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棉花黄萎病菌内源几丁质酶基因VDECH功能分析

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棉花黄萎病菌内源几丁质酶基因VDECH功能分析
论文目录
 
摘要第1-6页
abstract第6-12页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-21页
  1.1 真菌源几丁质酶在植物抗真菌病害中的应用第13-17页
    1.1.1 几丁质酶及其特性第13-14页
    1.1.2 几丁质酶抑菌作用机制第14页
    1.1.3 几丁质酶的生防应用第14-15页
    1.1.4 转几丁质酶基因植物与抗病性第15-16页
    1.1.5 几丁质酶制品第16-17页
  1.2 激发子第17-19页
    1.2.1 激发子研究背景第17页
    1.2.2 激发子诱导植物防御反应早期事件第17-18页
    1.2.3 激发子诱导植物防御反应信号途径第18页
    1.2.4 激发子诱导防御相关基因的表达调控及诱导植物抗性第18-19页
  1.3 本研究的目的与意义第19页
  1.4 本研究技术路线第19-21页
第二章 大丽轮枝菌内源几丁质酶基因VDECH的克隆、蛋白结构预测及表达量分析第21-31页
  2.1 实验材料第21页
    2.1.1 棉花黄萎病菌菌株第21页
    2.1.2 培养基及试剂第21页
    2.1.3 实验仪器第21页
  2.2 实验方法第21-25页
    2.2.1 棉花黄萎病菌基因组DNA的提取第21-22页
    2.2.2 棉花黄萎病菌RNA的提取和反转录第22页
    2.2.3 棉花黄萎病菌内源几丁质酶基因VDECH的克隆第22-23页
    2.2.4 PCR产物连接T载体、转化及测序第23-24页
    2.2.5 棉花黄萎病菌内源几丁质酶基因VDECH的生物信息学分析第24页
    2.2.6 棉花黄萎病菌内源几丁质酶基因VDECH的表达分析第24-25页
  2.3 结果分析第25-30页
    2.3.1 内源几丁质酶基因VDECH的克隆第25-26页
    2.3.2 内源几丁质酶基因VDECH的生物信息学分析第26-27页
    2.3.3 内源几丁质酶基因VDECH系统发育分析第27-29页
    2.3.4 VDECH基因表达分析第29页
    2.3.5 棉花不同组织对VDECH表达的诱导分析第29-30页
  2.4 小结与讨论第30-31页
第三章 大丽轮枝菌内源几丁质酶基因VDECH的原核表达第31-40页
  3.1 实验材料第31页
    3.1.1 菌株与质粒第31页
    3.1.2 实验试剂和仪器设备第31页
    3.1.3 培养基与试剂配制第31页
  3.2 实验方法第31-35页
    3.2.1 VDECH原核表达载体的构建第31-33页
    3.2.2 VDECH重组蛋白的诱导表达第33-34页
    3.2.3 VDECH重组蛋白表达条件优化第34页
    3.2.4 目的蛋白的纯化第34页
    3.2.5 SDS-PAGE分析第34-35页
    3.2.6 纯化后目的蛋白浓度的测定第35页
  3.3 结果分析第35-38页
    3.3.1 VDECH信号肽预测第35-36页
    3.3.2 不同IPTG诱导浓度对VDECH蛋白表达量的影响第36页
    3.3.3 不同诱导温度对VDECH蛋白表达量的影响第36-37页
    3.3.4 VDECH的体外表达和纯化第37页
    3.3.5 蛋白浓度的测定第37-38页
  3.4 小结与讨论第38-40页
第四章 植物对VDECH蛋白的初级免疫应答第40-47页
  4.1 实验材料第40页
    4.1.1 菌株与植物材料第40页
    4.1.2 培养基及其配制第40页
    4.1.3 主要生化试剂及其配制第40页
    4.1.4 仪器第40页
  4.2 实验方法第40-42页
    4.2.1 拟南芥的生长培养第40-41页
    4.2.2 VDECH蛋白液处理拟南芥幼苗叶片第41页
    4.2.3 棉花的生长培养第41页
    4.2.4 VDECH蛋白液处理棉花幼苗叶片第41页
    4.2.5 VDECH诱导拟南芥和棉花叶片过氧化氢积累的检测第41页
    4.2.6 重组蛋白的特性分析第41-42页
  4.3 结果分析第42-45页
    4.3.1 拟南芥叶片对不同浓度VDECH处理的反应第42-43页
    4.3.2 VDECH处理棉花叶片后不同时间叶片的反应第43页
    4.3.3 VDECH引起拟南芥和棉花叶片过氧化氢的积累第43-44页
    4.3.4 不同温度下VDECH蛋白活性检测第44页
    4.3.5 不同温度下VDECH蛋白酶活测定第44-45页
  4.4 小结与讨论第45-47页
第五章 VDECH诱导棉花和拟南芥系统获得抗性第47-56页
  5.1 实验材料第47页
    5.1.1 菌株与植物材料第47页
    5.1.2 实验试剂和仪器第47页
    5.1.3 培养基与试剂配方第47页
  5.2 实验方法第47-50页
    5.2.1 VDECH诱导棉花对大丽轮枝菌的抗性实验第47-48页
    5.2.2 VDECH诱导棉花防御相关基因的表达第48-49页
    5.2.3 VDECH诱导拟南芥防御相关基因的表达第49-50页
  5.3 结果分析第50-54页
    5.3.1 VDECH诱导提高棉花对大丽轮枝菌抗性第50-52页
    5.3.2 VDECH诱导棉花防御相关基因的表达第52-53页
    5.3.3 VDECH诱导拟南芥防御相关基因的表达第53-54页
  5.4 小结与讨论第54-56页
第六章 VDECH抑制病原菌孢子萌发研究第56-59页
  6.1 实验材料第56页
  6.2 实验方法第56-57页
    6.2.1 大丽轮枝菌,尖孢镰刀菌孢子液的制备第56页
    6.2.2 VDECH抑制孢子萌发的测定第56-57页
  6.3 结果分析第57-58页
    6.3.1 VDECH对棉花黄萎病菌孢子萌发的影响第57页
    6.3.2 VDECH对棉花枯萎病菌孢子萌发的影响第57-58页
  6.4 小结与讨论第58-59页
第七章 结论第59-60页
参考文献第60-68页
致谢第68-69页
作者简历第69页

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