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一种玉米14-3-3蛋白的表达纯化及其蛋白互作因子筛选

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一种玉米14-3-3蛋白的表达纯化及其蛋白互作因子筛选
论文目录
 
摘要第1-7 页
Abstract第7-11 页
第一章 前言第11-18 页
  · 14-3-3 蛋白家族的种类第11 页
  · 14-3-3 蛋白分子结构第11-12 页
  · 14-3-3 蛋白质的主要功能第12-13 页
    · 功能与表达的多样性第12-13 页
    · 蛋白质-蛋白质相互作用第13 页
    · 与蛋白激酶构成复合体第13 页
    · 与转录因子相互作用第13 页
  · 14-3-3 蛋白对植物各种生理活动过程的调控第13-16 页
  · 14-3-3 蛋白的表达与应用第16 页
    · 14-3-3 蛋白的表达第16 页
    · 植物14-3-3 蛋白在作物遗传育种的应用第16 页
  · 研究的目的和意义第16-18 页
第二章 玉米14-3-3 蛋白克隆表达及纯化研究第18-24 页
  · 实验材料第18 页
  · 实验试剂第18 页
  · 实验方法第18-22 页
    · 引物的设计和合成第18 页
    · 玉米胚乳 RNA 的提取第18-19 页
    · 玉米籽粒胚乳cDNA 的合成第19 页
    · 基因 GF14-12 的 PCR 扩增第19-20 页
    · 用 OMEGA 胶回收试剂盒回收 PCR 产物第20 页
    · 原核表达载体的构建第20 页
    · 连接产物转化感受态细胞第20-21 页
    · 重组质粒的提取第21 页
    · 双酶切验证重组质粒第21 页
    · 外源基因诱导表达第21-22 页
  · 结果与讨论第22-24 页
    · 玉米籽粒胚乳总 RNA 的提取第22 页
    · GF14-12 基因的 RT-PCR第22-23 页
    · GF14-12 基因重组表达载体的构建第23 页
    · 目的蛋白的表达、分析及纯化第23-24 页
第三章 14-3-3 诱饵载体的构建第24-30 页
  · 实验试剂第24 页
  · 实验方法第24-28 页
    · 诱饵载体构建第24-25 页
    · 连接产物转化第25 页
    · PCR 鉴定阳性转化子第25-26 页
    · 重组质粒的提取及限制性酶切鉴定第26 页
    · 融合蛋白的自转录激活特性与毒性检测第26-27 页
    · 利用3-AT 消除背景生长试验第27-28 页
  · 结果与讨论第28-30 页
    · 诱饵载体构建第28 页
    · 融合蛋白的转录激活特性与毒性分析第28-29 页
    · 3-AT 消除背景生长第29-30 页
第四章 酵母双杂交文库的筛选第30-36 页
  · 实验材料第30 页
  · 实验方法第30-34 页
    · 用酵母杂交的方法验证互作的蛋白第30 页
    · 互作的表达蛋白转化子的筛选第30-32 页
    · 挽救文库cDNA 的插入片段—菌落 PCR 克隆筛选法第32-33 页
    · 候选阳性克隆的序列分析第33-34 页
  · 结果与讨论第34-36 页
    · 酵母双杂交文库的建立和筛选第34 页
    · 菌落 PCR 鉴定第34-35 页
    · 候选目的基因的测序结果分析第35-36 页
第五章 讨论及结论第36-37 页
  · 讨论第36 页
  · 结论第36-37 页
参考文献第37-42 页
致谢第42-43 页
作者简历第43页

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