论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-15页 |
| 第二章 核磁共振技术与蛋白质溶液结构的解析 | 第15-30页 |
| · 核磁共振三维结构研究的主要特征参数 | 第15-16页 |
| · 化学位移 | 第15页 |
| · 耦合常数 | 第15-16页 |
| · 核 Overhauser效应 | 第16页 |
| · 蛋白质溶液结构解析的核磁共振实验与化学位移归属 | 第16-28页 |
| · 蛋白质的表达纯化与用于核磁共振实验样品的制备 | 第17-18页 |
| · NMR 实验数据的收集和谱图处理 | 第18-25页 |
| · 多维NMR 实验介绍 | 第18-20页 |
| · 谱图说明 | 第20-24页 |
| · FID 信号的处理 | 第24-25页 |
| · 核磁共振信号的化学位移归属 | 第25-28页 |
| · 主链化学位移的归属 | 第25-27页 |
| · 侧链原子的化学位移归属 | 第27-28页 |
| · 二共振实验归属主链原子 | 第28页 |
| · 二共振实验归属侧链原子 | 第28页 |
| · 蛋白质溶液结构计算方法 | 第28-30页 |
| 第三章 CUEDC2 溶液结构初步探索 | 第30-59页 |
| 第一节 CUEDC2 的研究背景 | 第30-38页 |
| · CUEDC2 的介绍 | 第30-34页 |
| · PR 的基本信息 | 第30-32页 |
| · CUEDC2 与PR 的相互作用 | 第32-34页 |
| · CUEDC2 的结构特点 | 第34-37页 |
| · CUEDC2 结构研究目的与意义 | 第37-38页 |
| 第二节 核磁样品的制备和优化 | 第38-51页 |
| · 材料和方法 | 第38页 |
| · CUEDC2(1-133aa) 的表达、纯化与分离与蛋白质序列优化 | 第38-41页 |
| · 诱导温度与诱导时间的优化 | 第38页 |
| · 加入诱导剂IPTG 浓度的优化 | 第38-39页 |
| · 融合蛋白质GST-CUEDC2(1-133aa)的表达 | 第39页 |
| · 融合蛋白质GST-CUEDC2(1-133aa) 的纯化 | 第39页 |
| · CUEDC2(1-133aa) 重组质粒的构建 | 第39-40页 |
| · 融合蛋白质His-CUEDC2(1-133aa)的表达和纯化 | 第40-41页 |
| · CUEDC2(1-133aa) 圆二色谱实验 | 第41页 |
| · 核磁共振所用标记蛋白的表达和纯化 | 第41页 |
| · 核磁共振样品制备 | 第41页 |
| · 结果 | 第41-49页 |
| · CUEDC2 表达条件的优化的结果 | 第41-43页 |
| · GST-CUEDC2(1-133aa)纯化与酶切反应结果 | 第43-44页 |
| · His-CUEDC2(1-133aa)的纯化结果 | 第44-45页 |
| · CUEDC2(1-133aa)圆二色谱实验结果 | 第45-47页 |
| · CUEDC2(1-133aa)一维1H 实验和1H-15N HSQC 实验结果 | 第47-49页 |
| · 讨论 | 第49-51页 |
| 第三节 核磁共振实验条件优化及溶液结构初步探索 | 第51-56页 |
| · CUEDC2(1-133aa)cut 蛋白质样品核磁共振实验条件优化 | 第51-52页 |
| · CUEDC2(1-133aa)cut 的多为核磁共振实验与溶液结构初步探索 | 第52-56页 |
| · 核磁共振样品的制备 | 第53页 |
| · 多维核磁共振实验 | 第53页 |
| · 数据处理与谱峰归属 | 第53-56页 |
| 第四节 CUEDC2(133-287aa)的表达、纯化以及结构生物学初步研究 | 第56-59页 |
| · CUEDC2(133-287aa) 重组质粒的构建? | 第56页 |
| · GST-CUEDC2(133-287aa) 的表达与纯化 | 第56-57页 |
| · 结果与讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 总结与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录一 | 第64-65页 |
| 附录二 | 第65-66页 |
| 附录三 | 第66-70页 |
| 附录四 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
