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PEDV变异株S、M蛋白原核表达及分泌抗S蛋白单抗杂交瘤细胞株的建立

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PEDV变异株S、M蛋白原核表达及分泌抗S蛋白单抗杂交瘤细胞株的建立
论文目录
 
致谢第1-8页
中文摘要第8-10页
1 文献综述第10-20页
  · 猪流行性腹泻研究进展第10-18页
  · 单克隆抗体技术及应用第18-20页
2 引言第20-21页
3 材料与方法第21-34页
  · 材料第21-22页
    · 质粒、表达载体、菌株第21页
    · 实验动物第21页
    · 细胞与病毒第21页
    · 主要试剂第21-22页
    · 主要仪器设备第22页
  · 试验方法第22-34页
    · 抗原的制备第22-24页
    · 动物免疫第24-25页
    · PEDV全病毒作包被抗原的间接ELISA检测方法的建立第25-27页
    · PEDV重组M蛋白作包被抗原的间接ELISA检测方法的建立第27页
    · 单克隆抗体的制备第27-30页
    · 单克隆抗体的扩大培养第30页
    · 单抗腹水的提纯第30页
    · 抗重组PEDV S蛋白单克隆抗体的部分性状鉴定第30-32页
    · 单抗介导双夹心间接ELISA检测PEDV方法的建立第32-34页
4 结果与分析第34-53页
  · 抗原制备第34-38页
    · PEDV重组S蛋白的成功制备第34-35页
    · 成功获得PEDV重组M蛋白第35-38页
    · 对PEDV全病毒的RT-PCR鉴定第38页
    · 制备抗原的蛋白总含量第38页
  · 检测抗体间接ELISA方法的确定第38-45页
    · PEDV全病毒抗原包被ELISA方法最佳工作条件第38-39页
    · PEDV重组M蛋白包被ELISA方法最佳工作条件第39-40页
    · 间接ELISA方法最佳反应条件第40-43页
    · 间接ELISA的特异性可靠第43页
    · 批内重复性良好第43-44页
    · 批间重复性良好第44页
    · PEDV全病毒作包被抗原间接ELISA检测方法的确定第44-45页
    · PEDV重组M蛋白作包被抗原间接ELISA检测方法的确定第45页
  · 阳性杂交瘤细胞株的获得第45-46页
    · 免疫小鼠抗体效价的测定第45页
    · 细胞融合和筛选第45-46页
  · 抗PEDV S蛋白单克隆抗体的部分性状第46-51页
    · 杂交瘤细胞培养上清液及腹水效价第46-47页
    · 杂交瘤细胞稳定性检测结果第47页
    · 腹水中蛋白含量第47页
    · 单克隆抗体特异性鉴定结果第47-48页
    · 单抗分子类型第48页
    · 间接ELISA反应第48-49页
    · Western blot反应第49页
    · 单抗相对亲和力第49-50页
    · 间接免疫荧光试验结果第50页
    ·单抗中和活性第50-51页
  · 单抗介导双夹心间接ELISA方法建立未获成功第51-53页
    · 双夹心间接ELISA方法中高免血清与单抗最佳稀释度第51-52页
    · 叠加ELISA试验第52-53页
5 小结与讨论第53-62页
  · PEDV M蛋白的表达与纯化第53页
  · 免疫抗原及筛选抗原的制备第53-54页
  · 动物免疫第54-55页
  · 细胞融合第55-56页
  · 饲养层细胞的制备第56页
  · 免疫小鼠效价的测定及杂交瘤细胞的筛选第56-57页
    · 间接ELISA检测方法第56页
    · 检测和筛选中时机的把握第56-57页
  · 杂交瘤细胞的亚克、冻存与复苏培养第57-58页
  · 细胞污染问题第58-59页
  · 杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定第59页
  · 单抗的大量生产和应用第59-62页
全文小结第62-63页
参考文献第63-71页
ABSTRACT第71-74页
附:作者读研期间发表文章第74页

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