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葡萄果实MybPA1、MybPA2克隆及其表达规律研究

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葡萄果实MybPA1、MybPA2克隆及其表达规律研究
论文目录
 
摘要第1-9页
缩略表第9-10页
· 引言第10-18页
  · 黄烷-3-醇的结构、分类与命名第10-11页
  · 原花色素的结构、分类与命名第11-13页
  · 花色苷的结构和种类第13页
  · 黄烷-3-醇、原花色素以及花色苷的合成与特性第13-15页
    · 生物合成途径第13-14页
    · 理化性质第14-15页
  · MYB转录因子概况第15-16页
  · 实验研究的目的与意义第16-18页
· 材料与方法第18-31页
  · 试验材料第18页
  · 试验仪器第18页
  · 生物化学试剂第18-19页
  · 试剂配制第19页
  · 试验方法第19-30页
    · 葡萄果实总RNA的提取与纯化第19-21页
    · RT-PCR扩增mybPAl以及mybPA2基因第21-22页
    · DNA片段的回收纯化第22页
    · 克隆载体pMD-mybPAl以及pMD-mybPA2的构建与转化第22-23页
    · 重组质粒的测序鉴定第23页
    · 构建表达载体第23-25页
    · MYBPA1和MYBPA2融合蛋白表达第25页
    · SDS-PAGE电泳第25页
    · MYBPA1以及MYBPA2融合蛋白的纯化第25-26页
    · 免疫新西兰白兔第26页
    · 检测抗体第26页
    · 测定多酚类物质的含量第26-27页
    · 蛋白质提取和Western blotting分析第27-28页
    · 实时荧光定量PCR第28-30页
  · 数据分析第30-31页
· 结果与分析第31-58页
  · 提取、反转录葡萄果实总RNA第31页
  · MYBPA1、MYBPA2基因的RT-PCR扩增第31-32页
  · 重组质粒PMD-MYBPA1、PMD-MYBPA2的鉴定第32-33页
    · PCR法快速鉴定重组质粒第32-33页
    · mybPA1、mybPA2基因测序结果与分析第33页
  · 重组质粒PET-MYBPA1以及PET-MYBPA2的鉴定第33-34页
    · PCR快速检测法第33页
    · 表达载体重组质粒的基因测序结果与分析第33-34页
  · MYBPA1、MYBPA2蛋白理化性质分析第34页
  · MYBPA1、MYBPA2蛋白跨膜区与信号肽分析第34-36页
  · MYBPA1、MYBPA2蛋白在大肠杆菌BL21中的表达第36-40页
    · pET-mybPA1、pET-mybPA2生长曲线第36-37页
    · MYBPA1、MYBPA2蛋白表达条件的优化第37-40页
  · MYBPA1以及MYBPA2重组蛋白的纯化第40-41页
  · 抗体效价检测第41页
  · 两种酿酒葡萄各多酚物质含量的变化规律第41-44页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中黄烷醇类多酚含量的变化规律第41-42页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中黄烷-3-醇含量的变化规律第42页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中花色苷含量的变化规律第42-43页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中原花色素含量的变化规律第43-44页
  · 赤霞珠和霞多丽各组织发育过程中MYBPA1、MYBPA2蛋白含量的变化规律第44-47页
    · 赤霞珠各组织中MYBPA1、MYBPA2蛋白含量的变化规律第44-45页
    · 赤霞珠和霞多丽果实发育过程中MYBPA1蛋白含量的变化第45-46页
    · 赤霞珠和霞多丽果实发育过程中MYBPA2蛋白含量的变化第46-47页
  · 赤霞珠和霞多丽果实中MYBPA1以及MYBPA2基因的表达规律第47-48页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中MybPA1基因的表达规律第47页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中MybPA2基因的表达规律第47-48页
  · 赤霞珠和霞多丽果实中类黄酮类物质合成相关酶ANR、ANS、DFR、LAR1和LAR2的表达规律第48-52页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中ANR的表达规律第48-49页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中ANS的表达规律第49-50页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中DFR的表达规律第50页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中LAR1的表达规律第50-51页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中LAR2的表达规律第51-52页
  · 相关性分析第52-58页
    · 黄烷醇类多酚、原花色素、黄烷-3-醇以及花色苷(赤霞珠)含量的相关性第52-53页
    · 黄烷醇类多酚、原花色素、黄烷-3-醇以及花色苷(赤霞珠)与ANR、ANS、DFR、LAR1以及LAR2等基因的相关性第53-54页
    · mybPA1基因、MYBPA1蛋白、mybPA2基因以及MYBPA2蛋白的表达与黄烷醇类多酚、原花色素、黄烷-3-醇以及花色苷(赤霞珠)含量的相关性第54-55页
    · mybPA1基因、MYBPA1蛋白、mybPA2基因以及MYBPA2蛋白的表达与ANR、ANS、DFR、LAR1以及LAR2的相关性第55-57页
    · 赤霞珠和霞多丽果实中MYBPA1蛋白、MYBPA2蛋白、mybPA1基因以及mybPA2基因间的相关性第57-58页
· 讨论第58-60页
· 结论第60-61页
参考文献第61-68页
Abstract第68-70页
致谢第70-72页
附录第72-82页

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