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猪IFITM3基因PiggyBac载体构建及其在PK15细胞中的表达
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猪IFITM3基因PiggyBac载体构建及其在PK15细胞中的表达
论文目录
 
致谢第1-7页
摘要第7-8页
1 文献综述第8-15页
　　· 干扰素诱导跨膜蛋白3基因第8-11页
　　　　· IFITM基因家族第8-9页
　　　　· IFITM基因家族的生物活性第9-10页
　　　　· 猪IFITM3基因第10-11页
　　· Piggy Bac转座子第11-12页
　　· LPS/TLR4信号通路第12-13页
　　· 展望第13-15页
2 引言第15-16页
3 材料与方法第16-30页
　　· 试验材料第16页
　　· 试剂第16页
　　· 仪器第16页
　　· 试剂配制第16-18页
　　　　· 核酸电泳试剂第16页
　　　　· 蛋白电泳试剂第16-17页
　　　　· Western Blot试剂第17页
　　　　· 其他试剂配制第17-18页
　　· 猪IFITM3基因的克隆及组织分布第18-21页
　　　　· 猪IFITM3基因克隆第18-21页
　　　　· 组织分布第21页
　　· 猪IFITM3基因原核表达第21-24页
　　　　· 猪IFITM3基因扩增和鉴定第21-22页
　　　　· 酶切产物纯化第22页
　　　　· T4 DNA连接酶连接反应第22页
　　　　· 阳性克隆菌的筛选与鉴定第22页
　　　　· IFITM3基因在大肠杆菌中诱导表达第22-23页
　　　　· 融合表达产物的可溶性鉴定第23页
　　　　· Western Blot分析第23-24页
　　· 真核表达载体PB-IFITM3构建第24-26页
　　　　· 引物设计及目的基因扩增第24页
　　　　· PCR产物胶回收第24页
　　　　· PB载体和胶回收产物双酶切第24-25页
　　　　· 酶切产物纯化第25页
　　　　· T4 DNA连接酶连接反应第25页
　　　　· 连接反应产物转化感受态细胞第25页
　　　　· PB-IFITM3鉴定第25-26页
　　　　· 质粒中提第26页
　　· PB-IFITM3载体在PK15细胞中的表达第26-30页
　　　　· 稳定细胞系筛选第26页
　　　　· IFITM3基因过表达检测第26-28页
　　　　· 猪IFITM3基因过表达对 LPS/TLR4 信号通路的影响第28-30页
4 结果与分析第30-40页
　　· 猪IFITM3基因的克隆与组织分布第30-31页
　　　　· 猪IFITM3基因克隆第30-31页
　　　　· 组织分布第31页
　　· 猪IFITM3基因原核表达第31-34页
　　　　· p MD19-IFITM3载体(Sal I、Not I)构建第31-32页
　　　　· p ET-21b-IFITM3重组载体构建第32-33页
　　　　· 猪IFITM3基因的诱导表达第33-34页
　　· 真核表达载体PB-IFITM3构建第34-35页
　　· IFITM3在PK15细胞中的表达第35-40页
　　　　· 稳定细胞系筛选第35-36页
　　　　· IFITM3基因过表达第36页
　　　　· IFITM3基因对LPS/TLR4信号通路的影响第36-40页
5 结论与讨论第40-43页
　　· 讨论第40-41页
　　　　· 猪IFITM3基因克隆、组织分布与原核表达第40页
　　　　· 真核表达载体PB-IFITM3的应用第40-41页
　　　　· 猪IFITM3基因在PK15细胞的表达第41页
　　· 结论第41-43页
参考文献第43-48页
英文摘要第48-49页

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