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miR-34a通过抑制自噬溶酶体通路来降低Aβ降解

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miR-34a通过抑制自噬溶酶体通路来降低Aβ降解
论文目录
 
摘要第1-4页
abstract第4-7页
第1章 前言第7-23页
  1.1 阿兹海默病的研究进展第7-11页
    1.1.1 阿兹海默病简介第7页
    1.1.2 阿兹海默病与tau蛋白过度磷酸化第7-9页
    1.1.3 阿兹海默病与淀粉样蛋白的积累第9-10页
    1.1.4 阿兹海默病的诊断与治疗第10-11页
  1.2 细胞自噬第11-17页
    1.2.1 细胞自噬简介第11-12页
    1.2.2 细胞自噬的调控通路第12-14页
    1.2.3 溶酶体酶Cathepsins第14-15页
    1.2.4 细胞自噬的功能第15-16页
    1.2.5 细胞自噬与阿兹海默第16-17页
  1.3 miRNA的研究进展第17-23页
    1.3.1 miRNA的简介第17页
    1.3.2 miRNA的加工第17-19页
    1.3.3 miRNA的调控机制第19-20页
    1.3.4 miRNA与疾病第20-21页
    1.3.5 miR-34a第21-23页
第2章 材料与方法第23-35页
  2.1 实验试剂、材料与实验器材第23-24页
    2.1.1 动物实验模型第23页
    2.1.2 细胞实验相关试剂与耗材第23页
    2.1.3 分子实验相关试剂与耗材第23-24页
    2.1.4 实验仪器与实验设备第24页
  2.2 实验方法第24-33页
    2.2.1 细胞培养及细胞转染第24-25页
    2.2.2 细胞中RNA的抽提方法第25页
    2.2.3 RNA去基因组污染第25-26页
    2.2.4 将RNA反转得到cDNA第26页
    2.2.5 Q-PCR实验方法第26-27页
    2.2.6 用TaqMan探针检测miRNA第27-28页
    2.2.7 Western Blotting实验第28-30页
    2.2.8 构建靶点验证用双荧光报告载体第30-32页
    2.2.9 构建靶点验证用突变型双荧光报告载体第32-33页
  2.3 构建U251-GFP-LC3细胞系第33-34页
  2.4 构建稳定表达miR-34a的U251细胞系第34-35页
第3章 实验结果第35-52页
  3.1 转基因小鼠大脑组织中miR-34a表达上调第35-36页
  3.2 流式细胞仪检测miR-34a对U251细胞内Aβ42 降解的影响第36-39页
  3.3 Western Blotting检测miR-34a对自噬的影响第39-41页
    3.3.1 U251细胞上瞬时转染miR-34a检测其对自噬的影响第39-40页
    3.3.2 构建U251稳定表达miR-34a细胞系进行Western Blotting检测第40-41页
  3.4 荧光共聚焦显微镜观察转染miR-34a对U251细胞自噬产生的影响第41-43页
  3.5 miR-34a抑制溶酶体酶CathepsinB、CathepsinD第43-52页
    3.5.1 用生物信息学方法预测miR-34a抑制自噬溶酶体的靶点蛋白第43-44页
    3.5.2 用Q-PCR和Western Blotting验证miR-34a对Cathepsins的抑制第44-46页
    3.5.3 抑制U251细胞内源miR-34a反向验证对Cathepsins的抑制第46-48页
    3.5.4 检测miR-34a对Cathepsins活性的影响第48页
    3.5.5 构建双荧光报告载体来验证miR-34a在Cathepsins上的靶点第48-51页
    3.5.6 小结第51-52页
第4章 总结与展望第52-55页
  4.1 实验总结第52-53页
  4.2 讨论展望第53-55页
参考文献第55-63页
致谢第63-65页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第65页

本篇论文共65页,点击这进入下载页面
 
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