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重组人β-防御素-3基因在小鼠乳腺中表达的初步研究

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分类:教育论文网→生物科学论文→分子生物学论文基因工程(遗传工程)论文
重组人β-防御素-3基因在小鼠乳腺中表达的初步研究
论文目录
 
致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-20页
  · 人防御素研究进展第9-14页
    · 人防御素的分布第9页
    · 人防御素的分子生物学特征第9-13页
      · 人防御素的分子结构第9-11页
      · 人防御素在染色体上的定位及基因结构第11页
      · 人防御素的抗菌活性第11-13页
      · 人防御素基因的表达调控第13页
    · 人防御素的作用机理第13-14页
    · 人防御素的基因工程第14页
      · 人防御素在原核细胞中的表达第14页
      · 人防御素在真核细胞中的表达第14页
  · 乳腺生物反应器第14-20页
    · 乳腺生物反应器的构建第15-17页
      · 表达载体的构建第15-17页
    · 常用的基因转移技术第17-18页
      · 显微注射法第17页
      · 反转录病毒感染技术第17-18页
      · 胞内精子微注射技术第18页
      · ES细胞介导技术第18页
    · 乳腺生物反应器的应用现状第18-19页
    · 问题与展望第19-20页
2 引言第20-21页
3 人β防御素3基因的克隆及序列分析第21-28页
  · 材料与方法第21-25页
    · 材料第21-22页
    · 实验方法第22-25页
      · PCR引物的设计与合成第22页
      · PCR反应第22-23页
      · PCR产物的回收和纯化第23页
      · 感受态细胞的制备第23-24页
      · PCR产物的克隆第24页
      · 重组质粒的转化第24页
      · 重组质粒pMD18-hBD3的筛选与鉴定第24-25页
  · 结果与分析第25-27页
    · hBD3的PCR扩增结果第25-26页
    · 重组质粒pMD18-hBD3的筛选与鉴定第26-27页
      · PCR 鉴定第26页
      · 酶切鉴定第26-27页
      · 测序鉴定第27页
  · 结论与讨论第27-28页
4 牛β酪蛋白基因5′端的克隆及序列测定第28-33页
  · 材料与方法第28-29页
    · 材料第28页
    · 方法第28-29页
      · PCR引物的设计与合成第28页
      · 牛血液DNA的提取第28页
      · PCR反应第28-29页
      · PCR产物的回收和纯化第29页
      · 感受态细胞的制备第29页
      · PCR产物的克隆第29页
      · 重组质粒的转化第29页
      · 转化菌的筛选与鉴定第29页
  · 结果与分析第29-31页
    · 提取血液基因组DNA第29页
    · 牛β-CN基因5′调控区的PCR扩增第29-30页
    · 重组质粒pMD18-βCN与鉴定第30-31页
      · PCR鉴定第30页
      · 酶切鉴定第30页
      · 测序鉴定第30-31页
  · 结论与讨论第31-33页
5 hBD3基因真核表达载体的构建及在小鼠乳腺中的初步表达第33-38页
  · 材料与方法第33-35页
    · 材料第33页
    · 实验方法第33-35页
      · 人β防御素3基因片段的制备第33页
      · 双酶切产物的纯化和回收第33-34页
      · 表达载体pcDNA3.1(+)-hBD3 的构建第34页
      · 表达载体pcDNA3.1(+)-hBD3的筛选与鉴定第34页
      · 注射用质粒DNA的制备第34-35页
      · 注射小鼠乳腺第35页
      · 乳汁的采取第35页
      · 乳汁中人β防御素3的检测第35页
  · 结果与分析第35-36页
    · 重组表达质粒pcDNA3.1-hBD3的构建第35页
    · 重组质粒pcDNA3.1(+)-hBD3的鉴定第35-36页
    · 人β防御素3基因的表达和活性检测第36页
  · 结论与讨论第36-38页
本文小结第38-39页
参考文献第39-47页
ABSTRACT第47-49页
附件1 克隆的人防御素3与GenBank公布序列比对结果第49-51页
附件2 克隆的牛β-酪蛋白基因5′端调控序列与GenBank公布的序列比对结果第51-54页

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