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GmHs1pro-1基因的表达及功能分析与载体构建

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GmHs1pro-1基因的表达及功能分析与载体构建
论文目录
 
中文摘要第10-11页
英文摘要第11-12页
第一章 综述第12-18页
  1.1 线虫简介第12-13页
    1.1.1 植物寄生线虫第12页
    1.1.2 定殖性线虫生活史第12-13页
  1.2 植物抗性响应第13-15页
    1.2.1 侵染前的防御反应第13-15页
    1.2.2 非宿主免疫反应第15页
    1.2.3 宿主特异性免疫反应第15页
  1.3 植物抗性基因第15-18页
    1.3.1 Hs1~(pro-1)基因与抗线虫候选基因GmHs1~(pro-1)第16-18页
第二章 GmHs1~(pro-1)基因克隆与生物信息学分析第18-39页
  2.1 材料与方法第18-24页
    2.1.1 试验材料第18-19页
    2.1.2 试验方法第19-24页
  2.2 结果与分析第24-38页
    2.2.1 大豆RNA的质量检测第24-25页
    2.2.2 GmHs1~(Pro-1)的克隆第25页
    2.2.3 GmHs1~(Pro-1)序列多样性分析第25-29页
    2.2.4 GmHs1~(pro-1)蛋白基本性质分析第29-31页
    2.2.5 GmHs1~(Pro-1)蛋白质结构分析第31-32页
    2.2.6 GmHs1~(pro-1)的注释与功能预测第32页
    2.2.7 GmHs1~(pro-1)蛋白亚细胞定位预测第32-36页
    2.2.8 GmHs1~(pro-1)蛋白互作分析与富集第36-38页
  2.3 小节与讨论第38-39页
第三章 GmHs1~(pro-1)基因在线虫侵染后的表达分析第39-46页
  3.1 材料与方法第39-41页
    3.1.1 试验材料第39-40页
    3.1.2 试验方法第40-41页
  3.2 结果与分析第41-44页
    3.2.1 qPCR结果的检测第41-42页
    3.2.2 qPCR测定GmHs1~(pro-1)基因相对表达量第42-44页
  3.3 小节与讨论第44-46页
第四章 GmHs1~(pro-1)蛋白的亚细胞定位第46-54页
  4.1 材料与方法第46-50页
    4.1.1 试验材料第46页
    4.1.2 试验方法第46-50页
  4.2 结果与分析第50-53页
    4.2.1 含有酶切位点GmHs1~(pro-1)序列的电泳第50页
    4.2.2 双元表达载体pCAMBIA1303::T2的构建第50-52页
    4.2.3 GmHs1~(pro-1)在烟草表皮及水稻原生质体的亚细胞定位第52-53页
  4.3 小节与讨论第53-54页
第五章 GmHs1~(pro-1)基因的过表达载体构建第54-58页
  5.1 材料与方法第54-56页
    5.1.1 试验材料第54-55页
    5.1.2 试验方法第55-56页
  5.2 结果与分析第56-57页
    5.2.1 电泳验证获得的插入序列第56页
    5.2.2 pNI202::T2载体的菌液PCR验证第56-57页
  5.3 小节与讨论第57-58页
第六章 GmHs1~(pro-1)基因编辑靶点检测与敲除载体构建第58-68页
  6.1 材料与方法第59-63页
    6.1.1 试验材料第59-60页
    6.1.2 试验方法第60-63页
  6.2 结果与分析第63-66页
    6.2.1 PCR获得体外转录模版第63页
    6.2.2 体外转录获得gRNA第63-64页
    6.2.3 spCas9/gRNA体外酶切反应第64-65页
    6.2.4 连接pVK005载体第65-66页
  6.3 小节与讨论第66-68页
第七章 结论第68-70页
  7.1 GmHs1~(pro-1)基因在物种内保守性高第68页
  7.2 GmHs1~(pro-1)基因参与大豆胞囊线虫抗性作用第68页
  7.3 GmHs1~(pro-1)蛋白只定位在细胞质内第68页
  7.4 GmHs1~(pro-1)蛋白可能是参与色氨酸降解的双加氧酶第68-69页
  7.5 构建了GmHs1~(pro-1)基因的过表达及敲除质粒第69页
  7.6 展望第69-70页
参考文献第70-76页
致谢第76-77页
攻读学位论文期间发表的文章第77页

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