论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
abstract | 第7-13页 |
第一章 引言 | 第13-23页 |
1.1 鸭坦布苏病毒病概述 | 第13页 |
1.2 鸭坦布苏病毒生物学特性 | 第13-14页 |
1.2.1 鸭坦布苏病毒病原学分类 | 第13页 |
1.2.2 鸭坦布苏病毒形态结构及理化特性 | 第13-14页 |
1.2.3 鸭坦布苏病毒的培养特性 | 第14页 |
1.3 鸭坦布苏病毒的基因组结构 | 第14-15页 |
1.4 鸭坦布苏病毒基因组编码蛋白 | 第15-16页 |
1.4.1 结构蛋白 | 第15-16页 |
1.4.2 非结构蛋白 | 第16页 |
1.5 鸭坦布苏病毒的流行病学特征 | 第16-17页 |
1.6 鸭坦布苏病毒的诊断与防治 | 第17-19页 |
1.6.1 临床诊断 | 第17页 |
1.6.2 病毒分离鉴定 | 第17页 |
1.6.3 血清学诊断方法 | 第17-18页 |
1.6.4 分子生物学诊断 | 第18-19页 |
1.6.5 鸭坦布苏病毒的防治 | 第19页 |
1.7 抗原表位 | 第19-22页 |
1.7.1 抗原表位概述 | 第19页 |
1.7.2 抗原表位分类 | 第19-20页 |
1.7.3 抗原表位的分析方法 | 第20-22页 |
1.7.4 鸭坦布苏病毒抗原表位研究进展 | 第22页 |
1.8 本文研究目的及意义 | 第22-23页 |
第二章 鸭坦布苏病毒E蛋白抗原表位的鉴定 | 第23-38页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 质粒、菌株 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
2.1.3 主要仪器 | 第23页 |
2.1.4 主要试剂的配置 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-29页 |
2.2.1 抗体中和活性测定 | 第24页 |
2.2.2 单克隆抗体的纯化 | 第24页 |
2.2.3 纯化的单克隆抗体SDS-PAGE分析 | 第24-25页 |
2.2.4 单克隆抗体抗原表位的鉴定 | 第25-28页 |
2.2.5 抗原表位保守性分析 | 第28页 |
2.2.6 DTMUV E蛋白结构预测及其表位定位 | 第28-29页 |
2.3 结果 | 第29-36页 |
2.3.1 抗体中和活性测定 | 第29页 |
2.3.2 单克隆抗体纯化 | 第29页 |
2.3.3 抗体浓度测定 | 第29页 |
2.3.4 噬菌体滴度测定 | 第29-30页 |
2.3.5 噬菌斑阳性克隆筛选结果 | 第30-31页 |
2.3.6 阳性噬菌体克隆测序及同源性比较 | 第31-33页 |
2.3.7 短肽融合蛋白的Western-Blot分析 | 第33-34页 |
2.3.8 表位序列保守性分析 | 第34-35页 |
2.3.9 DTMUV E蛋白结构预测及其表位定位 | 第35-36页 |
2.4 讨论 | 第36-38页 |
2.4.1 噬菌体展示技术方法分析 | 第36页 |
2.4.2 表位鉴定结果分析 | 第36-38页 |
第三章 抗原表位的交叉反应性分析 | 第38-45页 |
3.1 实验材料 | 第38页 |
3.1.1 质粒、菌株 | 第38页 |
3.1.2 主要试剂 | 第38页 |
3.1.3 主要仪器 | 第38页 |
3.2 实验方法 | 第38-41页 |
3.2.1 抗原表位同源性分析 | 第38-39页 |
3.2.2 表位氨基酸位点分析及重组质粒构建 | 第39-40页 |
3.2.3 质粒诱导表达及表达产物的Western-blot分析 | 第40页 |
3.2.4 抗原表位交叉反应性分析 | 第40-41页 |
3.3 结果 | 第41-44页 |
3.3.1 抗原表位同源性分析 | 第41-42页 |
3.3.2 表位关键性氨基酸位点分析 | 第42-43页 |
3.3.3 抗原表位交叉反应性分析 | 第43-44页 |
3.4 讨论 | 第44-45页 |
第四章 Epitope-ELISA诊断方法的初步建立 | 第45-52页 |
4.1 实验材料 | 第45页 |
4.1.1 主要试剂 | 第45页 |
4.1.2 主要仪器 | 第45页 |
4.2 实验方法 | 第45-47页 |
4.2.1 鸭坦布苏病毒抗体ELISA检测方法的操作步骤 | 第45页 |
4.2.2 ELISA检测条件的优化 | 第45-46页 |
4.2.3 阴阳性临界值的确定 | 第46页 |
4.2.4 特异性试验 | 第46页 |
4.2.5 重复性试验 | 第46-47页 |
4.2.6 敏感性试验 | 第47页 |
4.3 结果 | 第47-51页 |
4.3.1 ELISA检测条件的优化结果 | 第47-49页 |
4.3.2 阴阳性临界值确定 | 第49页 |
4.3.3 特异性试验结果 | 第49-50页 |
4.3.4 批内、批间重复性试验结果 | 第50页 |
4.3.5 敏感性试验结果 | 第50-51页 |
4.4 讨论 | 第51-52页 |
第五章 全文结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59页 |