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应用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得高直链淀粉马铃薯

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应用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得高直链淀粉马铃薯
论文目录
 
摘要第4-6页
ABSTRACT第6-10页
缩略词第10-11页
  一. 前言第11-19页
  1.1 马铃薯第11页
  1.2 马铃薯直链淀粉及淀粉分支酶第11-14页
    1.2.2 马铃薯直链淀粉特性及应用第11-12页
    1.2.3 淀粉合成途径及相关酶第12-13页
    1.2.4 淀粉分支酶基因(SBE)第13-14页
  1.3 CRISPR-Cas9基因编辑技术第14-18页
    1.3.1 CRISPR技术基本原理及优势第14-16页
    1.3.2 CRISPR技术在动植物中的应用第16-17页
    1.3.3 CRISPR编辑效率的影响因素第17-18页
  1.4 研究目的和意义第18-19页
  二. 实验材料与方法第19-27页
  2.1 实验材料第19-20页
    2.1.1 植物材料第19页
    2.1.2 菌株第19页
    2.1.3 载体第19页
    2.1.4 试剂与仪器第19-20页
  2.2 实验方法第20-27页
    2.2.1 设计基因靶序列第20页
    2.2.2 CRISPR载体构建第20-22页
    2.2.3 三亲融合法第22页
    2.2.4 马铃薯试管苗的培养第22-23页
    2.2.5 农杆菌介导的马铃薯茎段转化第23页
    2.2.6 植物基因组DNA的提取第23页
    2.2.7 阳性株鉴定第23-24页
    2.2.8 测序检测阳性株打靶效果第24-25页
    2.2.9 盆苗种植及薯块收获第25页
    2.2.10 直链淀粉含量测定第25-27页
  三. 实验结果第27-41页
  3.1 载体构建第27-30页
    3.1.1 SBEⅠ和SBEⅡ靶序列选择及合成第27-28页
    3.1.2 载体构建及阳性筛选第28-30页
  3.2 马铃薯转化株的获得及鉴定第30-35页
    3.2.1 转化株的获得第30-32页
    3.2.2 转化株打靶检测第32-35页
  3.3 收获及测产第35-37页
  3.4 直链淀粉含量测定第37页
  3.5 载体优化第37-41页
  四. 讨论第41-42页
参考文献第42-45页
附表1 引物序列第45-46页
附录2 培养基、试剂配方及贮存第46-48页
附录3 实验方法与操作第48-52页
致谢第52页

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