论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 英文缩写索引 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 问题的提出和研究意义 | 第12-13页 |
| 1.1.1 问题的提出 | 第12-13页 |
| 1.1.2 研究意义 | 第13页 |
| 1.2 国内外研究进展简介 | 第13-16页 |
| 1.2.1 肺纤维化与EMT的研究概况 | 第13页 |
| 1.2.2 基底硬度对细胞生物学影响的研究概况 | 第13-14页 |
| 1.2.3 基底表面拓扑结构对细胞生物学影响的研究概况 | 第14-16页 |
| 1.2.4 基底拓扑结构影响细胞EMT可能的机制 | 第16页 |
| 1.3 研究目的和研究内容 | 第16-18页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第16-17页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第17-18页 |
| 1.4 技术路线 | 第18页 |
| 1.5 创新点 | 第18-20页 |
| 2 基底硬度对人肺泡上皮细胞发生EMT过程的影响 | 第20-38页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验仪器、试剂和材料 | 第20-22页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.2 试剂和材料 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法和步骤 | 第22-29页 |
| 2.3.1 不同硬度的PDMS平面基底的制备与硬度测量 | 第22-23页 |
| 2.3.2 A549人肺泡上皮细胞株的培养 | 第23页 |
| 2.3.3 A549细胞与PDMS平面基底的复合培养 | 第23页 |
| 2.3.4 RT-PCR检测基因表达 | 第23-26页 |
| 2.3.5 Western Blot检测蛋白表达 | 第26-29页 |
| 2.4 实验结果 | 第29-35页 |
| 2.4.1 固化剂浓度比对PDMS基底硬度的影响 | 第29-30页 |
| 2.4.2 基底硬度对A549细胞形态的影响 | 第30-31页 |
| 2.4.3 基底硬度对A549细胞vimentin和E-cadherin mRNA表达的影响 | 第31-33页 |
| 2.4.4 基底硬度对A549细胞Vimentin和E-cadherin蛋白表达的影响 | 第33-35页 |
| 2.5 讨论 | 第35-36页 |
| 2.6 本章小结 | 第36-38页 |
| 3 基底表面拓扑结构对人肺泡上皮细胞发生EMT过程的影响 | 第38-48页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 实验仪器、试剂和材料 | 第38-40页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.2.2 试剂和材料 | 第39-40页 |
| 3.3 实验方法和步骤 | 第40-41页 |
| 3.3.1 不同表面拓扑结构基底的制备 | 第40页 |
| 3.3.2 A549人肺泡上皮细胞的培养 | 第40页 |
| 3.3.3 A549细胞与表面拓扑结构的复合培养 | 第40页 |
| 3.3.4 扫描电镜观察细胞形态 | 第40-41页 |
| 3.3.5 免疫荧光染色 | 第41页 |
| 3.4 实验结果 | 第41-45页 |
| 3.4.1 细胞在表面拓扑结构上的形态差异 | 第41-42页 |
| 3.4.2 表面拓扑结构对A549细胞EMT相关蛋白表达的影响 | 第42-45页 |
| 3.5 讨论和分析 | 第45-46页 |
| 3.6 本章小结 | 第46-48页 |
| 4 基底硬度和基底表面拓扑结构共同作用对细胞EMT过程的影响 | 第48-56页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验仪器、试剂和材料 | 第48-50页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第48-49页 |
| 4.2.2 试剂和材料 | 第49-50页 |
| 4.3 实验方法和步骤 | 第50-51页 |
| 4.3.1 不同硬度基底和表面拓扑结构基底的制备 | 第50页 |
| 4.3.2 A549人肺泡上皮细胞的培养 | 第50页 |
| 4.3.3 A549细胞与硬度-表面拓扑结构的复合培养 | 第50页 |
| 4.3.4 免疫荧光染色 | 第50-51页 |
| 4.4 实验结果 | 第51-54页 |
| 4.4.1 基底硬度-表面拓扑结构对A549细胞EMT相关蛋白的表达影响 | 第51-54页 |
| 4.5 讨论和分析 | 第54页 |
| 4.6 本章小结 | 第54-56页 |
| 5 PI3K/Akt信号通路在力学微环境诱导的肺泡上皮细胞EMT中的调节作用 | 第56-64页 |
| 5.1 引言 | 第56页 |
| 5.2 实验仪器、试剂和材料 | 第56-58页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第56-57页 |
| 5.2.2 试剂和材料 | 第57-58页 |
| 5.3 实验方法和步骤 | 第58-59页 |
| 5.3.1 A549细胞与硬度-表面拓扑结构的复合培养 | 第58页 |
| 5.3.2 免疫荧光染色 | 第58-59页 |
| 5.3.3 LY294002作用时间的筛选 | 第59页 |
| 5.4 实验结果 | 第59-62页 |
| 5.4.1 不同硬度-表面拓扑结构基底对p-Akt表达的影响 | 第59-60页 |
| 5.4.2 LY294002抑制剂对EMT相关标志蛋白Vimentin和E-cadherin表达的影响 | 第60-62页 |
| 5.5 讨论和分析 | 第62-63页 |
| 5.6 本章小结 | 第63-64页 |
| 6 总结与展望 | 第64-66页 |
| 6.1 主要结论 | 第64-65页 |
| 6.2 后续工作展望 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录 | 第76页 |
| A. 作者在攻读学位期间发表的论文 | 第76页 |
| B. 作者在攻读学位期间获得的专利 | 第76页 |
