论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
目录 | 第10-14页 |
第一章 绪论 | 第14-31页 |
· 全细胞催化反应 | 第14-16页 |
· 全细胞催化 | 第14页 |
· 全细胞催化剂来源及其形式 | 第14-15页 |
· 全细胞生物转化的研究现状 | 第15-16页 |
· 微生物脂肪酶 | 第16-22页 |
· 脂肪酶简介 | 第16-17页 |
· 微生物脂肪酶的种类 | 第17-18页 |
· 脂肪酶的活性表征 | 第18-19页 |
· 微生物脂肪酶的分离纯化方法 | 第19-22页 |
· 全细胞连接脂肪酶的研究进展 | 第22-27页 |
· 酶在细胞中定位的方法 | 第22-25页 |
· 全细胞连接酶在细胞中定位的研究进展 | 第25-27页 |
· 本论文的立题意义与主要研究内容 | 第27-31页 |
· 本论文的研究目的与意义 | 第27-29页 |
· 本论文的主要研究内容 | 第29-31页 |
第二章 具有催化核苷酰化反应活性的脂肪酶在微生物细胞中的定位 | 第31-50页 |
· 材料 | 第32页 |
· 菌种 | 第32页 |
· 主要试剂 | 第32页 |
· 主要仪器设备 | 第32-33页 |
· 实验方法 | 第33-37页 |
· 菌种保藏、接种及菌体收集 | 第33页 |
· 细胞组分的制备 | 第33-34页 |
· 米曲霉微观形态观察 | 第34页 |
· 微生物全细胞及细胞各组分催化阿糖胞苷酰化反应 | 第34页 |
· 高效液相色谱(HPLC)分析阿糖胞苷乙酰化结果 | 第34-35页 |
· 底物转化率、区域选择性的计算 | 第35页 |
· 米曲霉脂肪酶活力的测定方法 | 第35-36页 |
· 米曲霉蛋白酶活力的测定方法 | 第36页 |
2.3.9 粗酶蛋白 SDS-PAGE 检测 | 第36-37页 |
· 结果与讨论 | 第37-48页 |
2.4.1 米曲霉细胞超声波破碎效果的 SEM 分析 | 第37-38页 |
· 米曲霉细胞不同组分催化阿糖胞苷酰化反应的研究 | 第38-39页 |
· 反应时间对米曲霉不同细胞组分催化酰化反应的影响 | 第39-41页 |
2.4.4 米曲霉细胞各组分蛋白的 SDS-PAGE 图谱 | 第41-42页 |
· 米曲霉细胞各组分脂肪酶水解活力的研究 | 第42-43页 |
· 米曲霉细胞各组分脂肪酶合成活力及催化效率的研究 | 第43-45页 |
· 米曲霉细胞各组分具有合成活力脂肪酶的生产模式 | 第45-46页 |
· 米曲霉细胞各组分脂肪酶的区域选择性分析 | 第46-47页 |
· 蛋白酶水解活力在米曲霉细胞各组分中随时间变化情况 | 第47-48页 |
· 本章小结 | 第48-50页 |
第三章 米曲霉细胞中可催化阿糖胞苷酰化反应的脂肪酶诱导合成机制的研究 | 第50-63页 |
· 实验材料 | 第51页 |
· 菌种 | 第51页 |
· 主要试剂 | 第51页 |
· 主要仪器设备 | 第51页 |
· 实验方法 | 第51-52页 |
· 不同表面活性剂作为碳源诱导剂时对脂肪酶合成活力分布的影响 | 第51页 |
· 生长及碳源对米曲霉脂肪酶合成影响的研究 | 第51-52页 |
· 米曲霉全细胞胞内反应底物/产物运送机制的研究 | 第52页 |
· 扫描电镜检测反应时微生物微观形态的变化 | 第52页 |
· 结果与讨论 | 第52-61页 |
· 不同表面活性剂作为碳源诱导剂时对脂肪酶合成活力分布的影响 | 第52-54页 |
· 生长及碳源对米曲霉脂肪酶合成影响的研究 | 第54-57页 |
· 米曲霉全细胞胞内反应底物/产物运送机制的分析 | 第57-60页 |
· 丙酮处理及在反应体系中米曲霉菌丝的形态变化 | 第60-61页 |
· 本章小结 | 第61-63页 |
第四章 米曲霉中具有催化核苷酰化反应活性脂肪酶分子的鉴定 | 第63-78页 |
· 材料 | 第63-64页 |
· 菌种 | 第63-64页 |
· 主要试剂 | 第64页 |
· 主要仪器设备 | 第64页 |
· 实验方法 | 第64-66页 |
4.3.1 米曲霉各组分蛋白质的 SDS-PAGE 分析 | 第64页 |
4.3.2 米曲霉在不同碳源作为诱导剂时 SDS-PAGE 图谱检测 | 第64页 |
· 酶合成活力的检测 | 第64页 |
· 酶水解活力的检测 | 第64页 |
· 蛋白含量检测 | 第64-65页 |
· 米曲霉脂肪酶的提取与纯化 | 第65页 |
· 催化阿糖胞苷酰化反应脂肪酶的质谱鉴定 | 第65-66页 |
· 结果与讨论 | 第66-76页 |
4.4.1 添加吐温 80 和葡萄糖培养时米曲霉脂肪酶蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第66-69页 |
4.4.2 碳源诱导剂种类不同时米曲霉脂肪酶表达量的 SDS-PAGE 检测 | 第69-70页 |
4.4.3 米曲霉催化 ara-C 酰化反应脂肪酶表达随时间变化情况 | 第70-72页 |
· 米曲霉脂肪酶的分离纯化结果 | 第72-75页 |
· 米曲霉中具有催化核苷酰化反应活性的脂肪酶蛋白的鉴定 | 第75-76页 |
4.4.6 具有催化 ara-C 酰化反应脂肪酶抗体的制备 | 第76页 |
· 本章小结 | 第76-78页 |
主要结论与展望 | 第78-82页 |
主要研究结论 | 第78-80页 |
论文创新点 | 第80页 |
研究展望 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-94页 |
附录 | 第94-99页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第99-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
附件 | 第101
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