CGS1、DHDPS基因克隆及其作为转基因植物筛选标记的研究 |
论文目录 | | | 中文摘要 | 第1-10
页 | | 英文摘要 | 第10-12
页 | | 1 引言 | 第12-24
页 | | · 本研究的目的和意义 | 第12-13
页 | | · 文献综述 | 第13-22
页 | | · 传统筛选标记 | 第13
页 | | · 筛选标记基因的消除 | 第13-15
页 | | · 植物无筛选标记转基因技术 | 第15
页 | | · 生物安全筛选标记基因 | 第15-21
页 | | · 甲硫氨酸和赖氨酸代谢途径 | 第21-22
页 | | · 本论文的主要研究内容 | 第22-24
页 | | 2 材料与方法 | 第24-41
页 | | · CGS1,DHDPS基因克隆及体外分子改造 | 第24-30
页 | | · 试验材料 | 第24-25
页 | | · 试验方法 | 第25-30
页 | | · DHDPS和突变基因的原核表达 | 第30-32
页 | | · 试验材料 | 第30-31
页 | | · 试验方法 | 第31-32
页 | | · 植物表达载体的构建 | 第32-33
页 | | · 试验材料 | 第32-33
页 | | · 试验方法 | 第33
页 | | · 卡那霉素及其氨基酸类似物筛选压力的确定 | 第33-34
页 | | · 试验材料 | 第33-34
页 | | · 试验方法 | 第34
页 | | · 农杆菌介导的遗传转化及抗性植株再生 | 第34-36
页 | | · 试验材料 | 第34-35
页 | | · 试验方法 | 第35-36
页 | | · 烟草抗性植株的分子生物学检测 | 第36-41
页 | | · PCR检测 | 第36-38
页 | | · 外源基因转录水平的Real-time PCR检测 | 第38-40
页 | | · 氨基酸含量检测 | 第40-41
页 | | 3 结果与分析 | 第41-70
页 | | · CGS1,DHDPS基因克隆及体外分子改造 | 第41-46
页 | | · 拟南芥和烟草总RNA的提取 | 第41
页 | | · RT-PCR方法克隆得到CGS1和DHDPS基因片段 | 第41-43
页 | | · CGS1基因的定点突变 | 第43-44
页 | | · DHDPS基因的定点突变 | 第44-46
页 | | · DHDPS和DM的原核表达 | 第46-48
页 | | · DHDPS和突变基因原核表达载体的构建 | 第46-47
页 | | · 序列比对与ORF分析 | 第47-48
页 | | · 目的蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第48
页 | | · 植物表达载体构建 | 第48-54
页 | | · 植物表达载体pBIC的构建 | 第48-50
页 | | · 植物表达载体pBICMⅠ的构建 | 第50-51
页 | | · 植物表达载体pBICMⅡ的构建 | 第51-52
页 | | · 植物表达载体pBID的构建 | 第52-53
页 | | · 植物表达载体pBIDM的构建 | 第53-54
页 | | · 重组质粒导入根癌农杆菌 | 第54-56
页 | | · 卡那霉素及其氨基酸类似物筛选压力的确定 | 第56-61
页 | | · 那霉素筛选压力的确定 | 第56-57
页 | | · 乙硫氨酸筛选压力的确定 | 第57-59
页 | | · S-2-氨基乙基-L-半胱氨酸筛选压力的确定 | 第59-61
页 | | · 农杆菌介导的遗传转化及抗性植株再生 | 第61-63
页 | | · 烟草的遗传转化 | 第61
页 | | · 抗性植株筛选 | 第61-63
页 | | · 抗性芽再生 | 第63
页 | | · 抗性植株的二次筛选 | 第63-64
页 | | · 抗性植株的分子生物学检测 | 第64-70
页 | | · 抗性植株的PCR检测 | 第64-66
页 | | · 外源基因转录水平的Real-Time PCR检测 | 第66-69
页 | | · 氨基酸含量检测 | 第69-70
页 | | 4 讨论 | 第70-72
页 | | · 氨基酸代谢关键酶基因的选择 | 第70
页 | | · 体外分子改造 | 第70
页 | | · 二次交叉筛选 | 第70
页 | | · 分子生物学检测 | 第70
页 | | · 下一步工作展望 | 第70-72
页 | | 5 结论 | 第72-73
页 | | · 野生型基因的克隆及体外分子改造 | 第72
页 | | · 植物表达载体构建 | 第72
页 | | · 农杆菌介导的遗传转化 | 第72
页 | | · 新型筛选标记的分析 | 第72-73
页 | | 致谢 | 第73-74
页 | | 参考文献 | 第74-80
页 | | 附录 | 第80-84
页 | | 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第84页 |
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