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兔骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛细胞的研究

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兔骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛细胞的研究
论文目录
 
致谢第1-9页
摘要第9-11页
文献综述第11-18页
  1 骨髓间充质干细胞的研究进展第12-15页
    · BMSCs的发现和分布第12页
    · BMSCs的生物学特性第12-13页
    · BMSCs的分离方法第13页
    · BMSCs定向分化的机制第13-14页
    · BMSCs的应用前景第14-15页
  2 BMSCs向胰岛细胞分化的研究进展第15-18页
    · BMSCs向胰岛细胞定向诱导分化方法的研究第15-17页
      · 诱导剂法第15-16页
      · 转录因子调控法第16-17页
      · 共培养法第17页
    · BMSCs胰岛样分化在临床上的应用第17-18页
试验一 不同分离方法及首次换液时间对兔骨髓间充质干细胞生物活性的影响第18-27页
  引言第18页
  1 材料与方法第18-21页
    · 试验材料第18-19页
      · 主要试剂第18页
      · 主要仪器与器材第18-19页
    · 试剂的配制第19-20页
      · PBS缓冲液配制第19页
      · 0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化液第19页
      · 双抗配制第19页
      · FBS的冻融第19页
      · DMEM/F-12完全培养基第19页
      · 台盼蓝染色液第19-20页
    · 试验方法第20-21页
      · BMSCs的提取第20页
      · 全骨髓贴壁法第20页
      · 红细胞裂解法第20页
      · 兔BMSCs细胞活性检测第20页
      · 兔BMSCs生长曲线的绘制第20-21页
      · 首次换液时间对兔BMSCs的影响第21页
      · 细胞免疫组化鉴定兔BMSCs第21页
      · 统计学处理第21页
  2 结果与分析第21-24页
    · 不同分离方法对兔BMSCs形态和生长的影响第21-23页
    · 兔BMSCs生长曲线绘制第23-24页
    · 兔BMSCs的鉴定第24页
    · 首次换液时间对兔BMSCs培养周期的影响第24页
  3 讨论第24-26页
  4 小结第26-27页
试验二 兔骨髓间充质干细胞体外诱导分化为胰岛细胞的动态变化的研究第27-39页
  引言第27页
  1 材料第27-29页
    · 试验材料第27-28页
      · 试验对象第27页
      · 主要试剂第27-28页
      · 主要仪器与器械第28页
    · 主要试剂配制第28-29页
      · 生长因子(bFGF,EGF,activin-A,HGF)配制为 1μg/mL第28页
      · 配制 1mol/L HEPES第28页
      · 不同浓度(0.23mol/L,0.175mol/L,0.111 mol/L)葡萄糖的配制第28-29页
      · 第一阶段的诱导剂第29页
      · 第二阶段的诱导剂第29页
      · 第三阶段的诱导剂第29页
      · 双硫腙染色剂第29页
      · 0.2%TritonX-100第29页
      · DAB显色液第29页
  2 试验方法第29-33页
    · 体外定向诱导分化第29-30页
    · 双硫腙染色第30页
    · RT-PCR检测胰岛细胞特异性基因的表达第30-32页
      · 细胞总RNA的提取第30-31页
      · 反转录合成c DNA第31页
      · PCR反应第31-32页
      · 琼脂糖凝胶电泳第32页
    · 免疫组织化学染色第32页
    · ELISA检测第32-33页
    · 数据处理第33页
  3 结果与分析第33-37页
    · 诱导分化过程中细胞的形态学变化第33-34页
    · DTZ染色鉴定结果第34页
    · RT-PCR检测胰岛细胞特异性基因表达第34-35页
    · 免疫细胞化学检测结果第35-36页
    · ELISA检测结果第36-37页
  4 讨论第37-38页
  5 小结第38-39页
结论第39-40页
参考文献第40-49页
英文缩写词表第49-50页
ABSTACT第50-51页

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