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烟碱降解菌原生质体融合及降解机理研究

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烟碱降解菌原生质体融合及降解机理研究
论文目录
 
摘要第4-5页
Abstract第5-8页
第一章 绪论第8-20页
1 烟碱第8-11页
  1.1 烟碱的物理化学性质第8-9页
  1.2 烟碱的功效和危害第9-11页
    1.2.1 烟碱的功效第9-10页
    1.2.2 烟碱的危害第10-11页
2 应用生物技术降解烟碱的必要性第11-13页
3 国内外微生物降解烟碱的研究动态第13-15页
  3.1 降解烟碱的微生物种类第13-14页
  3.2 微生物降解烟碱的三大代谢途径第14-15页
  3.3 微生物降解烟碱的关键酶第15页
4 原生质体融合技术的简介第15-16页
  5. 双向电泳的简介第16-18页
  5.1 双向电泳的原理第16-18页
  5.2 2-DE技术在细菌蛋白质组学中的应用第18页
6 本课题研究意义第18-19页
7 本文研究的主要内容第19-20页
第二章 原生质体融合选育高效降解烟碱菌株第20-32页
1 材料与方法第21-24页
  1.1 材料第21-22页
    1.1.1 降烟碱细菌第21页
    1.1.2 试剂及培养基第21-22页
    1.1.3 主要仪器设备第22页
  1.2 方法第22-24页
    1.2.1 烟碱含量的测定第22页
    1.2.2 制备解淀粉芽孢杆菌T11原生质体第22-23页
    1.2.3 制备边缘假单胞菌的原生质体第23页
    1.2.4 热力灭活单亲边缘假单胞菌的原生质体第23页
    1.2.5 PEG-6000诱导原生质体融合及融合子的再生、筛选第23-24页
    1.2.6 融合子降烟碱能力的遗传稳定性第24页
    1.2.7 融合子与亲株间降烟碱能力的比较第24页
  1.3 数据处理第24页
2 结果与分析第24-30页
  2.1 烟碱标准曲线第24-25页
  2.2 解淀粉芽孢杆菌T11与边缘假单胞菌的生长曲线第25-26页
  2.3 解淀粉芽孢杆菌T11和边缘假单胞菌原生质体图第26-27页
  2.4 酶解破壁时间对原生质体形成率和再生率的影响第27页
  2.5 边缘假单胞菌原生质体热灭活对灭活率的影响第27-28页
  2.6 PEG-6000促融时间对融合率的影响第28页
  2.7 融合子遗传稳定性的检测第28-29页
  2.8 融合子A2与亲株降烟碱能力的对比第29-30页
3 结论与讨论第30-32页
第三章 降烟碱酶学性质和菌株胞内蛋白质组学的研究第32-49页
1 材料与方法第32-40页
  1.1 材料与设备第32-35页
    1.1.1 菌株第32页
    1.1.2 主要药品和试剂第32-34页
    1.1.3 主要仪器设备第34-35页
  1.2 方法第35-40页
    1.2.1 分离纯化融合子烟碱降解酶的方法第35-37页
    1.2.2 烟碱降解酶的基本性质第37-38页
    1.2.3 菌株胞内蛋白的提取及双向电泳第38-40页
    1.2.4 烟碱代谢物的检测第40页
2 结果与分析第40-48页
  2.1 烟碱降解酶含量测定的标准曲线第40-41页
  2.2 烟碱降解酶液的(NH_4)_2SO_4分级沉淀第41-42页
  2.3 烟碱降解酶液的葡聚糖凝胶层析第42-43页
  2.4 烟碱降解酶的纯度和分子量第43页
  2.5 烟碱降解酶的酶学性质研究第43-45页
  2.6 融合子菌株胞内蛋白分离的重复性第45-46页
  2.7 烟碱诱导下融合子菌株胞内蛋白图谱分析第46-48页
3 结论第48-49页
第四章 大田降烟碱实验第49-62页
1 材料与方法第49-51页
  1.1 菌株第49页
  1.2 菌株的田间降烟碱试验安排第49-50页
  1.3 取样第50页
  1.4 样品烟碱含量的测定第50-51页
2 结果与分析第51-60页
  2.1 烟碱含量的变化第51-55页
    2.1.1 菌液处理烟叶1次烟碱含量变化情况第51-52页
    2.1.2 菌液间隔处理烟叶2次烟碱含量变化情况第52-53页
    2.1.3 菌液间隔处理烟叶3次烟碱含量变化情况第53-54页
    2.1.4 菌液连续处理烟叶4次烟碱含量变化情况第54-55页
    2.1.5 菌液根灌处理烟株后烟碱含量变化情况第55页
  2.2 GFP示踪试验第55-58页
  2.3 烟叶品质分析第58-60页
3 结论与讨论第60-62页
第五章 结论与展望第62-63页
1 全文主要结论第62页
2 本研究的主要创新点第62页
3 本研究的不足之处第62-63页
参考文献第63-70页
致谢第70-71页
作者简历第71页

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