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棉花核雄性不育系“21A”不育株及可育株花药差异蛋白质组学的研究

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棉花核雄性不育系“21A”不育株及可育株花药差异蛋白质组学的研究
论文目录
 
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-13页
1 前言第13-22页
  1.1 棉花雄性不育系的类型第13-14页
    1.1.1 细胞核雄性不育(GMS)第13页
    1.1.2 细胞质雄性不育(CMS)第13-14页
  1.2 棉花核雄性不育的形态学研究第14页
  1.3 棉花核雄性不育的细胞学特征第14-15页
  1.4 棉花核雄性不育的生理生化研究第15-16页
    1.4.1 淀粉合成第15页
    1.4.2 蛋白质合成和氨基酸含量第15-16页
    1.4.3 酶和内源激素第16页
  1.5 棉花雄性不育分子机理第16-19页
    1.5.1 核雄性不育形成的分子机理研究第16-19页
      1.5.1.1 核雄性不育系的基因类型第17页
      1.5.1.2 核雄性不育基因的定位与克隆第17-18页
      1.5.1.3 基因差异表达分析第18-19页
  1.6 蛋白质组学第19-21页
    1.6.1 蛋白质组学的概念及内容第19-20页
    1.6.2 差异蛋白质组学研究技术第20-21页
      1.6.2.1 双向凝胶电泳技术第20页
      1.6.2.2 同位素标记相对和绝对定量技术第20-21页
  1.7 本研究的目的和意义第21-22页
2 材料与方法第22-31页
  2.1 材料第22页
    2.1.1 植物材料第22页
    2.1.2 棉花花蕾的取样第22页
  2.2 方法第22-31页
    2.2.1 鉴定不育株和可育株第22页
    2.2.2 鉴定不育花粉败育时期第22-23页
    2.2.3 iTRAQ定量蛋白质组实验方法第23-27页
      2.2.3.1 蛋白质提取和浓度检测第23-24页
      2.2.3.2 蛋白质酶解第24页
      2.2.3.3 iTRAQ标记第24页
      2.2.3.4 SCX分离第24-25页
      2.2.3.5 基于Q Exactive的液相色谱-质谱联用分析第25页
      2.2.3.6 质谱鉴定及数据分析第25-26页
      2.2.3.7 生物信息学分析第26-27页
    2.2.4 qRT-PCR验证第27-31页
      2.2.4.1 引物设计及合成第27-28页
      2.2.4.2 RNA提取第28-29页
      2.2.4.3 qRT-PCR第29-31页
        2.2.4.3.1 反转录反应第29-30页
        2.2.4.3.2 Real Time PCR反应第30-31页
3 结果与分析第31-48页
  3.1 不育株与可育株细胞学和形态学观察第31-32页
  3.2 蛋白质的提取及检测第32页
  3.3 初级质谱数据分析和蛋白质鉴定基本信息第32-35页
  3.4 蛋白功能注释第35-36页
  3.5 不育株与可育株花药差异表达蛋白分析第36-47页
    3.5.1 差异表达蛋白的鉴定第36-40页
    3.5.2 差异表达蛋白的GO富集分析第40-42页
    3.5.3 差异表达蛋白的COG功能分类第42页
    3.5.4 差异表达蛋白的Pathway富集分析第42-47页
      3.5.4.1 不育株和可育株在相同发育时期的Pathway富集分析第43-45页
      3.5.4.2 同种材料在不同发育时期的Pathway富集分析第45页
      3.5.4.3 不育株与可育株中特异表达蛋白的Pathway富集分析第45-47页
  3.6 qRT-PCR验证第47-48页
4 讨论第48-50页
  4.1 影响棉花发育的转录因子第48-49页
  4.2 花粉壁形成途径第49页
  4.3 淀粉和蔗糖代谢途径第49-50页
5 结论第50-52页
参考文献第52-58页
附录第58-63页
致谢第63页

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