论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
abstract | 第7-11页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.1 烟草普通花叶病毒概述 | 第12页 |
1.2 黄瓜花叶病毒概述 | 第12-13页 |
1.3 内质网应激概述 | 第13-16页 |
1.3.1 未折叠蛋白反应 | 第13-15页 |
1.3.2 细胞程序性死亡 | 第15-16页 |
1.4 植物内质网应激与环境胁迫 | 第16-17页 |
1.5 内质网应激与病毒感染 | 第17页 |
1.6 植物NAC家族概述 | 第17-20页 |
1.6.1 NAC家族结构概述 | 第18页 |
1.6.2 NAC家族功能概述 | 第18-20页 |
第二章 材料和方法 | 第20-31页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 植物材料及培养条件 | 第20页 |
2.1.2 供试毒株及菌株 | 第20页 |
2.1.3 载体与质粒 | 第20-21页 |
2.1.4 常用工具酶 | 第21-22页 |
2.1.5 试剂盒 | 第22页 |
2.1.6 主要试剂 | 第22页 |
2.1.7 主要实验仪器 | 第22-23页 |
2.1.8 引物设计 | 第23页 |
2.1.9 分析软件 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-31页 |
2.2.1 TMV和CMV的纯化 | 第23页 |
2.2.2 RNA提取及cDNA的合成 | 第23-24页 |
2.2.3 荧光定量 | 第24-25页 |
2.2.4 细菌转化 | 第25页 |
2.2.5 农杆菌转化 | 第25页 |
2.2.6 VIGS载体构建 | 第25-28页 |
2.2.7 融合蛋白表达载体的构建 | 第28-29页 |
2.2.8 农杆菌转染 | 第29-30页 |
2.2.9 融合蛋白的表达和纯化 | 第30页 |
2.2.10 激光共聚焦显微镜观察 | 第30-31页 |
第三章 实验结果 | 第31-43页 |
3.1 病毒侵染引起内质网超微结构变化 | 第31-32页 |
3.2 病毒侵染引起内质网应激和UPR信号途径 | 第32-33页 |
3.3 NbNAC089全长结构分析 | 第33页 |
3.4 NbNAC089亚细胞定位 | 第33-36页 |
3.4.1 激光共聚焦观察NbNAC089 | 第33页 |
3.4.2 病毒侵染对NbNAC089定位的影响 | 第33-36页 |
3.5 沉默NbNAC089增强本氏烟对TMV和CMV的敏感性 | 第36-43页 |
3.5.1 VIGS沉默载体构建 | 第36-37页 |
3.5.2 检测沉默效率 | 第37页 |
3.5.3 沉默NbNAC089促进TMV-GFP的复制和增殖 | 第37-38页 |
3.5.4 沉默NbNAC089促进CMV的复制和增殖 | 第38-39页 |
3.5.5 NbNAC089抑制病毒增殖的机制研究 | 第39-43页 |
第四章 讨论 | 第43-46页 |
4.1 TMV/CMV侵染引起内质网应激反应 | 第43页 |
4.2 NbNAC089结构特点及病毒对其定位的影响 | 第43-44页 |
4.3 NbNAC089在病毒侵染引起的内质网应激过程中的信号通路 | 第44-45页 |
4.4 研究展望 | 第45-46页 |
第五章 全文结论及创新点 | 第46-48页 |
5.1 全文结论 | 第46页 |
5.2 创新点 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
附录 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56-57页 |