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水貂阿留申病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立与应用
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水貂阿留申病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立与应用
论文目录
摘要
第1-8页
abstract
第8-16页
第一章 引言
第16-21页
1.1 水貂阿留申病毒概述
第16-18页
1.1.1 ADV的分类
第16页
1.1.2 形态结构与理化性质
第16页
1.1.3 ADV的致病机理
第16-17页
1.1.4 ADV的流行病学
第17页
1.1.5 ADV的防治
第17页
1.1.6 ADV的体外培养
第17-18页
1.2 ADV的分子生物学特性
第18-19页
1.2.1 基因组结构
第18页
1.2.2 基因的复制、转录与表达
第18页
1.2.3 基因组编码蛋白
第18-19页
1.3 AD诊断方法的研究进展
第19-20页
1.3.1 病原学诊断
第19页
1.3.2 血清学诊断
第19-20页
1.3.3 分子生物学诊断
第20页
1.4 研究的目的和意义
第20-21页
第二章 ADV的分离与鉴定
第21-26页
2.1 材料
第21页
2.1.1 细胞与实验动物
第21页
2.1.2 主要试剂
第21页
2.1.3 主要仪器
第21页
2.2 方法
第21-22页
2.2.1 样品处理
第21页
2.2.2 病毒DNA的提取
第21页
2.2.3 PCR方法检测ADV
第21-22页
2.2.4 病毒分离培养
第22页
2.2.5 电镜观察
第22页
2.2.6 小鼠感染试验
第22页
2.3 结果
第22-25页
2.3.1 PCR检测结果
第22-23页
2.3.2 病毒分离与电镜观察结果
第23-24页
2.3.3 小鼠感染试验结果
第24-25页
2.4 讨论
第25-26页
第三章 ADV-HRB毒株全序列测定与分析
第26-30页
3.1 材料
第26页
3.1.1 主要试剂
第26页
3.1.2 主要仪器
第26页
3.2 方法
第26-28页
3.2.1 引物设计
第26-27页
3.2.2 片段扩增
第27页
3.2.3 克隆测序
第27页
3.2.4 比对分析
第27-28页
3.3 结果
第28-29页
3.3.1 片段扩增
第28页
3.3.2 比对分析
第28-29页
3.4 讨论
第29-30页
第四章 ADV重组VP2蛋白的原核表达与鉴定
第30-36页
4.1 材料
第30页
4.1.1 主要试剂
第30页
4.1.2 主要仪器
第30页
4.2 方法
第30-32页
4.2.1 重组表达菌构建
第30页
4.2.2 重组蛋白诱导表达
第30页
4.2.3 重组蛋白SDS-PAGE电泳鉴定
第30-31页
4.2.4 重组蛋白纯化
第31页
4.2.5 重组蛋白复性
第31页
4.2.6 重组蛋白Western Blot鉴定
第31-32页
4.3 结果
第32-34页
4.3.1 重组蛋白表达
第32页
4.3.2 重组蛋白纯化
第32-33页
4.3.3 重组蛋白复性
第33-34页
4.3.4 重组蛋白Western Blot鉴定
第34页
4.4 讨论
第34-36页
第五章 ADV单克隆抗体与兔源多克隆抗体的制备
第36-44页
5.1 材料
第36页
5.1.1 病毒、细胞与实验动物
第36页
5.1.2 主要试剂
第36页
5.1.3 主要仪器
第36页
5.2 方法
第36-40页
5.2.1 动物免疫
第36-37页
5.2.2 细胞融合
第37页
5.2.3 杂交瘤细胞筛选
第37页
5.2.4 杂交瘤细胞亚型鉴定
第37-38页
5.2.5 IFA检测抗体
第38页
5.2.6 腹水制备与纯化
第38-39页
5.2.7 抗体效价的测定
第39页
5.2.8 抗原表位的鉴定
第39-40页
5.3 结果
第40-43页
5.3.1 单抗亚型
第40页
5.3.2 IFA检测抗体
第40-41页
5.3.3 腹水纯化
第41页
5.3.4 抗体效价
第41页
5.3.5 表位鉴定
第41-43页
5.4 讨论
第43-44页
第六章 ADV双抗体夹心ELSIA检测方法的建立
第44-49页
6.1 材料
第44页
6.1.1 病毒与样品来源
第44页
6.1.2 主要试剂
第44页
6.1.3 主要仪器
第44页
6.2 方法
第44-46页
6.2.1 抗体工作浓度的确定
第44页
6.2.2 反应条件的优化
第44-45页
6.2.3 判定标准的确定
第45页
6.2.4 特异性试验
第45页
6.2.5 敏感性试验
第45页
6.2.6 重复性试验
第45页
6.2.7 符合率试验
第45-46页
6.3 结果
第46-47页
6.3.1 抗体最佳工作浓度
第46页
6.3.2 最佳反应条件
第46页
6.3.3 判定标准
第46页
6.3.4 特异性
第46-47页
6.3.5 敏感性
第47页
6.3.6 稳定性
第47页
6.4 讨论
第47-49页
第七章 全文结论
第49-50页
参考文献
第50-55页
致谢
第55-56页
作者简历
第56页
本篇论文共
56
页,
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