猪圆环病毒病的病原比较诊断及血清抗体间接ELISA诊断方法的建立和初步应用

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猪圆环病毒病的病原比较诊断及血清抗体间接ELISA诊断方法的建立和初步应用

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猪圆环病毒病的病原比较诊断及血清抗体间接ELISA诊断方法的建立和初步应用

论文目录
中文摘要	第1-9页
Abstract	第9-11页
第一部分文献综述	第11-21页
1、病原学研究进展	第11-14页
· 分类地位	第11页
· 理化特性	第11-12页
· 病毒基因组特征	第12页
· 细胞培养	第12-13页
· 病毒含量测定	第13页
· 病毒收获时间	第13-14页
2、PCV2相关疾病	第14-15页
· 断奶仔猪多系统衰竭综合征	第14页
· 猪皮炎与肾病综合征	第14-15页
· 仔猪先天性震颤	第15页
· 繁殖障碍	第15页
· 增生性回肠炎	第15页
· 增生性坏死性肺炎	第15页
3、流行病学	第15-16页
4、实验室诊断方法	第16-19页
· 病毒分离	第16-17页
· 病毒抗原的检测技术	第17-18页
· 聚合酶链式反应	第17页
· 核酸探针及原位杂交技术	第17-18页
· 免疫组织化学试验	第18页
· 病毒抗体的检测技术	第18-19页
· 间接免疫荧光试验	第18页
· 酶联免疫吸附实验	第18-19页
· PCV2单抗	第19页
5、防制	第19-21页
第二部分研究报告	第21-46页
一、检测PCV2-DNA的PCR方法与病毒分离符合率的比较	第21-25页
·材料	第21页
· 细胞	第21页
· 病料	第21页
· 主要试剂	第21页
· 培养基	第21页
· 分子生物学试剂	第21页
· 主要仪器	第21页
·方法	第21-23页
· 细胞培养	第21-22页
· 病料处理	第22页
· 病毒分离	第22页
· PCR鉴定	第22-23页
· 引物设计和合成	第22页
· DNA提取	第22页
· PCR反应	第22页
· 电泳检测	第22-23页
·结果	第23-24页
· 病料的PCR检测	第23页
· 病毒分离	第23页
· PCR和病毒分离的比较	第23-24页
· D(+)-氨基葡萄糖对病毒增殖的影响	第24页
·小结和讨论	第24-25页
二、检测PCV2抗体的间接ELISA方法的建立	第25-46页
·材料	第25-26页
· 病毒和细胞	第25页
· 血清和试剂盒	第25页
· 主要试剂	第25-26页
· 培养基和常规试剂	第25页
· 分子生物学试剂	第25-26页
· 主要仪器	第26页
·方法	第26-30页
· 细胞培养	第26页
· 病毒增殖	第26页
· 病毒纯化	第26-28页
· 差速离心纯化法	第26页
· 蔗糖不连续梯度离心法	第26-27页
· 氯化铯等密度离心	第27页
· 氯仿抽提结合超速离心	第27-28页
· 蛋白浓度测定	第28页
· 病毒PCR鉴定	第28页
· 间接ELISA建立及条件优化	第28-29页
· 间接ELISA操作步骤	第28页
· 最佳PCV2包被抗原的选择	第28-29页
· 全病毒抗原最适包被浓度和二抗HRP-SPA浓度的确定	第29页
· 封闭液的确定	第29页
· 封闭时间的确定	第29页
· 待检血清稀释度的确定	第29页
· HRP-SPA反应时间确定	第29页
· 间接ELISA阴阳性临界值的确定	第29页
· 间接ELISA特异性测定	第29页
· 间接ELISA重复性测定	第29-30页
· 间接ELISA与IDEXX诊断试剂盒符合率比较	第30页
· 临床血清样品检测	第30页
·结果	第30-39页
· PCV2细胞毒PCR鉴定结果	第30页
· PCV2抗原的提纯结果	第30-31页
· PCV2抗原的蛋白质浓度测定结果	第31-32页
· 包被抗原的选择	第32-33页
· 间接ELISA条件优化	第33-37页
· 全病毒抗原最适包被浓度和二抗HRP-SPA浓度的确定	第33-34页
· 封闭液的确定	第34页
· 封闭时间的确定	第34-35页
· 待检血清稀释度确定	第35页
·、HRP-SPA反应时间的确定	第35-36页
· 间接ELISA阴阳性临界值的确定	第36-37页
· 间接ELISA特异性测定	第37页
· 间接ELISA重复性测定	第37-38页
· ELISA方法与进口试剂盒符合率比较	第38-39页
· 临床血清样品的检测	第39页
·小结与讨论	第39-46页
附录	第46-49页
·细胞培养试剂	第46页
·分子生物学试剂	第46-47页
·抗原提纯试剂	第47页
·酶联免疫吸附试验试剂	第47-49页
致谢	第49页

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