论文目录 | |
中文摘要 | 第1-8页 |
abstract | 第8-15页 |
前言 | 第15-19页 |
第一部分 低剂量α粒子或X射线在NL20细胞中造成的DNA损伤及其修复 | 第19-35页 |
材料 | 第19-21页 |
一、实验细胞 | 第19页 |
二、主要器材 | 第19-20页 |
三、主要试剂 | 第20-21页 |
方法 | 第21-25页 |
1 细胞培养、传代、冻存和复苏 | 第21-22页 |
2 辐照条件 | 第22-23页 |
3 53BP1免疫荧光实验检测NL20细胞经不同LET射线照射后其DNA损伤修复的情况 | 第23-24页 |
4 结晶紫实验检测ATM抑制剂Ku55933对NL20细胞增殖的影响 | 第24-25页 |
5 统计学方法 | 第25页 |
实验结果 | 第25-33页 |
1 NL20细胞受α粒子、X射线单次照射后其DNA损伤修复的情况 | 第25-27页 |
2 NL20细胞接受α粒子、X射线分次照射后其DNA损伤修复的情况 | 第27-29页 |
3 结晶紫实验检测ATM抑制剂Ku55933对NL20细胞增殖的影响 | 第29页 |
4 Ku55933预处理对单次及分次α粒子照射NL20细胞后其DNA损伤修复的影响 | 第29-31页 |
5 Ku55933预处理对单次X射线照射NL20细胞后其DNA损伤修复的影响 | 第31-33页 |
讨论 | 第33-35页 |
第二部分 单次低剂量铁离子照射在支气管上皮细胞中导致的长期生物学效应 | 第35-48页 |
材料 | 第35-36页 |
方法 | 第36-38页 |
1 细胞培养和辐照 | 第36页 |
2 微核形成实验 | 第36-37页 |
3 细胞增殖实验 | 第37页 |
4 流式细胞术检测细胞周期分布 | 第37页 |
5 细胞内ROS水平测定 | 第37页 |
6 Western Blot检测细胞中SOD1、SOD2表达水平 | 第37-38页 |
7 软琼脂克隆实验评估细胞转化 | 第38页 |
8 统计学方法 | 第38页 |
实验结果 | 第38-46页 |
1 接受铁离子照射NL20的子代细胞的微核形成率 | 第38-40页 |
2 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的增殖速度 | 第40-41页 |
3 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的周期分布 | 第41-43页 |
4 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的胞内活性氧(ROS)水平 | 第43页 |
5 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的SOD1、SOD2表达水平 | 第43-44页 |
6 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞的细胞转化 | 第44-46页 |
讨论 | 第46-48页 |
第三部分 受单次低剂量铁离子照射后发生转化的NL20子代细胞辐射敏感性改变 | 第48-56页 |
材料 | 第48-49页 |
方法 | 第49-50页 |
1 细胞辐照 | 第49页 |
2 铁离子照射NL20后其子代细胞发生细胞转化 | 第49页 |
3 微核形成实验 | 第49页 |
4 流式细胞仪检测细胞周期分布 | 第49页 |
5 Western Blot检测细胞中Reprimo表达水平 | 第49-50页 |
6 统计学方法 | 第50页 |
实验结果 | 第50-54页 |
1 受铁离子照射NL20细胞的41代子代细胞的细胞转化 | 第50-51页 |
2 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞克隆再次受X射线照射后的微核形成率 | 第51-52页 |
3 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞克隆再次受X射线照射后的周期分布 | 第52-54页 |
4 受铁离子照射NL20细胞的子代细胞克隆细胞中Reprimo的表达水平 | 第54页 |
讨论 | 第54-56页 |
第四部分 Reprimo对H460细胞辐射敏感性的影响 | 第56-68页 |
材料 | 第56-57页 |
一、实验细胞 | 第56页 |
二、实验器材和试剂 | 第56-57页 |
方法 | 第57-62页 |
1 质粒转化、扩增和提取 | 第57-59页 |
2 细胞稳定转染 | 第59-60页 |
3 转染质粒的H460细胞总RNA的提取 | 第60页 |
4 cDNA的合成 | 第60页 |
5 Real-time PCR检测旁效应细胞Reprimo的表达 | 第60-61页 |
6 微核形成实验 | 第61页 |
7 克隆形成实验 | 第61页 |
8 流式细胞仪检测细胞周期 | 第61-62页 |
9 统计学方法 | 第62页 |
结果 | 第62-66页 |
1 H460细胞过表达Reprimo后的RT-PCR验证 | 第62-63页 |
2 过表达Reprimo的H460细胞受照后的微核形成率 | 第63页 |
3 过表达Reprimo的H460细胞受照后的存活分数 | 第63-64页 |
4 过表达Reprimo的H460细胞受照后的细胞周期分布 | 第64-66页 |
讨论 | 第66-68页 |
结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
综述 | 第75-83页 |
参考文献 | 第79-83页 |
攻读学位期间本人出版或公开发表的论文 | 第83-84页 |
缩略词表 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-87页 |