论文目录 | |
| 中文摘要 | 第11-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 第一节 研究背景 | 第14-23页 |
| 1 鱼类对饲料糖的利用能力 | 第14-15页 |
| 2 鱼类体内糖代谢的调节 | 第15-20页 |
| 2.1 胰岛素的调节 | 第15页 |
| 2.2 糖代谢酶的调节 | 第15-20页 |
| 3 乌克兰鳞鲤研究进展 | 第20-21页 |
| 4 RACE技术简介 | 第21-22页 |
| 4.1 3’RACE技术原理 | 第21页 |
| 4.2 5’RACE技术原理 | 第21-22页 |
| 4.3 RACE技术在水产动物研究中的应用 | 第22页 |
| 5 降落PCR技术简介 | 第22-23页 |
| 第二节 研究的目的与意义 | 第23页 |
| 第三节 主要试验内容 | 第23-24页 |
| 第二章 乌克兰鳞鲤PK基因的克隆及序列分析 | 第24-44页 |
| 第一节 材料和方法 | 第24-36页 |
| 1 试验鱼的暂养 | 第24页 |
| 2 克隆载体与宿主细菌 | 第24页 |
| 3 主要试剂和试剂盒 | 第24-25页 |
| 4 主要试验仪器 | 第25页 |
| 5 引物设计 | 第25-26页 |
| 6 乌克兰鳞鲤肝胰脏总 RNA 的制备 | 第26-27页 |
| 7 第一链cDNA的合成 | 第27页 |
| 8 PCR扩增PK基因中间片段 | 第27-28页 |
| 9 3’RACE PCR | 第28-29页 |
| 10 5’RACE PCR | 第29-31页 |
| 11 琼脂糖电泳检测PCR扩增结果 | 第31页 |
| 12 回收纯化PCR产物 | 第31-32页 |
| 13 感受态细胞的制备 | 第32页 |
| 14 T-A克隆 | 第32页 |
| 15 感受态细胞的转化 | 第32-33页 |
| 16 菌液PCR方法筛选阳性克隆 | 第33-35页 |
| 17 序列分析 | 第35-36页 |
| 第二节 结果与分析 | 第36-42页 |
| 1 乌克兰鳞鲤肝胰脏总 RNA 的制备 | 第36页 |
| 2 乌克兰鳞鲤 PK 基因的克隆与测序结果 | 第36-42页 |
| 第三节 讨论 | 第42-44页 |
| 1 PCR方法的选择 | 第42页 |
| 2 乌克兰鳞鲤 PK 基因序列的分析 | 第42-44页 |
| 第三章 乌克兰鳞鲤PEPCK基因的克隆及序列分析 | 第44-59页 |
| 第一节 材料和方法 | 第44-52页 |
| 1 试验鱼的暂养 | 第44页 |
| 2 克隆载体与宿主细菌 | 第44页 |
| 3 主要试剂和试剂盒 | 第44页 |
| 4 主要试验仪器 | 第44-45页 |
| 5 引物设计 | 第45页 |
| 6 制备乌克兰鳞鲤肝胰脏总 RNA | 第45页 |
| 7 合成第一链 cDNA | 第45页 |
| 8 PCR扩增PEPCK基因中间片段 | 第45-46页 |
| 9 3’RACE PCR | 第46-47页 |
| 10 5’RACE PCR | 第47-48页 |
| 11 琼脂糖电泳检测PCR扩增结果 | 第48页 |
| 12 回收纯化PCR产物、T-A克隆、转化感受态细胞 | 第48页 |
| 13 菌液PCR方法筛选阳性克隆 | 第48-50页 |
| 14 序列分析 | 第50-52页 |
| 第二节 结果与分析 | 第52-57页 |
| 1 乌克兰鳞鲤肝胰脏总 RNA 的制备 | 第52页 |
| 2 乌克兰鳞鲤 PEPCK 基因的克隆与测序结果 | 第52-57页 |
| 第三节 讨论 | 第57-59页 |
| 1 PCR方法的选择 | 第57页 |
| 2 乌克兰鳞鲤 PEPCK 基因序列的分析 | 第57-59页 |
| 第四章 不同营养水平下乌克兰鳞鲤各组织PK、PEPCK基因的差异性表达的分析 | 第59-65页 |
| 第一节 材料和方法 | 第59-63页 |
| 1 试验鱼的暂养 | 第59页 |
| 2 主要试剂和试剂盒 | 第59页 |
| 3 主要试验仪器 | 第59页 |
| 4 引物设计 | 第59-60页 |
| 5 饲养和取样 | 第60页 |
| 6 制备乌克兰鳞鲤各组织总 RNA | 第60页 |
| 7 合成乌克兰鳞鲤各组织第一链 cDNA | 第60页 |
| 8 PCR 确定低糖组、高糖组和禁食组乌克兰鳞鲤各组织 PK、PEPCK 基因的表达 | 第60-63页 |
| 第二节 结果与分析 | 第63-64页 |
| 1 禁食组乌克兰鳞鲤各组织 PK、PEPCK 基因的表达水平 | 第63页 |
| 2 低糖组乌克兰鳞鲤各组织 PK、PEPCK 基因的表达水平 | 第63页 |
| 3 高糖组乌克兰鳞鲤各组织 PK、PEPCK 基因的表达水平 | 第63-64页 |
| 第三节 讨论 | 第64-65页 |
| 第五章 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表文章情况 | 第75页 |
