎肠球菌培养制备相关方法 | 第33-34页 |
1.7.1 屎肠球菌的培养与制备 | 第33-34页 |
1.7.2 屎肠球菌热灭活方法 | 第34页 |
1.7.3 屎肠球菌细胞壁提取方法 | 第34页 |
1.8 细胞试验相关测定方法 | 第34-35页 |
1.8.1 细胞培养 | 第34页 |
1.8.2 活细胞计数 | 第34页 |
1.8.3 细胞活性检测 | 第34-35页 |
1.8.4 细胞膜完整性 | 第35页 |
1.9 黏膜及细胞基因mRNA表达 | 第35-39页 |
1.9.1 样品总RNA提取 | 第35-36页 |
1.9.2 反转录合成cDNA | 第36-37页 |
1.9.3 引物设计 | 第37-38页 |
1.9.4 实时荧光定量PCR | 第38-39页 |
1.10 肠道屏障及相关通路蛋白表达测定 | 第39-41页 |
1.10.1 肠道粘膜与细胞总蛋白的提取 | 第39页 |
1.10.2 总蛋白浓度的测定 | 第39-40页 |
1.10.3 蛋白变性 | 第40页 |
1.10.4 Western Blot试验 | 第40-41页 |
1.11 细胞因子的测定 | 第41页 |
1.12 数据处理与统计分析 | 第41-42页 |
2. 结果与分析 | 第42-53页 |
2.1 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对仔猪体增重及腹泻发生率的影响 | 第42页 |
2.2 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对仔猪脏器指数的影响 | 第42-43页 |
2.3 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对紧密连接蛋白的影响 | 第43-48页 |
2.4 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对细胞因子表达和分泌的影响 | 第48-52页 |
2.4.1 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对仔猪肠黏膜细胞因子表达和分泌的影响 | 第48-50页 |
2.4.2 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对IPEC-J2细胞的细胞因子表达和分泌的影响 | 第50-52页 |
2.5 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对TLRs基因表达的影响 | 第52-53页 |
2.5.1 益生屎肠球菌活菌和灭活菌对仔猪肠黏膜TLRs基因表达的影响 | 第52页 |
2.5.2 益生屎肠球菌活菌和热灭活菌对IPEC-J2细胞和IPEC-1细胞TLRs基因表达的影响 | 第52-53页 |
3. 讨论 | 第53-57页 |
3.1 益生屎肠球菌对仔猪肠黏膜上皮屏障功能的影响 | 第53-55页 |
3.2 益生屎肠球菌对仔猪肠黏膜细胞因子表达和分泌的影响 | 第55-56页 |
3.3 益生屎肠球菌对仔猪肠黏膜TLRs基因表达的影响 | 第56-57页 |
4. 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第67页 |