基于BVDV E2基因间接ELISA方法的建立及初步应用

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基于BVDV E2基因间接ELISA方法的建立及初步应用

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基于BVDV E2基因间接ELISA方法的建立及初步应用

论文目录
摘要	第1-8页
Abstract	第8-11页
1 文献综述	第11-19页
1.1 BVDV简介	第11页
1.2 BVDV生物学特性	第11-15页
1.2.1 BVDV病原学	第11-12页
1.2.2 BVDV的分型	第12页
1.2.3 E2蛋白结构功能	第12-13页
1.2.4 BVD类型及临床诊断	第13-15页
1.3 BVDV酶联免疫吸附试验的研究进展	第15-16页
1.3.1 酶联免疫吸附试验(ELISA)	第15-16页
1.4 流行病学	第16-17页
1.5 BVDV防控和根除	第17页
1.6 原核表达系统的研究进展	第17-18页
1.7 研究目的和意义	第18-19页
2 BVDVE2蛋白的原核表达和纯化	第19-33页
2.1 材料	第19-20页
2.1.1 病毒	第19页
2.1.2 质粒和菌种	第19页
2.1.3 试剂	第19-20页
2.1.4 仪器	第20页
2.2 实验方法	第20-27页
2.2.1 引物设计及合成	第20-21页
2.2.2 细胞RNA的提取	第21页
2.2.3 cDNA合成的操作方法	第21页
2.2.4 E2基因扩增	第21页
2.2.5 BVDVE2扩增基因凝胶回收	第21-22页
2.2.6 目的基因与pMD18-T载体连接	第22页
2.2.7 pMD18-T-E2转化E.coliDH5α感受态细胞	第22-23页
2.2.8 pMD18-T-E2重组质粒的酶切鉴定	第23页
2.2.9 基因的序列测定与分析	第23页
2.2.10 BVDVE2基因原核表达载体构建	第23-24页
2.2.11 重组质粒pET28a-E2的表达与纯化	第24-27页
2.3 实验结果	第27-30页
2.3.1 BVDVE2基因PCR结果	第27页
2.3.2 重组质粒pMD18-T-E2的鉴定与测序结果	第27-28页
2.3.3 pET28a-E2重组质粒的鉴定	第28页
2.3.4 重组蛋白的诱导表达及鉴定	第28-29页
2.3.5 目的蛋白的纯化	第29-30页
2.3.6 目的蛋白的Westernblot分析	第30页
2.4 讨论	第30-31页
2.5 小结	第31-33页
3 BVDVE2基因间接ELISA检测方法的建立	第33-43页
3.1 材料	第33页
3.1.1 主要试剂	第33页
3.2 方法	第33-36页
3.2.1 酶标板均一性的确定	第33页
3.2.2 ELISA初步操作步骤的确定	第33-34页
3.2.3 间接ELISA试验条件的优化	第34-36页
3.3 结果	第36-41页
3.3.1 最佳反应条件的选择	第36-40页
3.3.2 重复性试验	第40-41页
3.3.3 与商品化试剂盒的比较试验	第41页
3.4 讨论	第41-42页
3.5 小结	第42-43页
4 结论	第43-45页
参考文献	第45-53页
致谢	第53-55页
个人简历	第55页

本篇论文共55页，点击这进入下载页面。

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