论文目录 | |
| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 禾本科牧草植物落粒性 | 第11-14页 |
| 1.1.1 种子落粒的影响因素 | 第11-12页 |
| 1.1.2 禾本科植物落粒性调控机制 | 第12-14页 |
| 1.2 同源克隆 | 第14页 |
| 1.2.1 同源克隆的原理 | 第14页 |
| 1.2.2 同源克隆的方法 | 第14页 |
| 1.2.3 同源克隆的应用 | 第14页 |
| 1.3 实时荧光定量PCR技术 | 第14-15页 |
| 1.3.1 实施荧光定量PCR原理 | 第14-15页 |
| 1.3.2 实施荧光定量PCR技术不同的染料方法 | 第15页 |
| 1.4 蒙古冰草研究 | 第15-16页 |
| 1.4.1 蒙古冰草概述 | 第15-16页 |
| 1.4.2 蒙古冰草研究进展 | 第16页 |
| 1.5 本研究目的与意义 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 样品处理 | 第18页 |
| 2.1.3 菌株及载体 | 第18页 |
| 2.2 仪器药品 | 第18-20页 |
| 2.2.1 试剂 | 第18页 |
| 2.2.2 仪器 | 第18-19页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第19-20页 |
| 2.3 方法 | 第20-27页 |
| 2.3.1 提取总RNA(Trizol法) | 第20页 |
| 2.3.2 cDNA反转录 | 第20-21页 |
| 2.3.3 RACE (rapid amplification of cDNA ends) | 第21-22页 |
| 2.3.4 基因中间片段获取 | 第22-23页 |
| 2.3.5 基因5'端与3'端的获得 | 第23页 |
| 2.3.6 PCR产物回收与纯化 | 第23-24页 |
| 2.3.7 载体连接及菌体转化 | 第24页 |
| 2.3.8 菌液PCR | 第24-25页 |
| 2.3.9 测序结果分析 | 第25页 |
| 2.3.10 蒙古冰草不同组织内参基因筛选 | 第25-26页 |
| 2.3.11 蒙古冰草不同组织候选落粒基因表达检测 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-48页 |
| 3.1 蒙古冰草总RNA检测 | 第27页 |
| 3.2 蒙古冰草Amsh1-1克隆及序列分析 | 第27-32页 |
| 3.2.1 蒙古冰草Amsh1-1中间片段的获得 | 第27-28页 |
| 3.2.2 蒙古冰草Amsh1-1 3'的获得 | 第28页 |
| 3.2.3 蒙古冰草Amsh1-1 5'的获得 | 第28-29页 |
| 3.2.4 蒙古冰草Amsh1-1基因全长的获得 | 第29-30页 |
| 3.2.5 蒙古冰草Amsh1-1基因编码蛋白一级结构序列分析 | 第30页 |
| 3.2.6 蒙古冰草Amsh1-1编码蛋白二级和三级结构预测 | 第30-31页 |
| 3.2.7 蒙古冰草Amsh1-1亚细胞定位及功能预测分析 | 第31-32页 |
| 3.3 蒙古冰草Amsh1-2克隆及序列分析 | 第32-40页 |
| 3.3.1 蒙古冰草Amsh1-2中间片段的获得 | 第32页 |
| 3.3.2 蒙古冰草Amsh1-2 3'的获得 | 第32-33页 |
| 3.3.3 蒙古冰草Amsh1-2 5'的获得 | 第33-36页 |
| 3.3.4 蒙古冰草Amsh1-2基因全长的获得 | 第36-38页 |
| 3.3.5 蒙古冰草Amsh1-2基因编码蛋白一级结构序列分析 | 第38-40页 |
| 3.3.6 蒙古冰草Amsh1-2编码蛋白二级和三级结构预测 | 第40页 |
| 3.3.7 蒙古冰草Amsh1-2亚细胞定位及功能预测分析 | 第40页 |
| 3.4 蒙古冰草Amsh1-1与Amsh1-2关系 | 第40-42页 |
| 3.5 蒙古冰草不同组织内参基因筛选 | 第42-45页 |
| 3.5.1 7对内参基因普通PCR检测 | 第42页 |
| 3.5.2 内参基因qRT-PCR检测 | 第42页 |
| 3.5.3 内参基因筛选 | 第42-45页 |
| 3.5.4 RefFinder综合分析各基因稳定性 | 第45页 |
| 3.6 蒙古冰草不同组织落粒基因表达检测 | 第45-48页 |
| 3.6.1 落粒基因普通PCR检测 | 第45页 |
| 3.6.2 蒙古冰草落粒基因qRT-PCR检测 | 第45-46页 |
| 3.6.3 蒙古冰草落粒基因Amsh1-1与Amsh1-2表达情况 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 4.1 蒙古冰草Amsh1-1与Amsh1-2的克隆 | 第48页 |
| 4.2 蒙古冰草不同组织部位内参基因筛选 | 第48页 |
| 4.3 蒙古冰草不同组织部位Amsh1-1与Amsh1-2的表达 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
