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一种玉米14-3-3蛋白的表达纯化及其蛋白互作因子筛选
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一种玉米14-3-3蛋白的表达纯化及其蛋白互作因子筛选
论文目录
摘要
第1-7 页
Abstract
第7-11 页
第一章 前言
第11-18 页
· 14-3-3 蛋白家族的种类
第11 页
· 14-3-3 蛋白分子结构
第11-12 页
· 14-3-3 蛋白质的主要功能
第12-13 页
· 功能与表达的多样性
第12-13 页
· 蛋白质-蛋白质相互作用
第13 页
· 与蛋白激酶构成复合体
第13 页
· 与转录因子相互作用
第13 页
· 14-3-3 蛋白对植物各种生理活动过程的调控
第13-16 页
· 14-3-3 蛋白的表达与应用
第16 页
· 14-3-3 蛋白的表达
第16 页
· 植物14-3-3 蛋白在作物遗传育种的应用
第16 页
· 研究的目的和意义
第16-18 页
第二章 玉米14-3-3 蛋白克隆表达及纯化研究
第18-24 页
· 实验材料
第18 页
· 实验试剂
第18 页
· 实验方法
第18-22 页
· 引物的设计和合成
第18 页
· 玉米胚乳 RNA 的提取
第18-19 页
· 玉米籽粒胚乳cDNA 的合成
第19 页
· 基因 GF14-12 的 PCR 扩增
第19-20 页
· 用 OMEGA 胶回收试剂盒回收 PCR 产物
第20 页
· 原核表达载体的构建
第20 页
· 连接产物转化感受态细胞
第20-21 页
· 重组质粒的提取
第21 页
· 双酶切验证重组质粒
第21 页
· 外源基因诱导表达
第21-22 页
· 结果与讨论
第22-24 页
· 玉米籽粒胚乳总 RNA 的提取
第22 页
· GF14-12 基因的 RT-PCR
第22-23 页
· GF14-12 基因重组表达载体的构建
第23 页
· 目的蛋白的表达、分析及纯化
第23-24 页
第三章 14-3-3 诱饵载体的构建
第24-30 页
· 实验试剂
第24 页
· 实验方法
第24-28 页
· 诱饵载体构建
第24-25 页
· 连接产物转化
第25 页
· PCR 鉴定阳性转化子
第25-26 页
· 重组质粒的提取及限制性酶切鉴定
第26 页
· 融合蛋白的自转录激活特性与毒性检测
第26-27 页
· 利用3-AT 消除背景生长试验
第27-28 页
· 结果与讨论
第28-30 页
· 诱饵载体构建
第28 页
· 融合蛋白的转录激活特性与毒性分析
第28-29 页
· 3-AT 消除背景生长
第29-30 页
第四章 酵母双杂交文库的筛选
第30-36 页
· 实验材料
第30 页
· 实验方法
第30-34 页
· 用酵母杂交的方法验证互作的蛋白
第30 页
· 互作的表达蛋白转化子的筛选
第30-32 页
· 挽救文库cDNA 的插入片段—菌落 PCR 克隆筛选法
第32-33 页
· 候选阳性克隆的序列分析
第33-34 页
· 结果与讨论
第34-36 页
· 酵母双杂交文库的建立和筛选
第34 页
· 菌落 PCR 鉴定
第34-35 页
· 候选目的基因的测序结果分析
第35-36 页
第五章 讨论及结论
第36-37 页
· 讨论
第36 页
· 结论
第36-37 页
参考文献
第37-42 页
致谢
第42-43 页
作者简历
第43页
本篇论文共
43
页,
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