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苏云金芽胞杆菌HBF-18菌株毒力相关基因的克隆与活性研究

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苏云金芽胞杆菌HBF-18菌株毒力相关基因的克隆与活性研究
论文目录
 
摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 绪论第15-35页
  · 苏云金芽胞杆菌及其作为生防微生物研究历史第15-16页
  · 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白分类及杀虫活性第16-17页
  · cry 基因的鉴定第17-18页
  · 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的结构及功能第18-21页
    · DomainⅠ第19-20页
    · DomainⅡ第20页
    · Domain Ⅲ第20-21页
  · 杀虫晶体蛋白的作用机制第21-23页
    · Bravo 模型第21-22页
    · Zhang 模型第22-23页
    · Jurat-Fuentes 模型第23页
  · 营养期杀虫蛋白(Vegetative insecticidal proteins ,VIPs)第23-25页
    · 营养期杀虫蛋白分类及杀虫活性第24页
    · Vip 蛋白的结构、功能及作用机理第24-25页
  · 苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白的应用及局限性第25-29页
    · 苏云金芽胞杆菌的应用第25-28页
    · 苏云金芽胞杆菌应用的局限性第28-29页
  · 苏云金芽胞杆菌的增效途径第29-31页
  · 蛴螬及其危害现状第31页
  · 苏云金芽胞杆菌与蛴螬防治第31-32页
  · 本研究的立题依据、研究内容和目的意义第32-35页
    · 立题依据第32-34页
    · 研究内容第34页
    · 目的意义第34-35页
第二章 材料与方法第35-50页
  · 实验材料第35-38页
    · 实验所用菌株和质粒第35-36页
    · 试剂第36-38页
    · 供试昆虫第38页
    · 所用仪器型号第38页
  · 研究方法第38-50页
    · Bt 基因组的提取第38-39页
    · 大肠杆菌质粒 DNA 的提取第39页
    · 获得 HBF-18 基因组 DNA 序列第39页
    · 获得新杀虫蛋白基因-基因推测第39-40页
    · 新基因的序列分析第40页
    · RNA 的提取与纯化第40页
    · RT-PCR第40-41页
    · 新基因在大肠杆菌中的克隆第41-45页
    · 新基因在大肠杆菌中的表达研究第45-46页
    · 新基因在苏云金芽胞杆菌无晶体突变株中的表达第46-48页
    · Bt 菌株杀虫活性的测定第48-49页
    · 生测数据处理与分析第49-50页
第三章 结果与分析第50-71页
  · 获得新的杀虫蛋白基因序列第50页
  · 序列分析第50-54页
    · cry8 -like 基因序列分析第50-52页
    · vip1,vip2 基因序列分析第52页
    · Vip1,Vip2 蛋白信号肽预测第52-53页
    · 新基因在 HBF-18 菌株中的转录分析第53-54页
  · 新基因在大肠杆菌中的克隆及表达第54-59页
    · 新基因的 PCR 扩增第54-55页
    · 新基因异源表达载体的构建第55-57页
    · 新基因在大肠杆菌中的表达第57-59页
  · 新基因在苏云金芽胞杆菌无晶体突变株中的表达第59-63页
    · 新基因在大肠杆菌中的克隆第59-61页
    · 工程菌电镜照片第61-62页
    · Cry 蛋白的提取及检测第62页
    · 硫酸铵沉淀法提取 Vip1、Vip2 分泌蛋白第62-63页
  · 新基因的序列及分析第63-65页
  · 杀虫活性测定结果第65-68页
    · Cry8 对铜绿丽金龟生物活性初筛结果第65页
    · Cry8 对小菜蛾生物活性初筛结果第65页
    · 不同重组菌株及组合对暗黑鳃金龟生物活性测定结果及分析第65-68页
  · 讨论第68-71页
第四章 结论第71-72页
参考文献第72-83页
致谢第83-85页
作者简历第85页

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