论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略表 | 第9-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| 1.1 瓜类细菌性果斑病简介 | 第14-15页 |
| 1.1.1 瓜类细菌性果斑病的发现及症状 | 第14页 |
| 1.1.2 西瓜噬酸菌生物学特性 | 第14-15页 |
| 1.1.3 瓜类细菌性果斑病防治方法 | 第15页 |
| 1.2 细菌鞭毛 | 第15-18页 |
| 1.2.1 鞭毛结构 | 第16页 |
| 1.2.2 鞭毛基因的表达调控 | 第16页 |
| 1.2.3 转录因子FliA | 第16-17页 |
| 1.2.4 鞭毛素编码基因fliC | 第17-18页 |
| 1.2.5 鞭毛在植物细菌致病力中的作用 | 第18页 |
| 1.3 细菌趋化性 | 第18-19页 |
| 1.4 研究目的、内容及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 fliA、fliC生物信息学分析 | 第20-24页 |
| 2.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-21页 |
| 2.2.1 西瓜噬酸菌鞭毛素基因fliA、fliC基本信息 | 第20页 |
| 2.2.2 西瓜噬酸菌鞭毛素FliA、FliC蛋白结构域预测分析 | 第20页 |
| 2.2.3 构建材料所述细菌的FliA、FliC蛋白系统发育树构建 | 第20-21页 |
| 2.3 结果 | 第21-23页 |
| 2.3.1 西瓜噬酸菌鞭毛合成调控因子fliA生物信息学分析 | 第21-22页 |
| 2.3.2 西瓜噬酸菌鞭毛合成调控因子fliC生物信息学分析 | 第22-23页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第23-24页 |
| 第三章 西瓜噬酸菌σ~(28)因子fliA突变株构建及功能研究 | 第24-37页 |
| 3.1 试验材料 | 第24-26页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第24页 |
| 3.1.2 仪器与试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.3 培养基与培养条件 | 第25-26页 |
| 3.2 试验方法 | 第26-31页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第26页 |
| 3.2.2 突变株 ΔfliA的构建 | 第26-29页 |
| 3.2.3 互补菌株 ΔfliA::fliA的构建 | 第29-30页 |
| 3.2.4 致病力与过敏性测定 | 第30页 |
| 3.2.5 鞭毛形态观察 | 第30页 |
| 3.2.6 运动性测定 | 第30页 |
| 3.2.7 生物膜测定 | 第30页 |
| 3.2.8 生长能力测定 | 第30-31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-36页 |
| 3.3.1 自杀性重组质粒pSZX-fliA与互补载体pBBRfliA的构建 | 第31页 |
| 3.3.2ΔfliA突变菌株的验证 | 第31-32页 |
| 3.3.3ΔfliA::fliA互补菌株的验证 | 第32页 |
| 3.3.4 致病力测定结果 | 第32-33页 |
| 3.3.5 过敏性反应测定 | 第33-34页 |
| 3.3.6 鞭毛形态 | 第34页 |
| 3.3.7 运动性测定结果 | 第34-35页 |
| 3.3.8 生物膜测定结果分析 | 第35页 |
| 3.3.9 生长能力测定 | 第35-36页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 西瓜噬酸菌鞭毛素基因fliC及趋化性基因cheA双突变株构建及功能研究 | 第37-50页 |
| 4.1 试验材料 | 第37-38页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第37页 |
| 4.1.2 仪器与试剂 | 第37页 |
| 4.1.3 培养基与培养条件 | 第37-38页 |
| 4.2 试验方法 | 第38-41页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第38页 |
| 4.2.2 突变株 ΔcheAΔfliC、Δfli C的构建 | 第38-40页 |
| 4.2.3 互补菌株 ΔcheAΔfliC::cheA::fliC、ΔfliC::fliC的构建 | 第40页 |
| 4.2.4 致病力与过敏性测定 | 第40-41页 |
| 4.2.5 鞭毛形态观察 | 第41页 |
| 4.2.6 运动性测定 | 第41页 |
| 4.2.7 生物膜测定 | 第41页 |
| 4.2.8 生长能力测定 | 第41页 |
| 4.2.9 种子上粘附能力测定 | 第41页 |
| 4.3 结果与分析 | 第41-48页 |
| 4.3.1 自杀性重组质粒pSZX-fliC与互补载体pBBRfliC、pRK415-cheA的构建 | 第41-42页 |
| 4.3.2 ΔcheAΔfliC和 ΔfliC突变菌株的验证 | 第42-43页 |
| 4.3.3ΔfliC::fliC、ΔcheAΔfliC::cheA::fliC互补菌株的验证 | 第43页 |
| 4.3.4 致病力与过敏性分析 | 第43-45页 |
| 4.3.5 鞭毛形态 | 第45-46页 |
| 4.3.6 运动性测定结果分析 | 第46-47页 |
| 4.3.7 生物膜测定结果分析 | 第47页 |
| 4.3.8 生长能力测定结果分析 | 第47-48页 |
| 4.3.9 种子上粘附能力测定结果分析 | 第48页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 突变菌株致病相关基因表达量分析 | 第50-56页 |
| 5.1 试验材料 | 第50页 |
| 5.1.1 供试菌株 | 第50页 |
| 5.1.2 仪器与试剂 | 第50页 |
| 5.2 试验方法 | 第50-53页 |
| 5.2.1 荧光定量引物设计 | 第50-51页 |
| 5.2.2 总RNA的提取 | 第51页 |
| 5.2.3 反转录 | 第51-52页 |
| 5.2.4 荧光定量PCR | 第52页 |
| 5.2.5 荧光定量PCR反应数据分析 | 第52-53页 |
| 5.3 结果与分析 | 第53-54页 |
| 5.3.1 普通PCR检测qPCR引物特异性 | 第53页 |
| 5.3.2 ΔfliA突变菌株中相关基因表达量分析 | 第53-54页 |
| 5.3.3 ΔcheAΔfliC、ΔfliC突变菌株中相关基因表达量分析 | 第54页 |
| 5.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第六章 全文结论及展望 | 第56-58页 |
| 6.1 西瓜噬酸菌fliA和fliC生物信息学分析 | 第56页 |
| 6.2 ΔfliA突变菌株及互补菌株的构建及生物学特性测定 | 第56页 |
| 6.3 ΔcheAΔfliC、ΔfliC突变菌株和互补菌株的构建及生物学特性测定 | 第56页 |
| 6.4 突变菌株致病相关基因表达量分析 | 第56页 |
| 6.5 展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
