论文目录 | |
摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-30页 |
· 流感病毒概述 | 第16-23页 |
· 病毒简介 | 第16页 |
· 病毒结构及复制 | 第16-19页 |
· 病理变化 | 第19页 |
· 病毒致病机制 | 第19-20页 |
· 流感病毒与机体免疫 | 第20-22页 |
· 病毒 NP 蛋白结构和功能 | 第22-23页 |
· p53 蛋白研究概况 | 第23-28页 |
· p53 及其结构 | 第23-24页 |
· p53 与细胞凋亡 | 第24页 |
· p53 与细胞周期 | 第24-25页 |
· p53 的作用机制 | 第25-26页 |
· p53 与机体免疫 | 第26-27页 |
· p53 与炎症反应 | 第27-28页 |
· p53 蛋白抗病毒研究进展 | 第28-30页 |
· p53 抗病毒作用的确立 | 第28-29页 |
· p53 与流感病毒关系 | 第29-30页 |
第二章 流感病毒 NP 蛋白激活 p53 生物学意义 | 第30-44页 |
· 材料 | 第30-31页 |
· 质粒、菌株、毒株和细胞株 | 第30页 |
· 主要试剂 | 第30-31页 |
· 方法 | 第31-34页 |
· p53 荧光素酶活性检测 | 第31页 |
· 间接免疫荧光实验 | 第31-32页 |
· 双荧光分子互补实验(BIFC)质粒构建 | 第32页 |
· Western-blot | 第32-33页 |
· 免疫共沉淀(Co-ip) | 第33-34页 |
· 双分子荧光互补实验(BIFC) | 第34页 |
· TUNEL 法检测细胞凋亡 | 第34页 |
· Annexin V 试剂盒检测细胞凋亡 | 第34页 |
· PI 法检测细胞周期 | 第34页 |
· 实验结果及分析 | 第34-43页 |
· NP 激活 p53 转录活性 | 第34-35页 |
· NP 和 p53 在细胞内定位分析 | 第35-36页 |
· CO-ip 检测 NP 蛋白和 p53 相互作用 | 第36-37页 |
· BIFC 检测 NP 和 p53 相互作用 | 第37-40页 |
· NP 对 p53 及下游常见靶基因蛋白表达水平的影响 | 第40页 |
· TUNEL 检测细胞凋亡情况 | 第40-41页 |
· FCM 检测 NP 与细胞凋亡 | 第41-42页 |
· NP 与细胞周期变化分析 | 第42-43页 |
· 讨论 | 第43-44页 |
第三章 p53 在流感病毒致病性中的作用 | 第44-57页 |
· 材料 | 第45-46页 |
· 病毒及实验动物 | 第45-46页 |
· 主要试剂 | 第46页 |
· 方法 | 第46-50页 |
· 小鼠 p53 基因型检测 | 第46页 |
· IAV 病毒滴度测定 | 第46-47页 |
· IAV 对 p53 KO 小鼠致病性实验 | 第47-48页 |
· IAV 在小鼠体内复制水平检测 | 第48页 |
· 小鼠肺组织病理变化观察及病理组织切片制备 | 第48-49页 |
· Western-blot 筛选检测流感病毒蛋白抗体 | 第49页 |
· 免疫组化切片制备 | 第49-50页 |
· 小鼠脾细胞采集及免疫细胞分型检测 | 第50页 |
· 结果 | 第50-56页 |
· 小鼠 p53 基因型检测及分析 | 第50-51页 |
· 病毒滴度测定结果 | 第51页 |
· IAV 对 p53KO 小鼠致死率增加 | 第51-52页 |
· p53 抑制 IAV 在小鼠体内的复制 | 第52-53页 |
· IAV 感染 p53KO 小鼠引起更严重的病理变化 | 第53-54页 |
· 检测 IAV 抗体的筛选 | 第54-55页 |
· IAV 在肺组织中的分布 | 第55页 |
· IAV 感染 p53KO 小鼠对体内免疫细胞增殖的影响 | 第55-56页 |
· 讨论 | 第56-57页 |
第四章 IAV 感染小鼠肺组织的全基因表达谱差异分析 | 第57-72页 |
· 材料 | 第57页 |
· 毒株及实验动物 | 第57页 |
· 实验试剂 | 第57页 |
· 方法 | 第57-59页 |
· 小鼠肺组织全基因组表达谱分析 | 第57-58页 |
· 定量 real-time PCR | 第58页 |
· p53 靶基因预测及筛选 | 第58-59页 |
· 结果 | 第59-71页 |
· 小鼠全基因组表达谱差异基因分析 | 第59-60页 |
· IAV 感染 p53WT 小鼠差异表达基因分析 | 第60-61页 |
· IAV 感染 p53WT 和 p53KO 小鼠差异表达基因分析 | 第61-65页 |
· IAV 感染 p53WT 和 p53KO 小鼠 TLRs 信号通路差异基因变化分析 | 第65-71页 |
· 讨论 | 第71-72页 |
第五章 全文总结 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
作者简历 | 第81页 |