猪Mx1蛋白体内抗猪瘟病毒研究及其突变体活性分析 |
论文目录 | | | 摘要 | 第1-10页 | | ABSTRACT | 第10-12页 | | 缩略语表 | 第12-14页 | | 第一篇 文献综述 | 第14-46页 | | 第一章 MX蛋白的研究进展 | 第14-25页 | | 1 Mx蛋白的发现和命名 | 第14-15页 | | 2 Mx蛋白家族成员 | 第15-17页 | | 3 Mx蛋白的结构与功能 | 第17-20页 | | 3.1 GTP酶结构域 | 第17页 | | 3.2 中间域与GTP酶效应结构域 | 第17-18页 | | 3.3 Mx蛋白的3D结构 | 第18页 | | 3.4 Mx蛋白的寡聚 | 第18-19页 | | 3.5 Mx蛋白的膜结合 | 第19-20页 | | 4 Mx蛋白抗病毒机理 | 第20-22页 | | 5 Mx蛋白的研究现状 | 第22-24页 | | 6 Mx蛋白的应用前景 | 第24-25页 | | 第二章 猪瘟病毒的研究进展 | 第25-34页 | | 1 猪瘟病毒流行病学 | 第25-27页 | | 1.1 病原学特征 | 第25页 | | 1.2 流行病学特征 | 第25-26页 | | 1.3 临床症状和病理变化特征 | 第26-27页 | | 2 猪瘟病毒基因组和蛋白组 | 第27-31页 | | 2.1 5'UTR | 第27-28页 | | 2.2 结构蛋白 | 第28-29页 | | 2.3 非结构蛋白 | 第29-31页 | | 2.4 3'UTR | 第31页 | | 3 猪瘟病毒的生命周期 | 第31页 | | 4 猪瘟病毒的毒力和致病机理 | 第31-33页 | | 5 猪瘟病毒的控制和抗病毒技术 | 第33-34页 | | 参考文献 | 第34-46页 | | 第二篇 实验部分 | 第46-102页 | | 第一章 融合HIV蛋白转导域(PTD)的猪Mx1蛋白对水疱性口炎病毒抑制研究 | 第46-64页 | | 1 实验材料 | 第47-48页 | | 1.1 菌种、质粒、毒株和细胞 | 第47页 | | 1.2 主要试剂 | 第47-48页 | | 1.3 主要仪器设备 | 第48页 | | 2 实验方法 | 第48-53页 | | 2.1 PTD-poMx1融合蛋白的表达和纯化 | 第48-49页 | | 2.2 Western blot分析 | 第49页 | | 2.3 融合蛋白的重新折叠 | 第49页 | | 2.4 融合蛋白的去内毒素 | 第49-50页 | | 2.5 融合蛋白的转导试验 | 第50页 | | 2.6 激光共聚焦显微镜观察 | 第50-51页 | | 2.7 MTT法 | 第51页 | | 2.8 融合蛋白的GTP酶活性测定 | 第51页 | | 2.9 抗VSV增殖检测 | 第51-53页 | | 2.10 统计分析 | 第53页 | | 3 结果 | 第53-58页 | | 3.1 融合蛋白的表达和纯化 | 第53页 | | 3.2 融合蛋白的重折叠 | 第53-54页 | | 3.3 融合蛋白的入胞及活性 | 第54-56页 | | 3.4 融合蛋白对VSV的抗病毒作用 | 第56-57页 | | 3.5 融合蛋白不影响VSV入胞 | 第57-58页 | | 4 讨论 | 第58-60页 | | 参考文献 | 第60-64页 | | 第二章 融合HIV蛋白转导域(PTD)的猪Mx1在体外和体内抑制猪瘟病毒的感染研究 | 第64-82页 | | 1 实验材料 | 第65-66页 | | 1.1 菌种、质粒、毒株、细胞和动物 | 第65页 | | 1.2 主要试剂 | 第65页 | | 1.3 主要仪器设备 | 第65-66页 | | 2 实验方法 | 第66-69页 | | 2.1 激光共聚焦 | 第66页 | | 2.2 Western blot分析 | 第66-67页 | | 2.3 流式细胞仪分析(FCAS) | 第67页 | | 2.4 实时荧光定量RT-PCR (qRT-PCR) | 第67页 | | 2.5 PTD-poMx1体外抗病毒活性 | 第67-68页 | | 2.6 PTD-poMx1体内抗病毒活性 | 第68页 | | 2.7 统计分析 | 第68-69页 | | 3 结果 | 第69-76页 | | 3.1 PTD-poMx1的内化和稳定性 | 第69-70页 | | 3.2 PTD-poMx1不影响CSFV入胞 | 第70-71页 | | 3.3 体外评价抗病毒活性 | 第71-73页 | | 3.4 体内评价抗病毒活性 | 第73-76页 | | 4 讨论 | 第76-78页 | | 参考文献 | 第78-82页 | | 第三章 GTP酶活性和寡聚不是猪Mx1抑制猪瘟病毒增殖的必需条件 | 第82-102页 | | 1 实验材料 | 第83-84页 | | 1.1 菌种、质粒、细胞和毒株 | 第83页 | | 1.2 主要试剂 | 第83-84页 | | 1.3 主要仪器设备 | 第84页 | | 2 实验方法 | 第84-91页 | | 2.1 引物设计与合成 | 第84-85页 | | 2.2 EGFP-poMx1突变体获取 | 第85-87页 | | 2.3 Western blot分析突变体表达 | 第87页 | | 2.4 激光共聚焦显微镜观察突变体表达 | 第87-88页 | | 2.5 突变体GTP酶活的测定 | 第88页 | | 2.6 突变体寡聚特性观察 | 第88页 | | 2.7 突变体抗猪瘟病毒的活性 | 第88-90页 | | 2.8 突变体T103A特性鉴定 | 第90页 | | 2.9 突变体与内质网共定位 | 第90-91页 | | 2.10 统计分析 | 第91页 | | 3 结果 | 第91-96页 | | 3.1 重组真核表达质粒鉴定 | 第91页 | | 3.2 突变体表达及GTP酶活的鉴定 | 第91-92页 | | 3.3 突变体寡聚特性观察 | 第92-93页 | | 3.4 突变体抗猪瘟活性的测定 | 第93-94页 | | 3.5 T103A的显性负突变体特性 | 第94-95页 | | 3.6 突变体与内质网关系 | 第95-96页 | | 4 讨论 | 第96-98页 | | 参考文献 | 第98-102页 | | 全文总结 | 第102-104页 | | 致谢 | 第104-106页 | | 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第106页 |
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