牛传染性鼻气管炎病毒gD基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立

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牛传染性鼻气管炎病毒gD基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立

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牛传染性鼻气管炎病毒gD基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立

论文目录
摘要	第1-6页
ABSTRACT	第6-10页
文献综述	第10-17页
第一章牛传染性鼻气管炎诊断方法研究进展	第10-17页
· 牛传染性鼻气管炎概述	第10-13页
· IBR 诊断方法研究进展	第13-15页
· 病原诊断	第13页
· 血清学诊断	第13-15页
· 分子生物学方法	第15页
· gD 蛋白的研究	第15-16页
· 研究目的和意义	第16-17页
试验研究	第17-40页
第二章牛传染性鼻气管炎病毒 gD 基因原核表达	第17-31页
· 材料	第17-21页
· 细胞、病毒和质粒	第17页
· 血清与抗体	第17页
· 主要试剂与酶	第17页
· 主要仪器	第17-18页
· 主要试剂的配制	第18-21页
· 方法	第21-26页
· 牛传染性鼻气管炎病毒 gD 基因的克隆	第21-23页
· 原核表达载体的构建及鉴定	第23-24页
· 重组 gD 蛋白的诱导表达	第24-25页
· 重组蛋白的 SDS-PAGE 检测	第25页
· 重组蛋白的纯化	第25页
· 纯化 gD 蛋白的 SDS-PAGE 检测	第25-26页
· 纯化蛋白的 Western blot 检测	第26页
· 结果	第26-29页
· gD 基因的 PCR 扩增结果	第26页
· 重组克隆质粒的双酶切鉴定结果	第26-27页
· 基因序列测定和分析	第27页
· 重组原核表达质粒的双酶切鉴定	第27-28页
· 重组质粒测序分析	第28页
· 表达产物的鉴定	第28-29页
· 讨论	第29-30页
· 小结	第30-31页
第三章牛传染性鼻气管炎病毒 gD 蛋白间接 ELISA 检测方法的建立及初步应用	第31-40页
· 材料	第31-32页
· 主要仪器、血清和试剂	第31页
· 主要工作液的配制	第31-32页
· 临床样品来源	第32页
· 方法	第32-34页
· ELISA 最佳工作条件的确定	第32-34页
· 间接 ELISA 方法阴阳性临界值的确定	第34页
· 特异性实验	第34页
· 敏感性实验	第34页
· 重复性实验	第34页
· 临床样品的初步检测及对比性试验	第34页
· 结果	第34-39页
· 棋盘滴定法选择抗原和血清的工作浓度	第34-35页
· 抗原最佳包被条件的确定结果	第35-36页
· 酶标二抗最佳工作浓度的确定结果	第36页
· 最佳封闭液的确定	第36页
· 血清最佳反应时间的确定	第36页
· 底物反应最佳时间的确定	第36-37页
· ELISA 阴阳性临界值的确定结果	第37页
· 特异性试验结果	第37-38页
· 敏感性试验结果	第38页
· 重复性试验结果	第38页
· 临床样品检测结果	第38-39页
· 讨论	第39页
· 小结	第39-40页
结论	第40-41页
参考文献	第41-45页
致谢	第45-46页
作者简介	第46页

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