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真菌蛋白激发子Hrip1诱导水稻抗病性及互作蛋白的鉴定

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真菌蛋白激发子Hrip1诱导水稻抗病性及互作蛋白的鉴定
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-13页
第一章 引言第13-19页
  1.1 激发子概述第13-14页
    1.1.1 过敏蛋白第13-14页
    1.1.2 几丁质第14页
    1.1.3 鞭毛蛋白第14页
  1.2 植物的免疫系统第14-15页
  1.3 激发子受体的研究现状第15-17页
    1.3.1 细菌鞭毛蛋白受体FLS2第16页
    1.3.2 细菌转录延伸因子受体EFR第16页
    1.3.3 其它受体第16-17页
  1.4 研究蛋白互作方法第17-18页
    1.4.1 体内蛋白互作第17页
    1.4.2 体外蛋白互作第17-18页
  1.5 Hrip1研究背景第18页
  1.6 研究目的及意义第18-19页
第二章 Hrip1的真核表达与纯化第19-29页
  2.1 实验材料第19页
    2.1.1 植物、菌株和质粒第19页
    2.1.2 试剂和仪器第19页
  2.2 实验方法第19-23页
    2.2.1 Hrip1真核表达载体的构建第19-21页
    2.2.2 毕赤酵母感受态的制备、转化第21-22页
    2.2.3 Hrip1的真核表达第22页
    2.2.4 Hrip1的纯化第22页
    2.2.5 蛋白浓度的测定第22-23页
    2.2.6 Hrip1的Western-blotting鉴定第23页
    2.2.7 真核表达Hrip1的活性检测第23页
  2.3 实验结果第23-27页
    2.3.1 Hrip1真核表达载体的构建第23-25页
    2.3.2 重组蛋白的表达和纯化第25-26页
    2.3.3 重组蛋白的鉴定第26-27页
    2.3.4 重组蛋白的生物活性检测第27页
  2.4 小结与讨论第27-29页
第三章 Hrip1诱导水稻抗病性第29-36页
  3.1 实验材料第29页
    3.1.1 植物和菌株第29页
    3.1.2 实验试剂和仪器第29页
  3.2 实验方法第29-31页
    3.2.1 稻瘟菌孢子制作第29页
    3.2.2 Hrip1诱导水稻抗病性第29-30页
    3.2.3 Hrip1处理后水稻水杨酸含量测定第30页
    3.2.4 Hrip1处理后水稻防御酶活性测定第30-31页
  3.3 实验结果第31-35页
    3.3.1 Hrip1诱导水稻抗病性第31-32页
    3.3.2 水杨酸含量的测定第32-33页
    3.3.3 防御相关酶活性的测定第33-35页
  3.4 小结与分析第35-36页
第四章 Hrip1水稻互作蛋白的筛选第36-43页
  4.1 实验材料第36页
    4.1.1 菌株和质粒第36页
    4.1.2 实验试剂和耗材第36页
    4.1.3 培养基与试剂配方第36页
  4.2 实验方法第36-39页
    4.2.1 诱饵载体的构建第36-38页
    4.2.2 诱饵载体转化酵母细胞第38页
    4.2.3 诱饵载体自激活鉴定第38-39页
    4.2.4 水稻文库筛选第39页
    4.2.5 阳性克隆的确定第39页
  4.3 实验结果第39-42页
    4.3.1 诱饵载体pDBleu-Hrip的构建第39-40页
    4.3.2 诱饵载体的自激活检测第40-41页
    4.3.3 水稻cDNA文库的筛选第41-42页
  4.4 小结与分析第42-43页
第五章 互作蛋白的基因克隆、原核表达和体外互作验证第43-51页
  5.1 实验材料第43页
    5.1.1 菌株、质粒和植物第43页
    5.1.2 实验试剂和仪器第43页
  5.2 实验方法第43-46页
    5.2.1 互作蛋白的基因克隆第43-45页
    5.2.2 互作蛋白原核表达载体的构建第45页
    5.2.3 互作蛋白的原核表达第45-46页
    5.2.4 GST pull-down实验第46页
  5.3 实验结果第46-50页
    5.3.1 互作蛋白基因的克隆第46-47页
    5.3.2 互作蛋白原核表达载体的构建第47-48页
    5.3.3 互作蛋白的原核表达与纯化第48-49页
    5.3.4 GST pull-down体外验证蛋白互作第49-50页
  5.4 小结与分析第50-51页
第六章 互作蛋白水稻突变体植株的获得第51-61页
  6.1 实验材料第51页
    6.1.1 植物、菌株和载体第51页
    6.1.2 试剂和仪器第51页
    6.1.3 培养基与试剂配制第51页
  6.2 实验方法第51-55页
    6.2.1 靶位点的选择第51-52页
    6.2.2 CRISPR/Cas9载体的构建第52-53页
    6.2.3 水稻的遗传转化第53-54页
    6.2.4 转基因植株的检测第54-55页
  6.3 实验结果第55-59页
    6.3.1 靶位点的设计第55-56页
    6.3.2 CRISPR/Cas9重组载体的构建第56-57页
    6.3.3 水稻的遗传转化和鉴定第57-58页
    6.3.4 转基因水稻的基因编辑分析第58-59页
  6.4 小结与讨论第59-61页
第七章 全文结论第61-62页
参考文献第62-68页
致谢第68-69页
作者简历第69页

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