论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-5页 |
| abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 超长链单不饱和脂肪酸 | 第10-12页 |
| 1.1.1 超长链单不饱和脂肪酸生物学功能 | 第10页 |
| 1.1.2 超长链单不饱和脂肪酸的生物合成 | 第10-12页 |
| 1.2 神经酸 | 第12-14页 |
| 1.2.1 神经酸的来源和功能 | 第12-14页 |
| 1.2.2 神经酸的合成和代谢工程 | 第14页 |
| 1.3 ?-酮脂酰-COA合酶(?-ketoacyl-COAsynthase,KCS)基因 | 第14-15页 |
| 1.3.1 KCS基因 | 第14-15页 |
| 1.3.2 KCS基因的功能 | 第15页 |
| 1.4 RACE技术 | 第15-16页 |
| 1.4.1 RACE技术简单介绍 | 第15-16页 |
| 1.4.2 RACE技术在植物基因克隆上的应用 | 第16页 |
| 1.5 酿酒酵母 | 第16-17页 |
| 1.5.1 酿酒酵母的表达系统 | 第16-17页 |
| 1.5.2 酿酒酵母表达系统的优缺点 | 第17页 |
| 1.6 研究意义和技术路线 | 第17-19页 |
| 1.6.1 研究的目的和意义 | 第17页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第17-18页 |
| 1.6.3 技术路线 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 样品的采集 | 第19页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第19页 |
| 2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 软件与数据分析 | 第19-20页 |
| 2.1.5 实验仪器设备 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-36页 |
| 2.2.1 植物总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2 KCS保守区序列的克隆 | 第21-24页 |
| 2.2.3 RACE扩增 | 第24-28页 |
| 2.2.4 KCScDNA全长序列获得 | 第28-30页 |
| 2.2.5 KCScDNA全长序列的生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.2.6 含有目的片段的KCS酿酒酵母重组子的构建 | 第30-33页 |
| 2.2.7 阳性克隆菌株的筛选 | 第33-34页 |
| 2.2.8 脂肪酸的测定 | 第34-35页 |
| 2.2.9 气象色谱仪使用方法 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-66页 |
| 3.1 百香果、油菜和西兰花总RNA提取 | 第36页 |
| 3.2 百香果、油菜和西兰花简并引物设计 | 第36-37页 |
| 3.3 百香果、油菜和西兰花KCS保守区序列 | 第37-38页 |
| 3.4 百香果、油菜和西兰花KCS保守区序列分析结果 | 第38-41页 |
| 3.4.1 百香果KCS保守区序列 | 第38-39页 |
| 3.4.2 油菜KCS保守区序列 | 第39-40页 |
| 3.4.3 西兰花KCS保守区序列 | 第40-41页 |
| 3.5 百香果、油菜和西兰花KCSRACE扩增 | 第41-43页 |
| 3.6 百香果、油菜和西兰花KCSCDNA序列预测 | 第43-47页 |
| 3.6.1 百香果KCScDNA序列预测 | 第43-44页 |
| 3.6.2 油菜KCScDNA序列预测 | 第44-46页 |
| 3.6.3 西兰花KCScDNA序列预测 | 第46-47页 |
| 3.7 百香果、油菜和西兰花KCSCDNA序列扩增 | 第47-48页 |
| 3.8 百香果、油菜和西兰花KCSCDNA序列生物信息学分析 | 第48-61页 |
| 3.8.1 百香果、油菜和西兰花KCSORF的预测 | 第48-52页 |
| 3.8.2 百香果、油菜和西兰花KCS编码蛋白质的结构预测 | 第52-57页 |
| 3.8.3 百香果、油菜和西兰花KCS蛋白磷酸化位点的预测 | 第57-58页 |
| 3.8.4 百香果、油菜和西兰花KCS编码蛋白信号肽的预测 | 第58-60页 |
| 3.8.5 百香果、油菜和西兰花聚类分析 | 第60-61页 |
| 3.9 含有目的片段的KCS克隆载体构建及转化 | 第61-63页 |
| 3.9.1 含有目的片段KCS酿酒酵母表达载体的构建 | 第61-62页 |
| 3.9.2 含有目的片段KCS酿酒酵母表达载体的转化 | 第62-63页 |
| 3.10 阳性克隆菌株的筛选 | 第63-64页 |
| 3.11 气相色谱分析 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
