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mmu-circ-012559调控髓源性抑制细胞功能的初步实验研究

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mmu-circ-012559调控髓源性抑制细胞功能的初步实验研究
论文目录
 
摘要第5-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-31页
  1.1 MDSCs第13-20页
    1.1.1 MDSCs的来源、分类第13页
    1.1.2 MDSCs的扩增与活化第13-16页
      1.1.2.1 MDSCs扩增机制第14-15页
      1.1.2.2 MDSCs活化机制第15-16页
    1.1.3 MDSCs的体外诱导第16页
    1.1.4 MDSCs发挥免疫抑制功能的机制第16-18页
      1.1.4.1 Arg1和iNOS第17页
      1.1.4.2 活性氧(reactive oxygen species, ROS)第17页
      1.1.4.3 半胱氨酸第17-18页
      1.1.4.4 胞间接触第18页
      1.1.4.5 诱导调节性T(regulatory T cell, Treg)细胞产生第18页
      1.1.4.6 MDSCs亚群的免疫抑制功能第18页
    1.1.5 MDSCs与肿瘤第18-19页
    1.1.6 MDSCs与其他疾病第19-20页
  1.2 环状RNA(circular RNA, circRNA)第20-26页
    1.2.1 circRNAs的来源及分类第21页
    1.2.2 circRNAs特征及生物学功能第21-24页
    1.2.3 circRNAs与肿瘤第24-25页
    1.2.4 circRNAs与免疫系统第25-26页
    1.2.5 circRNAs与其他疾病第26页
  1.3 微小RNA(microRNA, miRNA)第26-29页
    1.3.1 miRNA的生物合成与活性第27-28页
    1.3.2 miRNA对MDSCs的调控第28-29页
  1.4 研究目的、方法、实验设计及意义第29-31页
    1.4.1 研究目的第29页
    1.4.2 研究方法第29页
    1.4.3 实验设计第29-30页
    1.4.4 研究意义第30-31页
第二章 mmu-circ-012559 在肿瘤局部MDSCs中的表达变化第31-52页
  2.1 实验仪器和材料第32-35页
    2.1.1 实验动物第32页
    2.1.2 主要实验仪器第32-33页
    2.1.3 材料和试剂第33-34页
    2.1.4 主要溶液配制第34-35页
  2.2 实验方法第35-45页
    2.2.1 C57BL/6 小鼠皮下移植瘤模型的建立第35页
    2.2.2 小鼠MDSCs的分离与纯化第35-37页
      2.2.2.1 荷瘤小鼠脾脏MDSCs的分离第35-36页
      2.2.2.2 荷瘤小鼠肿瘤局部MDSCs的分离第36-37页
    2.2.3 制备TCCM第37页
    2.2.4 磁珠法分选小鼠CD4+ T细胞第37-38页
    2.2.5 检测MDSCs免疫抑制功能第38页
    2.2.6 Western Blot检测MDSCs中STAT3及p-STAT3蛋白水平第38-40页
    2.2.7 提取细胞基因组DNA第40页
    2.2.8 提取总RNA第40-41页
    2.2.9 Total RNA逆转录合成cDNA第41-43页
    2.2.10 qRT-PCR检测MDSCs中mmu-circ-012559 表达量第43-44页
    2.2.11 qRT-PCR检测MDSCs中miR-223 表达量第44页
    2.2.12 统计学分析第44-45页
  2.3 实验结果第45-50页
    2.3.1 MDSCs分离纯度鉴定第45页
    2.3.2 普通PCR验证mmu-circ-012559第45-46页
    2.3.3 qRT-PCR检测肿瘤局部及脾脏MDSCs中mmu-circ-012559、miR-223 的表达水平第46-48页
      2.3.3.1 mmu-circ-012559 与miR-223 扩增引物的特异性第46页
      2.3.3.2 肿瘤局部及脾脏MDSCs中mmu-circ-012559 及mi R-223 的表达水平第46-48页
    2.3.4 TCCM影响MDSCs中mmu-circ-012559 与miR-223 的表达第48-49页
    2.3.5 TCCM促进MDSCs对CD4+ T细胞增殖的抑制第49-50页
    2.3.6 TCCM上调MDSCs中STAT3的表达第50页
  2.4 讨论第50-52页
第三章 mmu-circ-012559 参与调控MDSCs免疫抑制功能第52-61页
  3.1 实验仪器和材料第52-53页
    3.1.1 实验动物第52页
    3.1.2 主要仪器第52页
    3.1.3 材料和试剂第52-53页
    3.1.4 主要溶液配制第53页
  3.2 实验方法第53-55页
    3.2.1 小鼠MDSCs转染si-mmu-circ-012559、miR-223 inhibitor第53-54页
    3.2.2 qRT-PCR验证si-mmu-circ-012559、mi R-223 inhibitor的转染效果第54页
    3.2.3 磁珠法分选小鼠CD4+ T细胞第54页
    3.2.4 检测MDSCs免疫抑制功能第54页
    3.2.5 检测MDSCs功能相关效应分子的表达第54-55页
      3.2.5.1 FCM检测ROS的表达第54页
      3.2.5.2 检测Arg1活性第54-55页
    3.2.6 统计分析第55页
  3.3 实验结果第55-59页
    3.3.1 MDSCs转染si-mmu-circ-012559、miR-223 inhibitor效果验证第55-57页
    3.3.2 mmu-circ-012559 调控MDSCs的免疫抑制功能第57页
    3.3.3 mmu-circ-012559 调控MDSCs免疫抑制相关效应分子的表达第57-59页
      3.3.3.1 mmu-circ-012559 参与调控MDSCs中ROS的表达第57-58页
      3.3.3.2 mmu-circ-012559 参与调控MDSCs中Arg1的表达第58-59页
    3.3.4 mmu-circ-012559 调控MDSCs中STAT3的表达第59页
  3.4 讨论第59-61页
第四章 结论及展望第61-62页
  4.1 结论第61页
  4.2 展望第61-62页
参考文献第62-71页
致谢第71-72页
攻读硕士期间发表的文章第72页

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