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大黄鱼谷胱甘肽过氧化物酶GPx1和GPx4的鉴定及其体外表达研究

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大黄鱼谷胱甘肽过氧化物酶GPx1和GPx4的鉴定及其体外表达研究
论文目录
 
摘要第1-10页
ABSTRACT第10-16页
第一章 前言第16-23页
  1.1 活性氧第16-19页
    1.1.1 活性氧的简介第16-17页
    1.1.2 活性氧的作用第17-18页
    1.1.3 抗氧化防御机制第18-19页
  1.2 谷胱甘肽过氧化物酶第19-22页
    1.2.1 谷胱甘肽过氧化物酶的概述第19-20页
    1.2.2 谷胱甘肽过氧化物酶的分类及功能第20-21页
    1.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶在鱼类中的研究现状第21-22页
  1.3 研究目的及意义第22-23页
第二章 大黄鱼LcGPx1a和LcGPx1b的基因克隆和功能分析第23-47页
  2.1 材料与方法第23-35页
    2.1.1 仪器与试剂第23-25页
    2.1.2 菌株及其培养第25页
    2.1.3 实验材料第25页
    2.1.4 总RNA提取第25-27页
    2.1.5 cDNA合成第27页
    2.1.6 LcGPx1a和LcGPx1b的cDNA核心序列克隆第27-28页
    2.1.7 PCR产物胶回收第28页
    2.1.8 TA克隆和测序第28-30页
    2.1.9 LcGPx1a和LcGPx1b的cDNA全长序列克隆第30-33页
    2.1.10 序列分析第33-34页
    2.1.11 LcGPx1a和LcGPx1b的组织特异性分布表达第34-35页
    2.1.12 大黄鱼感染副溶血弧菌后LcGPx1a和LcGPx1b的时空表达第35页
    2.1.13 数据分析第35页
  2.2 结果与讨论第35-46页
    2.2.1 结果第35-43页
    2.2.2 讨论第43-46页
  2.3 本章小结第46-47页
第三章 大黄鱼LcGPx4a和LcGPx4b的基因克隆和功能分析第47-63页
  3.1 材料与方法第47-52页
    3.1.1 仪器与试剂第47页
    3.1.2 菌株及其培养第47页
    3.1.3 实验材料第47页
    3.1.4 总RNA提取第47-48页
    3.1.5 cDNA合成第48页
    3.1.6 LcGPx4a和LcGPx4b的cDNA核心序列克隆第48-49页
    3.1.7 LcGPx4a和LcGPx4b的cDNA全长序列克隆第49页
    3.1.8 大黄鱼DNA的提取第49-50页
    3.1.9 LcGPx4a和LcGPx4b基因序列的克隆和分析第50页
    3.1.10 序列分析第50-51页
    3.1.11 LcGPx4a和LcGPx4b的组织特异性分布表达第51页
    3.1.12 大黄鱼感染副溶血弧菌后LcGPx1a和LcGPx1b的时空表达第51页
    3.1.13 数据分析第51-52页
  3.2 结果与讨论第52-61页
    3.2.1 结果第52-59页
    3.2.2 讨论第59-61页
  3.3 本章小结第61-63页
第四章 大黄鱼半胱氨酸突变型tla和tlb的原核表达和纯化第63-76页
  4.1 材料与方法第63-71页
    4.1.1 仪器与试剂第63-65页
    4.1.2 克隆载体pMD20-T-LcGPx1a、LcGPx1b的构建第65-66页
    4.1.3 质粒提取第66-67页
    4.1.4 Cys突变型表达载体pET-t1a、pET-t1b的构建第67-68页
    4.1.5 原核诱导表达第68-69页
    4.1.6 可溶性蛋白表达第69页
    4.1.7 可溶性蛋白纯化第69-70页
    4.1.8 透析及酶活测定第70-71页
  4.2 结果与讨论第71-75页
      4.2.1. Cys突变型表达载体pET-t1a、pET-t1b的构建第71页
      4.2.2. 全菌蛋白表达第71-72页
      4.2.3. 可溶性蛋白表达第72-74页
      4.2.4. 酶活性测定第74-75页
      4.2.5. 讨论第75页
  4.3 本章小结第75-76页
参考文献第76-89页
致谢第89-90页
在读期间发表的学术论文及研究成果第90页

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