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产耐热α-葡萄糖苷酶重组大肠杆菌的构建及发酵条件优化研究
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产耐热α-葡萄糖苷酶重组大肠杆菌的构建及发酵条件优化研究
论文目录
摘要
第1-6页
ABSTRACT
第6-10页
1 绪论
第10-22页
· 引言
第10页
· α-葡萄糖苷酶的理化性质
第10-11页
· α-葡萄糖苷酶的来源
第11页
· α-葡萄糖苷酶在细胞中的分布
第11-12页
· α-葡萄糖苷酶的应用
第12-17页
· α-葡萄糖苷酶的生物学功能
第12页
· 低聚异麦芽糖
第12-16页
· α-葡萄糖苷酶在啤酒酿造中的应用
第16页
· α-葡萄糖苷酶的其它应用
第16-17页
· α-葡萄糖苷酶的研究现状
第17页
· 耐热酶的特性
第17-18页
· α-葡萄糖苷酶的的克隆与表达
第18-19页
· 大肠杆菌表达系统
第18-19页
· 质粒表达载体
第19页
· 表达宿主菌
第19页
· α-葡萄糖苷酶检测方法
第19-20页
· 研究目的和意义
第20-21页
· 主要研究内容
第21-22页
2 材料与方法
第22-34页
· 材料
第22-25页
· 菌种
第22页
· 载体
第22页
· 试剂
第22-23页
· 主要仪器
第23-24页
· 主要溶剂及其配制
第24页
· 培养基
第24页
· 培养方法
第24-25页
· 实验方法
第25-34页
· PCR 引物设计
第25页
· PCR 扩增α-糖苷酶基因
第25-26页
· 琼脂糖凝胶电泳和片段回收
第26-27页
· pET28α(+)质粒的提取
第27页
· 质粒与目的基因用限制性内切酶双酶切
第27-28页
· 连接反应
第28页
· α-糖苷酶基因的表达基因的诱导表达
第28-29页
· 酶活测定
第29-31页
· 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析
第31-34页
3 重组大肠杆菌的构建
第34-48页
· 引言
第34页
· PCR 扩增α-糖苷酶基因
第34-35页
· 双酶切
第35-36页
· 酶切回收
第36-37页
· 菌落总DNA 提取电泳
第37-38页
· 重组质粒提取
第38-39页
· Hind Ⅲ单酶切
第39-40页
· 酶活检测
第40-41页
· SDS-PAGE 电泳分析
第41-42页
· α-葡萄糖苷酶基因序列分析
第42-44页
· α-葡萄糖苷酶酶学性质的研究
第44-46页
· α-葡萄糖苷酶的最适pH
第44页
· α-葡萄糖苷酶的pH 稳定性
第44-45页
· α-葡萄糖苷酶的最适温度
第45页
· α-葡萄糖苷酶的热稳定性
第45-46页
· 本章小结
第46-48页
4 重组菌产酶条件的的研究
第48-54页
· 引言
第48页
· 碳源种类对α-葡萄糖苷酶合成的影响
第48-49页
· 接种量对α-葡萄糖苷酶合成的影响
第49页
· 金属离子对α-葡萄糖苷酶合成的影响
第49-50页
· IPTG 添加时间对α-葡萄糖苷酶合成的影响
第50-51页
· 诱导时间对α-葡萄糖苷酶合成的影响
第51页
· 重组菌产酶条件的正交设计
第51-53页
· 本章小结
第53-54页
5 结论与展望
第54-56页
· 结论
第54-55页
· 展望
第55-56页
参考文献
第56-59页
致谢
第59-60页
攻读学位期间发表的学术论文
第60-62页
本篇论文共
62
页,
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