论文目录 | |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语对照表 | 第8-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 研究对象 | 第12-17页 |
| 1.1.1 β-内酰胺酶 | 第12页 |
| 1.1.2 嗜水气单胞菌CphA酶 | 第12-13页 |
| 1.1.3 碳青霉烯类抗生素 | 第13-14页 |
| 1.1.4 亚胺培南 | 第14-15页 |
| 1.1.5 比阿培南 | 第15页 |
| 1.1.6 研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2 研究内容及主要方法 | 第17-23页 |
| 1.2.1 研究内容 | 第17-19页 |
| 1.2.2 离子交换层析 | 第19页 |
| 1.2.3 荧光光谱分析法 | 第19-21页 |
| 1.2.4 分子动力学 | 第21-23页 |
| 1.2.5 分子对接技术 | 第23页 |
| 1.3 研究意义 | 第23-26页 |
| 第二章 嗜水气单胞菌CphA酶的表达纯化及表征 | 第26-36页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验材料及仪器 | 第26-28页 |
| 2.2.1 菌种和填料 | 第26页 |
| 2.2.2 试剂 | 第26页 |
| 2.2.3 主要仪器和型号 | 第26-27页 |
| 2.2.4 培养基及主要试剂配制 | 第27-28页 |
| 2.3 嗜水气单胞菌CphA酶的表达纯化 | 第28-31页 |
| 2.3.1 CphA的诱导表达 | 第28-29页 |
| 2.3.2 CphA粗蛋白的分离纯化 | 第29-30页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE电泳鉴定 | 第30-31页 |
| 2.4 嗜水气单胞菌CphA酶的表征 | 第31页 |
| 2.4.1 CphA酶的荧光光谱表征 | 第31页 |
| 2.4.2 CphA酶的水解活性表征 | 第31页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第31-34页 |
| 2.5.1 粗蛋白的分离 | 第31-33页 |
| 2.5.2 CphA酶的荧光光谱表征 | 第33页 |
| 2.5.3 CphA酶水解活性表征 | 第33-34页 |
| 2.6 本章小结 | 第34-36页 |
| 第三章 嗜水气单胞菌CphA酶与碳青霉烯类抗生素之间的相互作用研究 | 第36-50页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 实验部分 | 第36-37页 |
| 3.2.1 仪器与试剂 | 第36页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第37-47页 |
| 3.3.1 低温下CphA酶对抗生素酶活的测定 | 第37-38页 |
| 3.3.2 CphA酶和抗生素结合过程中饱和比的测定 | 第38-39页 |
| 3.3.3 CphA酶与抗生素结合过程中的同步荧光光谱测定 | 第39-42页 |
| 3.3.4 CphA酶与抗生素结合过程中的荧光光谱测定 | 第42-44页 |
| 3.3.5 CphA酶与抗生素结合过程中的结合常数和结合位点数 | 第44-46页 |
| 3.3.6 CphA酶与抗生素结合过程中的热力学参数 | 第46-47页 |
| 3.4 本章小结 | 第47-50页 |
| 第四章 嗜水气单胞菌CphA酶与碳青霉烯类抗生素之间的分子识别研究 | 第50-58页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 实验部分 | 第50-51页 |
| 4.2.1 分子动力学模拟体系的建立 | 第50-51页 |
| 4.2.2 分子对接 | 第51页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第51-57页 |
| 4.3.1 CphA分子中氨基酸残基的波动性 | 第51页 |
| 4.3.2 CphA酶与IMP结合过程的分子对接 | 第51-53页 |
| 4.3.3 CphA酶与BIA结合过程的分子对接 | 第53-55页 |
| 4.3.4 CphA酶的构象变化 | 第55-56页 |
| 4.3.5 分子对接中能量大小比较 | 第56-57页 |
| 4.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 结论与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 攻读博士/硕士学位期间取得的科研成果 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
