论文目录 | |
摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-21页 |
1 防御素概述 | 第9-13页 |
· 防御素简介 | 第9页 |
· 人β防御素 2(Human defensin 2, HBD2)结构与功能 | 第9-11页 |
· HBD2 抗肿瘤活性及其机制 | 第11-13页 |
· HBD2 作为抗肿瘤潜能分子所存在的瓶颈 | 第13页 |
2 HER2 靶向的药物运载系统 | 第13-19页 |
· HER2 简介及 HER2 靶向药物疗法 | 第13-17页 |
· HER2 靶向抗体运载系统 | 第17-19页 |
3 课题思路 | 第19-20页 |
4 技术路线 | 第20-21页 |
第二章 基因的克隆、表达及蛋白质的纯化 | 第21-33页 |
1 实验仪器和材料 | 第21-22页 |
2 实验方法 | 第22-26页 |
· 融合蛋白的表达 | 第22-24页 |
· 融合蛋白 SUMO-HBD2-4D5 的纯化鉴定 | 第24-26页 |
· 融合蛋白 SUMO-4D5 纯化与鉴定 | 第26页 |
3 实验结果 | 第26-33页 |
· 融合蛋白的表达 | 第26-30页 |
· 融合蛋白的纯化与鉴定 | 第30-33页 |
第三章 蛋白体外生物活性检测 | 第33-46页 |
1 实验仪器和材料 | 第33-34页 |
2 实验方法 | 第34-37页 |
· 激光共聚焦扫描显微镜观察蛋白与肿瘤细胞表面 HER2 的特异性结合能力 | 第34页 |
· CCK-8 法检测蛋白药物对肿瘤细胞的细胞毒性作用 | 第34-35页 |
· 流式细胞检测 HBD2-4D5 对细胞状态的影响 | 第35页 |
· Western blot 检测 HBD2-4D5 对乳腺癌细胞凋亡通路 Bax 和 Bcl-2 的影响 | 第35-36页 |
· 扫描电子显微镜观察 HBD2-4D5 对细胞膜的影响 | 第36页 |
· 透射电子显微镜观察 HBD2-4D5 对细胞超微结构的影响 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-46页 |
· 激光共聚焦扫描显微镜观察 | 第37-39页 |
· CCK-8 法检测蛋白药物对肿瘤细胞的细胞毒性作用 | 第39页 |
· 流式细胞术检测 HBD2-4D5 对细胞状态的影响 | 第39-41页 |
· Western blot 检测 HBD2-4D5 对乳腺癌细胞凋亡通路 Bax 和 Bcl-2 的影响 | 第41-42页 |
· 药物对细胞形态结构的影响 | 第42-46页 |
第四章 讨论 | 第46-52页 |
1 融合蛋白的设计和表达纯化策略 | 第46-49页 |
2 HBD2-4D5 的靶向细胞毒作用及其机制探讨 | 第49-52页 |
结论 | 第52-54页 |
展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
附录 | 第62-66页 |
附录一:各种试剂和培养基的配制 | 第62-65页 |
附录二:目的蛋白的氨基酸序列 | 第65页 |
附录三:SUMO 基因序列 | 第65-66页 |
英文缩略词表 | 第66-67页 |
攻硕期间发表论文 | 第67-68页 |
致谢 | 第68
页 |