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伪狂犬病病毒抗原性变异的分子基础研究

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伪狂犬病病毒抗原性变异的分子基础研究
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-15页
英文缩略表第15-16页
第一章 引言第16-25页
  1.1 伪狂犬病毒概述第16页
  1.2 PRV基因组结构及编码蛋白功能第16-18页
  1.3 PRV主要保护性抗原第18-19页
  1.4 糖蛋白B研究进展第19页
  1.5 CRISPR/CAS9基因编辑技术第19-23页
  1.6 本研究的目的与意义第23-25页
第二章 PRV JS-2012 株主要保护性抗原蛋白序列分析第25-32页
  2.1 材料与方法第25-26页
    2.1.1 基因组序列第25页
    2.1.2 主要保护性抗原蛋白进化树分析第25页
    2.1.3 主要保护性抗原蛋白氨基酸序列比对第25-26页
  2.2 结果第26-30页
    2.2.1 gB蛋白生物信息学分析第26-27页
    2.2.2 gC蛋白生物信息学分析第27-29页
    2.2.3 gD蛋白生物信息学分析第29-30页
  2.3 讨论第30-32页
第三章 使用CRISPR/CAS9构建GB替换重组病毒第32-53页
  3.1 材料和方法第32-42页
    3.1.1 病毒、细胞、质粒第32页
    3.1.2 主要试剂和仪器第32-33页
    3.1.3 重组病毒构建设计原理第33-34页
    3.1.4 CRISPR/Cas9质粒构建第34-37页
    3.1.5 同源重组供体质粒构建第37-40页
    3.1.6 重组病毒的拯救第40页
    3.1.7 重组病毒的筛选纯化第40-41页
    3.1.8 病毒生长曲线的绘制第41页
    3.1.9 空斑形成试验第41-42页
    3.1.10 小鼠致病性检测第42页
    3.1.11 统计学分析第42页
  3.2 结果第42-50页
    3.2.1 CRISPR/CAS9的构建第42-43页
    3.2.2 供体质粒的构建和鉴定第43-44页
    3.2.3 重组病毒的拯救第44-45页
    3.2.4 重组病毒的筛选与纯化第45-47页
    3.2.5 重组病毒生物学特性鉴定第47-48页
    3.2.6 重组病毒小鼠致病力检测第48-50页
  3.3 讨论第50-53页
第四章 GB替换重组病毒小鼠免疫原性差异分析第53-61页
  4.1 材料与方法第53-55页
    4.1.1 病毒和细胞第53页
    4.1.2 主要试剂和仪器第53页
    4.1.3 灭活疫苗的制备第53-54页
    4.1.4 实验动物第54页
    4.1.5 小鼠免疫攻毒模型的建立试验设计第54页
    4.1.6 gB免疫原性差异评价小鼠试验设计第54-55页
  4.2 结果第55-60页
    4.2.1 小鼠免疫攻毒模型的建立并确立了JS2012ΔgE/gI灭活疫苗小鼠模型最小免疫剂量第55-56页
    4.2.2 gB替换显著改变了Bartha-K61和JS2012ΔgE/gI的免疫原性第56-60页
  4.3 讨论第60-61页
第五章 使用CRISPR/CAS9构建GC互换重组病毒第61-75页
  5.1 材料和方法第61-68页
    5.1.1 病毒、细胞、质粒第61页
    5.1.2 主要试剂和仪器第61页
    5.1.3 重组病毒构建策略第61-63页
    5.1.4 CRISPR/Cas9质粒构建第63-64页
    5.1.5 同源重组供体质粒构建第64-66页
    5.1.6 重组病毒的拯救第66-67页
    5.1.7 重组病毒的筛选纯化第67-68页
  5.2 结果第68-73页
    5.2.1 CRISPR/Cas9的构建第68页
    5.2.2 供体质粒的构建和鉴定第68-69页
    5.2.3 重组病毒的拯救第69-70页
    5.2.4 重组病毒的筛选与纯化第70-73页
  5.3 讨论第73-75页
第六章 全文结论第75-76页
参考文献第76-82页
致谢第82-84页
作者简历第84页

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