论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
abstract | 第7-12页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.1 转基因作物发展概况 | 第12-14页 |
1.1.1 全球转基因作物研发、种植情况 | 第12-13页 |
1.1.2 我国转基因棉花研发、种植情况 | 第13页 |
1.1.3 转基因作物安全性问题讨论及风险评估 | 第13-14页 |
1.2 转基因检测技术研究进展 | 第14-16页 |
1.2.1 常见外源蛋白检测技术 | 第14-15页 |
1.2.2 常见外源核酸检测技术 | 第15-16页 |
1.3 外源基因蛋白表达及转录研究 | 第16-18页 |
1.3.1 转基因棉花外源蛋白表达研究 | 第16页 |
1.3.2 转基因玉米外源蛋白表达 | 第16-17页 |
1.3.3 转基因水稻外源蛋白表达 | 第17页 |
1.3.4 复合转基因表达与转录研究 | 第17-18页 |
1.4 研究背景、内容及意义 | 第18-20页 |
1.4.1 研究背景 | 第18-19页 |
1.4.2 研究内容 | 第19页 |
1.4.3 研究意义 | 第19-20页 |
第二章 保铃棉中 7S非功能插入检测方法建立及运用 | 第20-28页 |
2.1 材料与方法 | 第20-23页 |
2.1.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.2 实验试剂、仪器及设备 | 第21页 |
2.1.3 样品制备及基因组DNA提取 | 第21页 |
2.1.4 7S非功能插入序列定性PCR检测方法的建立 | 第21-22页 |
2.1.5 7S非功能插入的定量PCR检测方法建立 | 第22-23页 |
2.1.6 我国转基因棉花种子中 7S非功能插入序列的检测 | 第23页 |
2.2 实验结果与分析 | 第23-26页 |
2.2.1 7S非功能插入序列定性PCR方法的灵敏度和特异性测试 | 第23-24页 |
2.2.2 我国棉花种子中 7S非功能插入的定性检测分析 | 第24-25页 |
2.2.3 7S非功能插入序列定量PCR方法标准曲线制备 | 第25页 |
2.2.4 我国棉花种子中 7S非功能插入片段的定量检测 | 第25-26页 |
2.3 讨论与分析 | 第26-28页 |
第三章 复合转基因棉花CRY1AC蛋白表达分析 | 第28-36页 |
3.1 材料与方法 | 第28-31页 |
3.1.1 实验材料 | 第28页 |
3.1.2 实验试剂、仪器及设备 | 第28-29页 |
3.1.3 田间设计 | 第29页 |
3.1.4 核酸鉴定 | 第29页 |
3.1.5 Cry1Ac外源蛋白检测 | 第29-31页 |
3.2 结果与分析 | 第31-34页 |
3.2.1 检测方法测试 | 第31页 |
3.2.2 身份特征鉴定 | 第31-32页 |
3.2.3 Cry1Ac蛋白测定 | 第32-34页 |
3.3 讨论 | 第34-36页 |
第四章 复合转基因棉花CRY1AC基因转录分析 | 第36-43页 |
4.1 材料与方法 | 第36-39页 |
4.1.1 棉花材料 | 第36页 |
4.1.2 主要试剂及仪器 | 第36页 |
4.1.3 实验设计及采样处理 | 第36页 |
4.1.4 总RAN提取 | 第36-37页 |
4.1.5 cDNA第一链合成 | 第37页 |
4.1.6 引物设计及优化 | 第37-38页 |
4.1.7 荧光定量分析 | 第38页 |
4.1.8 数据处理 | 第38-39页 |
4.2 结果与分析 | 第39-41页 |
4.2.1 材料鉴定及RNA提取 | 第39页 |
4.2.2 荧光定量引物测试 | 第39-40页 |
4.2.3 荧光定量标准曲线构建 | 第40-41页 |
4.2.4 转录分析 | 第41页 |
4.3 讨论与分析 | 第41-43页 |
第五章 复合转基因棉花CRY1AC基因启动子甲基化分析 | 第43-53页 |
5.1 材料与方法 | 第43-47页 |
5.1.1 棉花材料 | 第43页 |
5.1.2 主要试剂及仪器 | 第43-44页 |
5.1.3 基因组DNA提取 | 第44页 |
5.1.4 亚硫酸盐转化 | 第44页 |
5.1.5 目标启动子PCR扩增 | 第44-45页 |
5.1.6 克隆测序 | 第45-46页 |
5.1.7 数据处理 | 第46-47页 |
5.2 结果与分析 | 第47-51页 |
5.2.1 DNA提取及PCR扩增鉴定 | 第47页 |
5.2.2 甲基化PCR | 第47-48页 |
5.2.3 DNA甲基化水平测序分析 | 第48-50页 |
5.2.4 复合转基因 35S启动子CpG区域分析 | 第50-51页 |
5.3 讨论 | 第51-53页 |
第六章 全文结论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简历 | 第62页 |