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产耐热α-葡萄糖苷酶重组大肠杆菌的构建及发酵条件优化研究

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产耐热α-葡萄糖苷酶重组大肠杆菌的构建及发酵条件优化研究
论文目录
 
摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
1 绪论第10-22页
  · 引言第10页
  · α-葡萄糖苷酶的理化性质第10-11页
  · α-葡萄糖苷酶的来源第11页
  · α-葡萄糖苷酶在细胞中的分布第11-12页
  · α-葡萄糖苷酶的应用第12-17页
    · α-葡萄糖苷酶的生物学功能第12页
    · 低聚异麦芽糖第12-16页
    · α-葡萄糖苷酶在啤酒酿造中的应用第16页
    · α-葡萄糖苷酶的其它应用第16-17页
  · α-葡萄糖苷酶的研究现状第17页
  · 耐热酶的特性第17-18页
  · α-葡萄糖苷酶的的克隆与表达第18-19页
    · 大肠杆菌表达系统第18-19页
    · 质粒表达载体第19页
    · 表达宿主菌第19页
  · α-葡萄糖苷酶检测方法第19-20页
  · 研究目的和意义第20-21页
  · 主要研究内容第21-22页
2 材料与方法第22-34页
  · 材料第22-25页
    · 菌种第22页
    · 载体第22页
    · 试剂第22-23页
    · 主要仪器第23-24页
    · 主要溶剂及其配制第24页
    · 培养基第24页
    · 培养方法第24-25页
  · 实验方法第25-34页
    · PCR 引物设计第25页
    · PCR 扩增α-糖苷酶基因第25-26页
    · 琼脂糖凝胶电泳和片段回收第26-27页
    · pET28α(+)质粒的提取第27页
    · 质粒与目的基因用限制性内切酶双酶切第27-28页
    · 连接反应第28页
    · α-糖苷酶基因的表达基因的诱导表达第28-29页
    · 酶活测定第29-31页
    · 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析第31-34页
3 重组大肠杆菌的构建第34-48页
  · 引言第34页
  · PCR 扩增α-糖苷酶基因第34-35页
  · 双酶切第35-36页
  · 酶切回收第36-37页
  · 菌落总DNA 提取电泳第37-38页
  · 重组质粒提取第38-39页
  · Hind Ⅲ单酶切第39-40页
  · 酶活检测第40-41页
  · SDS-PAGE 电泳分析第41-42页
  · α-葡萄糖苷酶基因序列分析第42-44页
  · α-葡萄糖苷酶酶学性质的研究第44-46页
    · α-葡萄糖苷酶的最适pH第44页
    · α-葡萄糖苷酶的pH 稳定性第44-45页
    · α-葡萄糖苷酶的最适温度第45页
    · α-葡萄糖苷酶的热稳定性第45-46页
  · 本章小结第46-48页
4 重组菌产酶条件的的研究第48-54页
  · 引言第48页
  · 碳源种类对α-葡萄糖苷酶合成的影响第48-49页
  · 接种量对α-葡萄糖苷酶合成的影响第49页
  · 金属离子对α-葡萄糖苷酶合成的影响第49-50页
  · IPTG 添加时间对α-葡萄糖苷酶合成的影响第50-51页
  · 诱导时间对α-葡萄糖苷酶合成的影响第51页
  · 重组菌产酶条件的正交设计第51-53页
  · 本章小结第53-54页
5 结论与展望第54-56页
  · 结论第54-55页
  · 展望第55-56页
参考文献第56-59页
致谢第59-60页
攻读学位期间发表的学术论文第60-62页

本篇论文共62页,点击这进入下载页面
 
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