论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-23页 |
| 1.1 河豚鱼 | 第11-13页 |
| 1.1.1 河豚鱼概况 | 第11-12页 |
| 1.1.2 河豚鱼的营养价值及药用价值 | 第12-13页 |
| 1.2 肠道菌群 | 第13-15页 |
| 1.2.1 肠道菌群的作用 | 第13-14页 |
| 1.2.2 肠道菌群的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.3 菌群多样性的研究方法 | 第15-21页 |
| 1.3.1 细菌常规鉴定法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 16S rDNA基因技术 | 第16-17页 |
| 1.3.3 限制性片段长度多态性(RFLP)分析技术 | 第17页 |
| 1.3.4 聚合酶链式反应(PCR)技术 | 第17-20页 |
| 1.3.4.1 PCR反应的基本原理 | 第18-19页 |
| 1.3.4.2 PCR反应的影响因素 | 第19-20页 |
| 1.3.5 基因克隆技术 | 第20-21页 |
| 1.4 本论文的研究内容与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 养殖河豚鱼肠道可培养细菌的筛选与鉴定 | 第23-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验样品 | 第23页 |
| 2.1.2 主要培养基 | 第23页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 实验工具及样品的前期准备 | 第25页 |
| 2.2.2 细菌的分离纯化 | 第25页 |
| 2.2.3 细菌的鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.3.1 细菌的形态检测 | 第25页 |
| 2.2.3.2 模板DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.3.3 16S rDNA的PCR扩增 | 第26页 |
| 2.2.3.4 16S rDNA的序列分析 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第27-30页 |
| 2.3.1 肠道细菌分离纯化结果 | 第27页 |
| 2.3.2 河豚鱼肠道细菌镜检结果 | 第27-28页 |
| 2.3.2.1 河豚鱼肠道可培养细菌的镜检结果 | 第27-28页 |
| 2.3.3 革兰氏染色结果 | 第28页 |
| 2.3.4 细菌总DNA的提取 | 第28页 |
| 2.3.5 16S rDNA的测序结果 | 第28-30页 |
| 第三章 16S rDNA克隆文库法分析养殖河豚鱼肠道细菌多样性 | 第30-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-32页 |
| 3.1.1 实验样品 | 第30页 |
| 3.1.2 主要培养基 | 第30-31页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第31-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-38页 |
| 3.2.1 样品的处理 | 第32-33页 |
| 3.2.2 河豚鱼肠道细菌总DNA的提取 | 第33页 |
| 3.2.3 DNA模板的检测 | 第33-34页 |
| 3.2.4 16S rDNA片段的PCR扩增 | 第34页 |
| 3.2.5 PCR产物的回收纯化 | 第34-35页 |
| 3.2.6 构建细菌16S rDNA克隆文库 | 第35-38页 |
| 3.2.6.1 回收纯化PCR产物与pMD19-T载体的连接 | 第35-36页 |
| 3.2.6.2 转化 | 第36-37页 |
| 3.2.6.3 阳性克隆子的筛选 | 第37-38页 |
| 3.2.6.4 限制性片段长度多态性(RFLP)分析及克隆文库覆盖率检测 | 第38页 |
| 3.2.7 细菌16S rDNA片段测序及菌种鉴定 | 第38页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第38-47页 |
| 3.3.1 细菌基因组DNA提取和16S rDNA片段的PCR扩增 | 第38-40页 |
| 3.3.2 构建细菌16S rDNA克隆文库及覆盖率 | 第40-43页 |
| 3.3.3 细菌16S rDNA基因序列分析 | 第43-46页 |
| 3.3.4 测序结果的序列系统发育树分析 | 第46-47页 |
| 第四章 结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
