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水貂阿留申病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立与应用

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水貂阿留申病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立与应用
论文目录
 
摘要第1-8页
abstract第8-16页
第一章 引言第16-21页
  1.1 水貂阿留申病毒概述第16-18页
    1.1.1 ADV的分类第16页
    1.1.2 形态结构与理化性质第16页
    1.1.3 ADV的致病机理第16-17页
    1.1.4 ADV的流行病学第17页
    1.1.5 ADV的防治第17页
    1.1.6 ADV的体外培养第17-18页
  1.2 ADV的分子生物学特性第18-19页
    1.2.1 基因组结构第18页
    1.2.2 基因的复制、转录与表达第18页
    1.2.3 基因组编码蛋白第18-19页
  1.3 AD诊断方法的研究进展第19-20页
    1.3.1 病原学诊断第19页
    1.3.2 血清学诊断第19-20页
    1.3.3 分子生物学诊断第20页
  1.4 研究的目的和意义第20-21页
第二章 ADV的分离与鉴定第21-26页
  2.1 材料第21页
    2.1.1 细胞与实验动物第21页
    2.1.2 主要试剂第21页
    2.1.3 主要仪器第21页
  2.2 方法第21-22页
    2.2.1 样品处理第21页
    2.2.2 病毒DNA的提取第21页
    2.2.3 PCR方法检测ADV第21-22页
    2.2.4 病毒分离培养第22页
    2.2.5 电镜观察第22页
    2.2.6 小鼠感染试验第22页
  2.3 结果第22-25页
    2.3.1 PCR检测结果第22-23页
    2.3.2 病毒分离与电镜观察结果第23-24页
    2.3.3 小鼠感染试验结果第24-25页
  2.4 讨论第25-26页
第三章 ADV-HRB毒株全序列测定与分析第26-30页
  3.1 材料第26页
    3.1.1 主要试剂第26页
    3.1.2 主要仪器第26页
  3.2 方法第26-28页
    3.2.1 引物设计第26-27页
    3.2.2 片段扩增第27页
    3.2.3 克隆测序第27页
    3.2.4 比对分析第27-28页
  3.3 结果第28-29页
    3.3.1 片段扩增第28页
    3.3.2 比对分析第28-29页
  3.4 讨论第29-30页
第四章 ADV重组VP2蛋白的原核表达与鉴定第30-36页
  4.1 材料第30页
    4.1.1 主要试剂第30页
    4.1.2 主要仪器第30页
  4.2 方法第30-32页
    4.2.1 重组表达菌构建第30页
    4.2.2 重组蛋白诱导表达第30页
    4.2.3 重组蛋白SDS-PAGE电泳鉴定第30-31页
    4.2.4 重组蛋白纯化第31页
    4.2.5 重组蛋白复性第31页
    4.2.6 重组蛋白Western Blot鉴定第31-32页
  4.3 结果第32-34页
    4.3.1 重组蛋白表达第32页
    4.3.2 重组蛋白纯化第32-33页
    4.3.3 重组蛋白复性第33-34页
    4.3.4 重组蛋白Western Blot鉴定第34页
  4.4 讨论第34-36页
第五章 ADV单克隆抗体与兔源多克隆抗体的制备第36-44页
  5.1 材料第36页
    5.1.1 病毒、细胞与实验动物第36页
    5.1.2 主要试剂第36页
    5.1.3 主要仪器第36页
  5.2 方法第36-40页
    5.2.1 动物免疫第36-37页
    5.2.2 细胞融合第37页
    5.2.3 杂交瘤细胞筛选第37页
    5.2.4 杂交瘤细胞亚型鉴定第37-38页
    5.2.5 IFA检测抗体第38页
    5.2.6 腹水制备与纯化第38-39页
    5.2.7 抗体效价的测定第39页
    5.2.8 抗原表位的鉴定第39-40页
  5.3 结果第40-43页
    5.3.1 单抗亚型第40页
    5.3.2 IFA检测抗体第40-41页
    5.3.3 腹水纯化第41页
    5.3.4 抗体效价第41页
    5.3.5 表位鉴定第41-43页
  5.4 讨论第43-44页
第六章 ADV双抗体夹心ELSIA检测方法的建立第44-49页
  6.1 材料第44页
    6.1.1 病毒与样品来源第44页
    6.1.2 主要试剂第44页
    6.1.3 主要仪器第44页
  6.2 方法第44-46页
    6.2.1 抗体工作浓度的确定第44页
    6.2.2 反应条件的优化第44-45页
    6.2.3 判定标准的确定第45页
    6.2.4 特异性试验第45页
    6.2.5 敏感性试验第45页
    6.2.6 重复性试验第45页
    6.2.7 符合率试验第45-46页
  6.3 结果第46-47页
    6.3.1 抗体最佳工作浓度第46页
    6.3.2 最佳反应条件第46页
    6.3.3 判定标准第46页
    6.3.4 特异性第46-47页
    6.3.5 敏感性第47页
    6.3.6 稳定性第47页
  6.4 讨论第47-49页
第七章 全文结论第49-50页
参考文献第50-55页
致谢第55-56页
作者简历第56页

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